遼寧省朝陽(yáng)地區(qū)豬場(chǎng)布魯氏菌感染的調(diào)查研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-18 23:07
布魯氏菌病是一種嚴(yán)重威脅人類健康的細(xì)菌性人獸共患病。布魯氏菌主要有流產(chǎn)布魯氏菌(B.abortus,牛布魯氏菌)、馬耳他布魯氏菌(B.melitensis,羊布魯氏菌)、豬布魯氏菌(B.suis)和綿羊附睪布魯氏菌(B.ovis)。布魯氏菌能夠感染各種馴養(yǎng)和野生動(dòng)物,并對(duì)生殖系統(tǒng)的器官具有強(qiáng)烈的親和力,可導(dǎo)致母畜流產(chǎn)和病畜生育能力減退,使畜主遭受嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了更進(jìn)一步的了解遼寧地區(qū)動(dòng)物布魯氏菌感染的流行情況,本研究針對(duì)2016年-2018年遼寧省朝陽(yáng)地區(qū)規(guī);B(yǎng)豬場(chǎng)采集的豬血清樣本和豬全血樣本,分別進(jìn)行動(dòng)物布魯氏菌的虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)、微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)和競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)的血清學(xué)調(diào)查,以及動(dòng)物布魯氏菌Bruce-Ladder多重PCR檢測(cè)和多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析(MLVA-15)的分子生物學(xué)調(diào)查,針對(duì)動(dòng)物布魯氏菌的感染率和流行菌株進(jìn)行檢測(cè)鑒定分析。結(jié)果表明,2016年-2018年遼寧省朝陽(yáng)地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)動(dòng)物布魯氏菌的感染率是26.24%;遼寧省朝陽(yáng)地區(qū)規(guī);B(yǎng)豬場(chǎng)主要流行菌株為豬布魯氏菌(B.suis)。本研究為遼寧地區(qū)預(yù)防和控制布...
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 前言
1.1 布魯氏菌病
1.2 診斷技術(shù)
1.2.1 臨床診斷
1.2.2 血清學(xué)診斷
1.2.3 病原學(xué)診斷
1.3 主要功能基因
1.3.1 LPS相關(guān)基因
1.3.2 外膜蛋白(Omp)基因
1.3.3 分泌蛋白(VirB)基因
1.3.4 調(diào)控蛋白(BvrR/BvrS)基因與熱休克蛋白基因
1.4 布魯氏菌參考菌株的宿主和地理區(qū)域分布
1.5 B.microti和 B.inopinata與其他菌種的關(guān)系
第二章 遼寧地區(qū)動(dòng)物布魯氏菌感染率的血清學(xué)調(diào)查
2.1 材料
2.1.1 血液樣品
2.1.2 血清樣品
2.1.3 布魯氏菌標(biāo)準(zhǔn)血清
2.1.4 主要儀器
2.1.5 主要試劑
2.1.6 溶液配制
2.2 方法
2.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)
2.2.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.2.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.3 結(jié)果
2.3.1 虎紅凝集平板試驗(yàn)(RBT)
2.3.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.3.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.4 討論
2.4.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)
2.4.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.4.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.5 小結(jié)
2.5.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)結(jié)論
2.5.2 微量試管凝集試驗(yàn)結(jié)論
2.5.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)論
第三章 遼寧地區(qū)動(dòng)物布魯氏菌流行菌株的分子生物學(xué)調(diào)查
3.1 材料
3.1.1 血液樣品
3.1.2 布魯氏菌野毒株
3.1.3 布魯氏菌疫苗株
3.1.4 主要儀器
3.1.5 主要試劑
3.1.6 溶液配制
3.1.7 引物
3.2 方法
3.2.1 布魯氏菌DNA的制備
3.2.2 布魯氏菌Bruce-Ladder多重PCR檢測(cè)
3.2.3 布魯氏菌多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析(MLVA-15)
3.3 結(jié)果
3.3.1 布魯氏菌Bruce-Ladder多重PCR檢測(cè)
3.3.2 多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析(MLVA-15)
3.4 討論
3.4.1 化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)Taq酶 PCR反應(yīng)擴(kuò)增體系
3.4.2 Bruce-Ladder
3.4.3 MLVA-15
3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 中英文對(duì)照表
本人在攻讀碩士學(xué)位期間所獲得專利和獎(jiǎng)勵(lì)及參加學(xué)術(shù)會(huì)議情況
本文編號(hào):3764050
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 前言
1.1 布魯氏菌病
1.2 診斷技術(shù)
1.2.1 臨床診斷
1.2.2 血清學(xué)診斷
1.2.3 病原學(xué)診斷
1.3 主要功能基因
1.3.1 LPS相關(guān)基因
1.3.2 外膜蛋白(Omp)基因
1.3.3 分泌蛋白(VirB)基因
1.3.4 調(diào)控蛋白(BvrR/BvrS)基因與熱休克蛋白基因
1.4 布魯氏菌參考菌株的宿主和地理區(qū)域分布
1.5 B.microti和 B.inopinata與其他菌種的關(guān)系
第二章 遼寧地區(qū)動(dòng)物布魯氏菌感染率的血清學(xué)調(diào)查
2.1 材料
2.1.1 血液樣品
2.1.2 血清樣品
2.1.3 布魯氏菌標(biāo)準(zhǔn)血清
2.1.4 主要儀器
2.1.5 主要試劑
2.1.6 溶液配制
2.2 方法
2.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)
2.2.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.2.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.3 結(jié)果
2.3.1 虎紅凝集平板試驗(yàn)(RBT)
2.3.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.3.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.4 討論
2.4.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)
2.4.2 微量試管凝集試驗(yàn)(SAT)
2.4.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(C-ELISA)
2.5 小結(jié)
2.5.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)結(jié)論
2.5.2 微量試管凝集試驗(yàn)結(jié)論
2.5.3 競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)論
第三章 遼寧地區(qū)動(dòng)物布魯氏菌流行菌株的分子生物學(xué)調(diào)查
3.1 材料
3.1.1 血液樣品
3.1.2 布魯氏菌野毒株
3.1.3 布魯氏菌疫苗株
3.1.4 主要儀器
3.1.5 主要試劑
3.1.6 溶液配制
3.1.7 引物
3.2 方法
3.2.1 布魯氏菌DNA的制備
3.2.2 布魯氏菌Bruce-Ladder多重PCR檢測(cè)
3.2.3 布魯氏菌多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析(MLVA-15)
3.3 結(jié)果
3.3.1 布魯氏菌Bruce-Ladder多重PCR檢測(cè)
3.3.2 多位點(diǎn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列分析(MLVA-15)
3.4 討論
3.4.1 化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)Taq酶 PCR反應(yīng)擴(kuò)增體系
3.4.2 Bruce-Ladder
3.4.3 MLVA-15
3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 中英文對(duì)照表
本人在攻讀碩士學(xué)位期間所獲得專利和獎(jiǎng)勵(lì)及參加學(xué)術(shù)會(huì)議情況
本文編號(hào):3764050
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