沙門菌是一種重要的人獸共患病原菌,不僅可以感染畜禽,而且還可以感染人類。雞白痢沙門菌、腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌等血清型的沙門菌感染雞后可以引起雞沙門菌病,導(dǎo)致雞的隱性帶菌感染,甚至引起雞的死亡,給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。同時,沙門菌也是食源性致病菌之一,食用被沙門菌感染或污染的畜禽產(chǎn)品可能導(dǎo)致人類患上沙門菌病,出現(xiàn)腹瀉、嘔吐、敗血癥等癥狀,嚴(yán)重危害人類的健康。因此,必須建立有效的沙門菌檢測方法,以控制沙門菌在雞中的傳播。通過檢測雞血清中的沙門菌抗體含量是判定沙門菌感染的重要方法之一。長期以來,在雞的養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中,玻板凝集試驗常常被用來檢測雞血清中的沙門菌抗體,但是該方法敏感性低,易導(dǎo)致沙門菌抗體的漏檢。傳統(tǒng)的玻板凝集試驗不能滿足雞沙門菌抗體的高效、全面檢出,因此,發(fā)展一種新型的雞沙門菌抗體檢測方法顯得十分必要。沙門菌SpiC蛋白是廣泛存在于沙門菌中的保守蛋白,具有作為檢測沙門菌感染的靶抗原的潛力。本研究建立了基于沙門菌SpiC蛋白的間接ELISA檢測方法,并對其進行了初步應(yīng)用。利用IPTG誘導(dǎo)重組菌Ecoli BL21(DE3)(pET-spiC)表達His-SpiC蛋白,并通過親和層...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號或縮寫說明
文獻綜述
    1 沙門菌簡介
    2 沙門菌的流行
    3 沙門菌病的危害
    4 沙門菌的致病機制
    5 SpiC蛋白致病機制
    6 常見沙門菌檢測技術(shù)和方法
        6.1 抗原檢測技術(shù)和方法
        6.2 抗體檢測技術(shù)和方法
    7 本研究的目的和意義
    參考文獻
1 材料
    1.1 菌株、血清
    1.2 主要試劑
    1.3 主要耗材
    1.4 主要儀器設(shè)備
    1.5 實驗動物
2 方法
    2.1 表達純化重組蛋白His-SpiC
    2.2 制備血清
    2.3 檢測不同血清型沙門菌感染小鼠后血清中的沙門菌抗體
    2.4 間接ELISA方法的建立和優(yōu)化
    2.5 間接ELISA方法的驗證
    2.6 間接ELISA方法的初步應(yīng)用
3 結(jié)果
    3.1 His-SpiC蛋白表達純化的結(jié)果
    3.2 制備沙門菌陽性血清的結(jié)果
    3.3 檢測不同血清型沙門菌感染小鼠后血清中的沙門菌抗體
    3.4 間接ELISA方法的建立和優(yōu)化
    3.5 間接ELISA方法的驗證
    3.6 間接ELISA方法初步應(yīng)用
4 討論
參考文獻
致謝
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本文編號：3746704