發(fā)布時(shí)間：2023-02-20 15:26

　　J亞群禽白血病病毒是由（Subgroup J Avian Leukosis Virus）是1988年英國科學(xué)家Payne首先在肉雞中發(fā)現(xiàn)的，主要引起以髓細(xì)胞瘤和其他細(xì)胞惡性腫瘤為特征的傳染性腫瘤性疾病。我國于1999年首次從肉雞中發(fā)現(xiàn)該病毒，2004年從蛋雞中發(fā)現(xiàn)該病毒，之后陸續(xù)從地方品種雞中發(fā)現(xiàn)。ALV-J自發(fā)現(xiàn)以來，宿主范圍不斷擴(kuò)大，感染雞的發(fā)病日齡逐漸提前，致死率不斷升高，誘導(dǎo)的腫瘤型越來越多，病毒重組也時(shí)有發(fā)生。為了了解山東省地區(qū)ALV-J在蛋雞群的流行狀況、致病特點(diǎn)及相關(guān)宿主因素，本研究對山東省范圍內(nèi)的父母代蛋種雞場進(jìn)行ALV-J的血清和分子流行病學(xué)調(diào)查、病毒在自然感染蛋雞體內(nèi)的致瘤性觀察及宿主受體、原癌基因和內(nèi)源性ALV基因表達(dá)檢測，初步得到的結(jié)果如下： 從山東省選取了22家父母代蛋種雞場和4家商品代蛋雞場，共采集活體樣本83只，血清2740份實(shí)際檢測數(shù)為2350份；通過ELISA技術(shù)檢測血清抗體發(fā)現(xiàn)，蛋雞群中ALV-J抗體平均陽性率在8.3%，雞群感染陽性率為65%（17/26），在這些ALV-J抗體陽性的蛋雞群中，海蘭褐等進(jìn)口雞群抗體平均陽性率為3%，相對較低；中國地方...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 ALV-J 病原學(xué)
        1.1.1 ALV 亞群分類
        1.1.2 ALV-J 的病毒及基因組結(jié)構(gòu)
    1.2 ALV-J 的流行病學(xué)研究概括
    1.3 ALV-J 的致病性
    1.4 ALV-J 的診斷和防控
        1.4.1 ALV-J 的診斷
        1.4.2 ALV-J 的防控
    1.5 ALV-J 受體-CHNHE1 蛋白
    1.6 原癌基因 C-MYC 和 C-MYB
    1.7 抑癌基因 P53
    1.8 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 ALV-J 血清流行病學(xué)及分子流行病學(xué)調(diào)查
        2.1.1 主要試劑及儀器
        2.1.2 細(xì)胞、毒株、菌株
        2.1.3 樣品采集
        2.1.4 ALV-J 抗體檢測
        2.1.5 REV 抗體檢測
        2.1.6 ALV-J 的分離和鑒定
            2.1.6.1 病毒培養(yǎng)
            2.1.6.2 ELISA 檢測 ALV 抗原 P27
            2.1.6.3 提取前病毒基因組 DNA
            2.1.6.4 ALV-J、REV 和 MLV 的 PCR 檢測
            2.1.6.5 gp85、gp37、3’UTR 和 3’LTR 基因分離及克隆測序
            2.1.6.6 gp85、gp37、3’UTR 和 3’LTR 基因序列比較分析
    2.2 ALV-J 在自然感染蛋雞中致瘤普觀察
        2.2.1 主要試劑及儀器
        2.2.2 病料來源
        2.2.3 組織病理學(xué)觀察
        2.2.4 血液學(xué)觀察
            2.2.4.1 全血分析
            2.2.4.2 血涂片、骨髓涂片觀察
    2.3 ALV-J 感染機(jī)體內(nèi)病毒負(fù)載量、CHNHE1 蛋白、C-MYC、P53 及 EAV-0、E51 表達(dá)量的檢測
        2.3.1 主要試劑及儀器
        2.3.2 材料來源
        2.3.3 熒光定量 PCR 引物的設(shè)計(jì)與合成
        2.3.4 組織 RNA 的提取和 cDNA 的合成
        2.3.5 常規(guī) PCR 檢測
        2.3.6 ALV-J 自然感染蛋雞體內(nèi) ALV-J 負(fù)載量、chNHE1 蛋白、c-myc、p53 和 EAV-0、E51表達(dá)量檢測
        2.3.7 ALV-J 人工感染雞體內(nèi) ALV-J 負(fù)載量、chNHE1 蛋白表達(dá)量檢測
            2.3.7.1 人工接種 SPF 雞胚及雛雞排毒檢測
            2.3.7.2 ALV-J 負(fù)載、chNHE1 蛋白表達(dá)量檢測
3 結(jié)果與分析
    3.1 ALV-J 血清流行病學(xué)和分子流行病學(xué)的調(diào)查
        3.1.1 樣品采集
        3.1.2 血清學(xué)檢測
        3.1.3 ALV-J 的分離與鑒定
            3.1.3.1 P27 抗原及 PCR 檢測
            3.1.3.2 env、3’UTR 和 3’LTR 基因的分離
            3.1.3.3 env、3’UTR 和 3’LTR 基因堿基序列分析
    3.2 ALV-J 在自然感染蛋雞中的致瘤譜觀察
        3.2.1 組織病理學(xué)觀察
        3.2.2 全血分析
        3.2.3 血涂片觀察
    3.3 ALV-J 感染雞體內(nèi)病毒負(fù)載量、CHNHE1 蛋白、C-MYC、P53 及 EAV-0、E51 表達(dá)量的檢測
        3.3.1 常規(guī) PCR 檢測
        3.3.2 ALV-J 自然感染蛋雞體內(nèi) ALV-J 負(fù)載量、chNHE1 蛋白、c-myc、p53 和 EAV-0、E51表達(dá)量檢測
            3.3.2.1 引物溶解曲線、擴(kuò)增曲線分析
            3.3.2.2 ALV-J 自然感染蛋雞腎臟病毒負(fù)載的檢測
            3.3.2.3 ALV-J 受體-chNHE1 蛋白表達(dá)量的檢測
            3.3.2.4 ALV-J 人工感染蛋雞體內(nèi) ALV-J 負(fù)載量、chNHE1 蛋白表達(dá)量檢測
            3.3.2.5 原癌基因 c-myc 表達(dá)量的檢測
            3.3.2.6 抑癌基因 P53 表大量的檢測
            3.3.2.7 內(nèi)源性病毒 EAV-0 表大量的檢測
            3.3.2.8 內(nèi)源性病毒 EAV-E51 表達(dá)量檢測
4 討論
    4.1 ALV-J 血清流行病學(xué)與分子流行病學(xué)的調(diào)查
    4.2 ALV-J 自然感染雞體內(nèi)致瘤普觀察
    4.3 ALV-J 感染雞體內(nèi) ALV-J 負(fù)載量，CHNHE1 蛋白、C-MYC、P53 及 EAV-0、E51 表達(dá)量的測定
5 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表、錄用（或已投稿）論文
致謝



本文編號：3746946