為在細(xì)胞水平探討皮質(zhì)酮(CORT)誘導(dǎo)HT22細(xì)胞凋亡的機(jī)制,以模擬冷應(yīng)激過程中機(jī)體分泌的糖皮質(zhì)激素對海馬神經(jīng)元的作用。試驗(yàn)組HT22細(xì)胞用500μmol/L CORT處理3 h,對照組不予處理。用CCK8法檢測CORT對HT22細(xì)胞活力的影響,Annexin/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。為了進(jìn)一步研究CORT引起的海馬神經(jīng)元凋亡是否是由線粒體凋亡通路介導(dǎo)的,用JC-1探針檢測線粒體膜電位的變化,免疫蛋白印跡(Western blot)檢測凋亡相關(guān)蛋白細(xì)胞色素c(Cyt-c)、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達(dá)。結(jié)果顯示,與對照組相比,500μmol/L CORT處理組細(xì)胞生存率顯著降低,細(xì)胞凋亡率顯著升高,線粒體膜電位顯著下降,Cyt-c、Bax/Bcl-2及活化的Caspase-3表達(dá)水平顯著升高。結(jié)果表明,500μmol/L CORT處理3 h會導(dǎo)致HT22細(xì)胞凋亡,并且線粒體凋亡通路在該過程中發(fā)揮重要作用。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞系
    1.2 主要儀器
    1.3 主要試劑
    1.4 HT22細(xì)胞的培養(yǎng)
    1.5 CCK8法檢測CORT對HT22細(xì)胞存活率的影響
    1.6 流式細(xì)胞儀檢測HT22細(xì)胞凋亡情況
    1.7 JC-1探針法檢測線粒體膜電位
    1.8 Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)
    1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 CORT對HT22細(xì)胞存活率的影響
    2.2 細(xì)胞凋亡檢測
    2.3 線粒體膜電位檢測
    2.4 凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的檢測
3 討論



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