蛋白激酶C對(duì)PRRSV感染的影響以及GP5重組乳酸克魯維酵母免疫效果的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-18 22:56
豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)感染引起的一種豬的高度傳染性疾病。臨床上以妊娠母豬的繁殖障礙以及各年齡段豬,尤其是仔豬的呼吸性障礙為主要特征,給全球的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此,預(yù)防及控制PRRSV的感染和傳播是目前亟待解決的問(wèn)題。研究宿主細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)(包括蛋白激酶C)對(duì)PRRSV感染的影響以及新型有效疫苗的探索具有重要意義。本論文分別對(duì)這兩項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行研究。 蛋白激酶C (PKC)是細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的重要成分,參與調(diào)控細(xì)胞的增殖、遷移、分化和凋亡等多種重要的細(xì)胞功能。近年來(lái),大量的研究表明許多病毒能夠改變細(xì)胞蛋白激酶C的活性,利用PKC信號(hào)通路調(diào)控病毒的復(fù)制。但是,PKC信號(hào)通路對(duì)PRRSV復(fù)制的影響目前并不清楚。論文第一部分發(fā)現(xiàn)特異性抑制劑GF109203X抑制PKC信號(hào)通路后,細(xì)胞內(nèi)病毒RNA的合成減少以及病毒蛋白的表達(dá)下降,降低...
【文章頁(yè)數(shù)】:104 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
第一章 引言
1.1 豬繁殖與呼吸綜合征
1.1.1 PRRS的危害及流行病學(xué)特點(diǎn)
1.1.2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)
1.2 PRRSV疫苗研究現(xiàn)狀
1.2.1 滅活疫苗
1.2.2 弱毒疫苗
1.2.3 亞單位疫苗
1.2.4 核酸疫苗
1.2.5 載體疫苗
1.3 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信號(hào)通路
1.3.1 PKC的結(jié)構(gòu)
1.3.2 PKC的激活
1.3.3 PKC信號(hào)通路的功能
1.3.4 PKC信號(hào)通路與病毒感染
1.4 研究目的與意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)菌株及載體
2.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及病毒
2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.5 主要實(shí)驗(yàn)試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 重組乳酸克魯維酵母疫苗實(shí)驗(yàn)方法
2.2.2 蛋白激酶C對(duì)PRRSV感染影響實(shí)驗(yàn)方法
第三章 蛋白激酶C對(duì)PRRSV感染影響的初步研究
3.1 結(jié)果與分析
3.1.1 GF109203X抑制PRRSV的產(chǎn)生
3.1.2 不同濃度GF109203X對(duì)PRRSV復(fù)制的影響
3.1.3 GF109203X抑制病毒RNA的合成和病毒粒子的產(chǎn)生
3.1.4 GF109203X抑制病毒蛋白的表達(dá)
3.1.5 GF109203X主要在病毒感染的早期階段抑制PRRSV的復(fù)制
3.1.6 GF109203X影響PRRSV的進(jìn)入但不影響吸附
3.1.7 PRRSV的復(fù)制依賴(lài)于PKCδ
3.1.8 GF109203X影響PAMs中細(xì)胞因子的表達(dá)
3.2 討論
3.3 小結(jié)
第四章 GP5重組乳酸克魯維酵母疫苗免疫效果的初步研究
4.1 結(jié)果與分析
4.1.1 多克隆抗體的制備
4.1.2 重組乳酸克魯維酵母Yeast-GP5的構(gòu)建
4.1.3 Western blot檢測(cè)重組酵母Yeast-GP5的表達(dá)
4.1.4 Yeast-GP5免疫對(duì)PRRSV特異性IgG和sIgA的影響
4.1.5 Yeast-GP5誘導(dǎo)PRRSV特異性T淋巴細(xì)胞增殖
4.1.6 Yeast-GP5對(duì)IL-4表達(dá)的影響
4.1.7 Yeast-GP5能夠增強(qiáng)PRRSV特異性IFN-γ的產(chǎn)生
4.2 討論
4.3 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3764034
【文章頁(yè)數(shù)】:104 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
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摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
第一章 引言
1.1 豬繁殖與呼吸綜合征
1.1.1 PRRS的危害及流行病學(xué)特點(diǎn)
1.1.2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)
1.2 PRRSV疫苗研究現(xiàn)狀
1.2.1 滅活疫苗
1.2.2 弱毒疫苗
1.2.3 亞單位疫苗
1.2.4 核酸疫苗
1.2.5 載體疫苗
1.3 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信號(hào)通路
1.3.1 PKC的結(jié)構(gòu)
1.3.2 PKC的激活
1.3.3 PKC信號(hào)通路的功能
1.3.4 PKC信號(hào)通路與病毒感染
1.4 研究目的與意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)菌株及載體
2.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及病毒
2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.5 主要實(shí)驗(yàn)試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 重組乳酸克魯維酵母疫苗實(shí)驗(yàn)方法
2.2.2 蛋白激酶C對(duì)PRRSV感染影響實(shí)驗(yàn)方法
第三章 蛋白激酶C對(duì)PRRSV感染影響的初步研究
3.1 結(jié)果與分析
3.1.1 GF109203X抑制PRRSV的產(chǎn)生
3.1.2 不同濃度GF109203X對(duì)PRRSV復(fù)制的影響
3.1.3 GF109203X抑制病毒RNA的合成和病毒粒子的產(chǎn)生
3.1.4 GF109203X抑制病毒蛋白的表達(dá)
3.1.5 GF109203X主要在病毒感染的早期階段抑制PRRSV的復(fù)制
3.1.6 GF109203X影響PRRSV的進(jìn)入但不影響吸附
3.1.7 PRRSV的復(fù)制依賴(lài)于PKCδ
3.1.8 GF109203X影響PAMs中細(xì)胞因子的表達(dá)
3.2 討論
3.3 小結(jié)
第四章 GP5重組乳酸克魯維酵母疫苗免疫效果的初步研究
4.1 結(jié)果與分析
4.1.1 多克隆抗體的制備
4.1.2 重組乳酸克魯維酵母Yeast-GP5的構(gòu)建
4.1.3 Western blot檢測(cè)重組酵母Yeast-GP5的表達(dá)
4.1.4 Yeast-GP5免疫對(duì)PRRSV特異性IgG和sIgA的影響
4.1.5 Yeast-GP5誘導(dǎo)PRRSV特異性T淋巴細(xì)胞增殖
4.1.6 Yeast-GP5對(duì)IL-4表達(dá)的影響
4.1.7 Yeast-GP5能夠增強(qiáng)PRRSV特異性IFN-γ的產(chǎn)生
4.2 討論
4.3 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
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個(gè)人簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3764034
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