孕酮是一種性激素，它是一種反應(yīng)卵巢活動狀態(tài)的精確指示劑。監(jiān)測乳汁孕酮含量是預(yù)防和治療奶牛繁殖障礙性疾病的最有效手段。孕酮在奶牛體內(nèi)含量比較低，需要有高效、靈敏和特異性的檢測方法才能準確測得。本研究在優(yōu)化的孕酮生物傳感器的基礎(chǔ)上，結(jié)合商品化的ELISA試劑盒開展了對發(fā)情的、妊娠的、繁殖障礙疾病的奶牛血漿和乳汁中的生殖激素，尤其是對孕酮進行檢測，旨在了解優(yōu)化的孕酮生物傳感器的檢測性能，為奶牛臨床應(yīng)用提供科學依據(jù)。 首先，本實驗選用孕酮衍生物孕酮-11α-半琥珀酸酯(11α-hydroxyprogesteronehemisuccinate)作為半抗原與卵清白蛋白(OVA)在偶聯(lián)劑二環(huán)己基碳二亞胺(DDC)的作用下制備成完全抗原(P4-OVA)；通過免疫學檢測證明偶聯(lián)完全抗原成功。以此為基礎(chǔ)優(yōu)化了孕酮免疫生物傳感器的反應(yīng)條件：生物傳感器檢測孕酮的線性范圍在0.31⁵0ng/mL，檢測限為0.31ng/mL。生物傳感器的曲線方程為： y=-4.9461x+8.7982(R2=0.9932)。傳感器檢測的選擇特異性較好，與皮質(zhì)酮、皮質(zhì)醇、雄烯二酮無交叉反應(yīng)。 其次，本實驗應(yīng)用...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 文獻綜述
    1.1 孕酮
        1.1.1 孕酮的基本性質(zhì)和特性
        1.1.2 孕酮在體內(nèi)的合成與濃度
        1.1.3 孕酮的生理作用
        1.1.4 孕酮的檢測
        1.1.5 孕酮檢測的國內(nèi)外研究進展
    1.2 生物傳感器
        1.2.1 生物傳感器的組成
        1.2.2 生物傳感器的分類
        1.2.3 生物傳感器的應(yīng)用
    1.3 奶牛生殖激素變化規(guī)律的研究進展
        1.3.1 奶牛生殖激素變化的變化規(guī)律研究
        1.3.2 奶牛生殖激素的來源生理作用及變化規(guī)律
    1.4 奶牛乏情的發(fā)生機理研究進展
        1.4.1 奶牛產(chǎn)后發(fā)情的生殖激素調(diào)控作用
        1.4.2 奶牛產(chǎn)后乏情的主要類型
    1.5 研究目的
第二章 孕酮免疫生物傳感器的優(yōu)化
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器設(shè)備
        2.1.2 主要試劑
    2.2 方法
        2.2.1 完全檢測抗原制備及鑒定
        2.2.2 乳汁標準曲線的測定
        2.2.3 生物傳感器的靈敏度
        2.2.4 生物傳感器的精確度
        2.2.5 生物傳感器的準確度
        2.2.6 生物傳感器的特異性
        2.2.7 生物傳感器的穩(wěn)定性
        2.2.8 實驗樣品的準備及測定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 完全抗原免疫活性鑒定結(jié)果
        2.3.2 生物傳感器的標準曲線
        2.3.3 生物傳感器的靈敏度
        2.3.4 生物傳感器的精確度
        2.3.5 生物傳感器的準確度
        2.3.6 生物傳感器的特異性
        2.3.7 生物傳感器的穩(wěn)定性
        2.3.8 生物傳感器的樣品測定實驗
    2.4 討論
        2.4.1 生物傳感器的標準曲線
        2.4.2 生物傳感器的靈敏度
        2.4.3 生物傳感器的特異性
        2.4.4 生物傳感器的準確性
        2.4.5 生物傳感器的精確度
        2.4.6 生物傳感器的穩(wěn)定性
    2.5 小結(jié)
第三章 孕酮免疫生物傳感器的應(yīng)用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 試驗動物分組與樣品處理
        3.1.4 主要檢測項目和方法
        3.1.5 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 妊娠奶牛血漿生殖激素和乳汁孕酮變化
        3.2.2 發(fā)情奶牛與繁殖障礙性疾病奶牛血漿生殖激素與乳汁孕酮變化
    3.3 討論
        3.3.1 妊娠奶牛生殖激素的變化
        3.3.2 發(fā)情奶牛生殖激素的變化
        3.3.3 乏情奶牛生殖激素的變化
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄
個人簡歷



本文編號：3764352