目的:泡型包蟲病(alveolar echinococcosis,AE)是由多房棘球絳蟲(Echinococcus multilocularis,E.m)的幼蟲泡球蚴引起的致死性寄生蟲病,在肝實質(zhì)內(nèi)呈彌漫性浸潤生長,被稱為“蟲癌”。研究表明,泡球蚴病在我國西部省份流行非常嚴(yán)重,AE感染病人占世界患病人數(shù)的90%以上。然而,目前還沒有有效的疫苗和藥物來控制該病,同時宿主感染泡球蚴導(dǎo)致的肝損傷機(jī)制目前也不清楚。有研究表明,泡球蚴來源不同,其對人和動物的致病性存在差異;不同源地的泡球蚴感染宿主導(dǎo)致的肝損傷也存在差異,然而目前并不清楚這些差異。因此,本研究以5株不同來源的泡球蚴為研究對象,包括阿拉斯加株(EM-1)、新疆株(EM-2)、日本株(EM-4)、寧夏株(EM-5)和青海株(EM-6),比較不同源地泡球蚴腹腔接種后產(chǎn)生PSCs的差異、致小鼠肝損傷的差異及線粒體(Mitochondria)基因組的差異,試圖闡明不同源地泡球蚴致病性差異與進(jìn)化規(guī)律的關(guān)系,為進(jìn)一步了解泡球蚴致病機(jī)制奠定基礎(chǔ),為解決上述若干問題,本研究擬通過三個實驗來完成:1.建立5株EM的小鼠腹腔感染模型,探討泡球蚴保種傳代...

【文章頁數(shù)】：138 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞對照表
第一章 緒論
    1 研究的目的和意義
        1.1 泡型包蟲病(Alveolar Echinococcoisis,AE)的危害
        1.2 不同源地泡球蚴感染所致宿主致病性存在較大差異,但差異機(jī)制不明
    2 國內(nèi)外研究進(jìn)展
        2.1 多房棘球絳蟲的流行特征
        2.2 泡球蚴感染后導(dǎo)致肝損傷的致病機(jī)制
        2.3 T細(xì)胞在泡球蚴感染中的作用
        2.4 多房棘球絳蟲基因遺傳變異及分型
        2.5 線粒體在寄生蟲感染中的作用
    3 本課題的主要研究內(nèi)容
第二章 試驗研究
    試驗一泡球蚴不同株腹腔感染小鼠后產(chǎn)生PSCS差異的研究
        1 研究材料與方法
            1.1 主要儀器設(shè)備與試劑
            1.2 實驗方法
            1.3 統(tǒng)計方法
            1.4 倫理審查
        2 結(jié)果
            2.1 泡球蚴PSCs的采集及純化
            2.2 腹腔感染不同株泡球蚴后KM小鼠和長爪沙鼠包囊的病變
            2.3 腹腔感染不同株泡球蚴后KM小鼠體重變化及包囊重量的比較
            2.4 腹腔感染不同株泡球蚴后包囊產(chǎn)生PSCs數(shù)量及差異
            2.5 腹腔感染不同株泡球蚴后肝臟PSCs數(shù)量的差異
            2.6 腹腔感染不同株泡球蚴后包囊重量與PSCs數(shù)量的spearman相關(guān)性分析
        3 討論
            3.1 傳代保種方法及實驗動物的選擇
            3.2 腹腔接種方法的優(yōu)點(diǎn)及注意事項
            3.3 接種后各項指標(biāo)的評價
            3.4 各株腹腔感染后肝臟產(chǎn)生PSCs的差異
            3.5 脾臟及其他臟器感染包囊原因分析
            3.6 PSCs數(shù)量與包囊及肝臟重量呈正相關(guān)原因分析
        4 小結(jié)
    試驗二不同株泡球蚴肝門靜脈感染小鼠致肝損傷的研究
        1 研究材料與方法
            1.1 主要儀器設(shè)備與試劑
            1.2 實驗方法
            1.3 倫理審查
            1.4 PSCs的采集和活性檢測
            1.5 統(tǒng)計方法
        2 結(jié)果
            2.1 不同株感染小鼠模型肝臟病理變化
            2.2 實驗小鼠肝臟組織轉(zhuǎn)錄組表達(dá)譜分析
            2.3 兩株泡球蚴感染小鼠肝臟差異表達(dá)基因分析
            2.4 差異表達(dá)基因的驗證
        3 討論
            3.1 不同株肝門靜脈動物小鼠模型的建立
            3.2 肝門靜脈注射感染小鼠后肝臟重量、脾臟重量、肝臟/體重比、脾臟/體重比的差異
            3.3 α-SMA、COL3A1和ERK在不同株泡球蚴感染小鼠后表達(dá)水平的差異
            3.4 泡球蚴感染過程中免疫相關(guān)細(xì)胞因子的作用
            3.5 上調(diào)基因與下調(diào)基因在泡球蚴感染過程中的作用
        4 小結(jié)
    試驗三泡球蚴不同株MTDNA基因序列差異分析的研究
        1 研究材料與方法
            1.1 主要儀器設(shè)備與試劑
            1.2 實驗方法
        2 結(jié)果
            2.1 mtDNA環(huán) DNA質(zhì)檢電泳結(jié)果
            2.2 五株mt DNA環(huán)基因特點(diǎn)
            2.3 遺傳距離分析
            2.4 mtDNA核苷酸變異位點(diǎn)及同源性分析
            2.5 PCGs基因變異位點(diǎn)及同源性分析
        3 討論
        4 小結(jié)
第三章 全文結(jié)論
第四章 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
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