大腸桿菌病是威脅人類和動(dòng)物健康的重要疾病之一。對(duì)于畜禽養(yǎng)殖業(yè)來說,動(dòng)物種群中大腸桿菌病的流行和暴發(fā)往往帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,例如斷乳仔豬水腫病、仔豬黃、白痢等,在養(yǎng)豬業(yè)中發(fā)病率和死亡率都較高。其中仔豬水腫病尤為嚴(yán)重,死亡率最高可達(dá)90%�，F(xiàn)今,已有多種致病性大腸桿菌病原體可引起人畜共患病,加之菌株耐藥現(xiàn)象的增多都給疾病的預(yù)防和治療帶來新的困難,多重耐藥大腸桿菌在臨床上更是多見,因此對(duì)致病性大腸桿菌毒力因子和耐藥性的研究已成為現(xiàn)階段科研研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。 本實(shí)驗(yàn)的目的是研究接合性質(zhì)粒在致病性大腸桿菌傳播耐藥基因和毒力基因中的作用,以及由基因水平傳播所引起菌株在毒力和耐藥性方面的變化,52株實(shí)驗(yàn)用大腸桿菌分離于哈爾濱周邊地區(qū)大腸桿菌病發(fā)病豬場(chǎng),采用小白鼠體內(nèi)攻毒試驗(yàn)確定菌株的致病性。本實(shí)驗(yàn)通過質(zhì)粒接合試驗(yàn)分析致病大腸桿菌的耐藥性、細(xì)菌毒力水平傳播的可能性,并比較分析親本菌株和接合子菌株的耐藥性、毒力和毒力基因的變化。通過比較親本菌株與接合子菌株對(duì)hep-2細(xì)胞的侵襲力評(píng)價(jià)菌株接合前后毒力的變化。依據(jù)CLSI （Clinical and Laboratory Standars insti... 

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 大腸桿菌概述
    1.2 致病性大腸桿菌
        1.2.1 致病性大腸桿菌分類
        1.2.2 致病性大腸桿菌的致病現(xiàn)狀
        1.2.3 致病性大腸桿菌毒力因子
    1.3 水平基因轉(zhuǎn)移概述
        1.3.1 基因水平傳播的研究機(jī)制
        1.3.2 基因水平傳播過程
        1.3.3 接合性質(zhì)粒
    1.4 致病性大腸桿菌體外毒力檢測(cè)概述
        1.4.1 HEp-2細(xì)胞
        1.4.2 HEp-2細(xì)胞用體外細(xì)菌侵襲試驗(yàn)研究
    1.5 選題的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 試劑
        2.1.3 主要儀器與設(shè)備
        2.1.4 主要試劑的配制
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 試驗(yàn)菌株的采集
        2.2.2 試驗(yàn)菌株的分離培養(yǎng)
        2.2.3 試驗(yàn)菌株的鑒定
        2.2.4 大腸桿菌致病性鑒定
        2.2.5 大腸桿菌的保存
        2.2.6 大腸桿菌體外藥物敏感性檢驗(yàn)
        2.2.7 大腸桿菌毒力基因檢測(cè)
        2.2.8 大腸桿菌質(zhì)粒接合實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 接合子菌株耐藥性及毒力基因檢測(cè)
        2.2.10 大腸桿菌對(duì)HEp-2細(xì)胞毒力試驗(yàn)
3 結(jié)果
    3.1 大腸桿菌分離鑒定結(jié)果
        3.1.1 分離結(jié)果
        3.1.2 生化鑒定結(jié)果
        3.1.3 試驗(yàn)菌株鏡檢結(jié)果
        3.1.4 大腸桿菌對(duì)小白鼠的致病性
    3.2 大腸桿菌的耐藥性
    3.3 52 株大腸桿菌毒力基因的檢測(cè)
        3.3.1 大腸桿菌各毒力因子檢出率
        3.3.2 大腸桿菌毒力基因凝膠電泳圖
    3.4 接合實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 親本菌株和接合子菌株耐藥表型比較結(jié)果
        3.4.2 阿米卡星對(duì)大腸桿菌MIC值和MBC值
    3.5 接合子菌株毒力基因檢測(cè)結(jié)果
        3.5.1 毒力因子PCR結(jié)果統(tǒng)計(jì)
    3.6 大腸桿菌毒力試驗(yàn)結(jié)果
        3.6.1 阿米卡星對(duì)HEp-2細(xì)胞的最大藥物安全濃度
        3.6.2 大腸桿菌對(duì)HEp-2細(xì)胞毒力測(cè)定結(jié)果
    3.7 透射電鏡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.7.1 正常HEp-2細(xì)胞圖片
        3.7.2 大腸桿菌ATCC25922侵襲HEp-2細(xì)胞圖片
        3.7.3 毒力改變菌株侵襲HEp-2細(xì)胞圖片
4 討論
    4.1 大腸桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析
    4.2 毒力基因水平傳播分析
    4.3 致病性大腸桿菌毒力基因分析
        4.3.1 毒力基因之間關(guān)系分析
        4.3.2 大腸桿菌耐藥性與毒力基因關(guān)系分析
    4.4 大腸桿菌侵襲HEp-2細(xì)胞結(jié)果分析
        4.4.1 菌株毒力改變分析
        4.4.2 毒力島與大腸桿菌致病性分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3679087