為建立藍舌病病毒（BTV）的反向遺傳操作系統(tǒng),本研究構(gòu)建了分別表達血清1型BTV SZ97/1株VP1、VP3、VP4、VP6、VP7、NS1和NS2蛋白的7個真核表達質(zhì)粒,同時又構(gòu)建了含有SZ97/1株BTV的全部10個基因節(jié)段的T7聚合酶體外轉(zhuǎn)錄重組質(zhì)粒。并利用T7 RNA聚合酶對酶切線性化的10個體外轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒進行體外轉(zhuǎn)錄,制備BTV全部10個基因的體外轉(zhuǎn)錄RNA。將已構(gòu)建的7個真核表達質(zhì)粒和體外轉(zhuǎn)錄獲得的RNA產(chǎn)物依次共轉(zhuǎn)染BHK-21細胞,拯救出含有分子標(biāo)記的BTV。本研究首次在我國建立了BTV的反向遺傳操作系統(tǒng),為我國深入開展該病毒致病機理、傳播機制、基因組功能的研究以及新型疫苗的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
2 結(jié)果
3 討論



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