玉米赤霉烯酮（ZEN）是一種非甾體類雌激素的霉菌毒素,能導(dǎo)致動物和人類雌激素過多癥以及引起其他相關(guān)中毒。ZEN廣泛存在于世界各地的谷物及農(nóng)副產(chǎn)品中,不僅給人和動物帶來極大的毒害作用,也給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,ZEN的脫毒方法主要包括物理法、化學(xué)法和生物學(xué)方法。生物學(xué)方法由于安全和高效而成為研究的熱點(diǎn),尤其是對微生物降解方法的研究。反芻動物對霉菌毒素有較強(qiáng)耐受,其瘤胃中含有豐富的微生物資源。本課題的主要目的是從牛瘤胃微生物中分離出高效的ZEN降解菌,通過形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)方法對篩選出的菌株進(jìn)行鑒定,并對影響菌株脫毒的因素、降解特性進(jìn)行研究。研究結(jié)果如下：（1）以ZEN為唯一碳源和能源,成功從牛瘤胃中分離純化出一株能夠高效降解ZEN的菌株TH-N1。該菌在溫度37℃、pH 6.5、轉(zhuǎn)速160r/min條件下與2 μg/mLZEN共培養(yǎng)72 h,能清除59%的ZEN；（2）根據(jù)形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、生理生化及16S rRNA鑒定結(jié)果,確定該菌是假單胞屬（Pseudomonas）細(xì)菌,命名為Pseudomonas otitidis TH-N1;（3）對影響菌株TH-N1脫毒的因素（包... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文符號說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 霉菌毒素
    2 玉米赤霉烯酮的研究進(jìn)展
        2.1 ZEN的理化性質(zhì)
        2.2 ZEN的產(chǎn)生菌
        2.3 ZEN的污染及限量標(biāo)準(zhǔn)
        2.4 ZEN的代謝
        2.5 ZEN的檢測方法
            2.5.1 薄層色譜法
            2.5.2 高效液相色譜法
            2.5.3 氣相色譜法
            2.5.4 酶聯(lián)免疫檢測法
            2.5.5 其他檢測方法
        2.6 ZEN的毒性
            2.6.1 生殖毒性
            2.6.2 免疫毒性
            2.6.3 致癌作用
            2.6.4 細(xì)胞毒性
        2.7 ZEN的脫毒方法
            2.7.1 物理方法
            2.7.2 化學(xué)方法
            2.7.3 生物學(xué)方法
    3 牛瘤胃液降解ZEN的研究進(jìn)展
    4 研究的目的與意義
第二章 牛瘤胃中ZEN高效降解菌的分離
    2.1 前言
    2.2 材料
        2.2.1 樣品的來源
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器與設(shè)備
        2.2.4 培養(yǎng)基、溶液及其配制
    2.3 試驗(yàn)方法
        2.3.1 TLC檢測體系的建立
        2.3.2 高效液相色譜體系的建立
        2.3.3 ZEN降解菌的篩選
        2.3.4 菌株降解率的測定
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 ZEN的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.4.2 菌株的篩選及脫毒結(jié)果
    2.5 討論
第三章 ZEN高效降解菌TH-N1的鑒定
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備
        3.2.3 培養(yǎng)基及溶液的配制
        3.2.4 形態(tài)特征鑒定
        3.2.5 生理生化鑒定
        3.2.6 分子生物學(xué)鑒定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 形態(tài)學(xué)特征
        3.3.2 生理生化特性
        3.3.3 分子生物學(xué)特性
    3.4 討論
第四章 TH-N1菌株降解ZEN能力的影響因素分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備
        4.2.3 培養(yǎng)基及溶液的配制
        4.2.4 TH-N1降解ZEN能力與反應(yīng)時間的關(guān)系
        4.2.5 TH-N1降解ZEN能力與反應(yīng)溫度的關(guān)系
        4.2.6 TH-N1降解ZEN能力與起始菌液濃度的關(guān)系
        4.2.7 TH-N1降解ZEN能力與起始pH值的關(guān)系
        4.2.8 滅活菌與無細(xì)胞上清降解ZEN能力比較
        4.2.9 細(xì)胞內(nèi)含物及細(xì)胞壁的降解ZEN能力比較
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 TH-N1降解ZEN能力與反應(yīng)時間的關(guān)系
        4.3.2 TH-N1降解ZEN能力與反應(yīng)溫度的關(guān)系
        4.3.3 TH-N1降解ZEN能力與起始菌液濃度的關(guān)系
        4.3.4 TH-N1降解ZEN能力與起始pH值的關(guān)系
        4.3.5 滅活菌與無細(xì)胞上清降解ZEN能力比較
        4.3.6 細(xì)胞內(nèi)含物及細(xì)胞壁的降解ZEN能力比較
    4.4 討論
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3700041