為了解近期山東地區(qū)禽源H9N2亞型禽流感發(fā)病流行狀況及流行毒株分子遺傳進(jìn)化特征,對2012-2013年山東各地送檢的種雞、商品蛋雞以及商品肉雞6385份血清進(jìn)行了檢測分析,對35例疑似病例進(jìn)行了臨床綜合診斷分析,對部分H9N2亞型AIV分離株通過RT-PCR擴(kuò)增病毒的HA基因片段,進(jìn)行測序及遺傳進(jìn)化分析,并對這些病毒的受體結(jié)合性進(jìn)行了檢測分析。結(jié)果表明:山東地區(qū)免疫雞群H9亞型的HI抗體水平較高,尤其是種雞和商品蛋雞大多數(shù)平均高于8個滴度。相比而言,商品肉雞和商品蛋雞群免疫合格率較低,疑似感染雞群的比例較高,雞群免疫狀態(tài)不容樂觀,感染風(fēng)險較大;種雞群免疫合格率較高,疑似感染雞群的比例較低,雞群免疫狀態(tài)較好,感染發(fā)病的風(fēng)險較低。兩年度相比各類雞群抗體水平具有一定的差異性,2013年各類雞群的免疫狀態(tài)明顯好于2012年;對送檢的35例疑似病例經(jīng)過綜合診斷,19例確診為H9N2亞型禽流感,確診病雞的臨床癥狀、剖檢病變及組織病理學(xué)變化均符合H9N2亞型禽流感的疾病特征;分離鑒定病毒17株,對其中6株病毒進(jìn)行了分子生物學(xué)特性檢測。6株H9N2亞型AIV分離株的HA基因在HA1和HA2的氨基酸裂解...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 禽流感病毒的病原學(xué)特性
        1.1.1 病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)
        1.1.2 AIV命名原則
        1.1.3 基因結(jié)構(gòu)以及編碼的主要結(jié)構(gòu)蛋白
        1.1.4 理化特性
    1.2 H9N2流感病毒的分子流行病學(xué)特征
        1.2.1 H9N2流感病毒對禽的感染
        1.2.2 H9N2流感病毒對豬的感染
        1.2.3 H9N2流感病毒對人的感染
    1.3 H9N2流感病毒的致病特點(diǎn)
        1.3.1 致病性
        1.3.2 傳播性
        1.3.3 流行性
        1.3.4 禽流感病毒的遺傳變異
        1.3.5 受體結(jié)合特性
    1.4 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 病料來源
        2.1.2 SPF雞胚
        2.1.3 抗原
        2.1.4 引物
        2.1.5 試劑
        2.1.6 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 紅細(xì)胞凝集試驗（HA）
        2.2.2 紅細(xì)胞凝集抑制試驗（HI）
        2.2.3 組織病理學(xué)觀察
        2.2.4 紅細(xì)胞法測定AIV受體結(jié)合特性
        2.2.5 病毒的增殖
        2.2.6 病毒總RNA提取
        2.2.7 反轉(zhuǎn)錄cDNA合成
        2.2.8 基因片段的擴(kuò)增
        2.2.9 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的純化與回收
        2.2.10 基因片段的克隆與測序
        2.2.11 質(zhì)粒的提取與保存
        2.2.12 基因序列分析
        2.2.13 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
3 結(jié)果
    3.1 送檢血清抗體水平檢測
    3.2 疑似病例綜合診斷
        3.2.1 發(fā)病雞群的臨床癥狀
        3.2.2 剖檢病理變化
        3.2.3 組織病理學(xué)變化
    3.3 病毒檢測及分離鑒定
        3.3.1 病毒分離鑒定
        3.3.2 分離株序列測定HA基因RT-PCR擴(kuò)增
        3.3.3 關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)分析
        3.3.4 基因進(jìn)化樹分析
        3.3.5 紅細(xì)胞法測定病毒受體結(jié)合特性
4 討論
    4.1
    4.2
    4.3
5 結(jié)論
    5.1
    5.2
    5.3
    5.4
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3747223