鉛是一種對人體多個系統(tǒng)和器官具有毒性的重金屬元素，在體內(nèi)無任何生理功能，理想血液鉛的濃度為0。由于鉛在環(huán)境中可長期蓄積，不能降解，可以通過呼吸系統(tǒng)和消化器官進(jìn)入人體，99%從腎臟代謝，腎臟是鉛中毒的主要受損器官。 研究目的：本試驗通過研究醋酸鉛導(dǎo)致大鼠腎小管上皮細(xì)胞（NRK）的氧化損傷程度、細(xì)胞凋亡情況以及死亡受體通路在醋酸鉛致NRK細(xì)胞凋亡過程中的作用，旨在探討鉛對動物腎臟毒性的作用機制，為防治鉛中毒提供理論依據(jù)。 研究方法：體外培養(yǎng)NRK細(xì)胞，于細(xì)胞對數(shù)生長期加入0，2，10和50μM的醋酸鉛作用24h后，采用MTT法檢測細(xì)胞增殖率，黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶（SOD）活力，硫代巴比妥酸（TBA）法測定細(xì)胞中丙二醛（MDA）含量，比色法檢測細(xì)胞中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，ABTS快速法測定細(xì)胞中的總抗氧化能力（T-Aoc）。用Hoechst33258和Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡，Western blot檢測FAS、FASL及Caspase-8的蛋白表達(dá)量，流式細(xì)胞儀檢測Z-IETD-FMK對細(xì)胞凋亡的抑制作用。 結(jié)果：... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 研究背景
    2 鉛簡介
        2.1 鉛的吸收
        2.2 鉛在體內(nèi)的分布
        2.3 鉛的排泄
        2.4 鉛污染途徑及其污染狀況
        2.5 鉛的腎臟毒性及其損傷的病理變化
        2.6 鉛的細(xì)胞毒性
    3 細(xì)胞凋亡
        3.1 細(xì)胞凋亡的特征
        3.2 細(xì)胞凋亡的途徑
        3.3 三條通路間的相互關(guān)系
        3.4 Caspase 家族與細(xì)胞凋亡
    4 本研究的目的及意義
引言
第二章 醋酸鉛對大鼠腎小管上皮細(xì)胞的毒性作用
    1 材料與方法
        1.1 主要試劑與儀器
        1.2 試驗方法
            1.2.1 NRK 細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.2.2 NRK 細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇
            1.2.3 細(xì)胞計數(shù)
            1.2.4 MTT 法檢測醋酸鉛對 NRK 細(xì)胞活性影響
            1.2.5 細(xì)胞染毒與分組
            1.2.6 SOD、MDA、GSH-Px 及 T-Aoc 的測定
            1.2.7 細(xì)胞凋亡的檢測
        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 正常 NRK 細(xì)胞的形態(tài)
        2.2 醋酸鉛對 NRK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性
        2.3 細(xì)胞中 SOD、MDA、GSH-Px 及 T-Aoc 的檢測
        2.4 Hoechst 33258 檢測細(xì)胞凋亡
        2.5 Annexin V-FITC/PI 雙染色法檢測細(xì)胞凋亡
    3 討論
    4 小結(jié)
第三章 醋酸鉛誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞凋亡機理的研究
    1 材料與方法
        1.1 主要試劑與儀器
        1.2 試驗方法
            1.2.1 FAS、FASL 和 Caspase-8 蛋白含量的檢測（Western blot）
            1.2.2 總蛋白含量的測定
            1.2.3 蛋白樣品的定量
            1.2.4 聚丙烯酰氨凝膠電泳（SDS-PAGE）
            1.2.5 轉(zhuǎn)膜
            1.2.6 免疫雜交
            1.2.7 底物顯示 ECL 發(fā)光法
            1.2.8 z-IETD-FMK 對細(xì)胞凋亡的抑制作用
    2 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 Western blot 檢測 FAS、FASL 和 Caspase-8 的蛋白含量
        3.2 z-IETD-FMK 對細(xì)胞凋亡的影響
    4 討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]脫氧核糖核酸內(nèi)切酶與細(xì)胞凋亡[J]. 許康,張?zhí)K明.  中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2004(02)
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