定時輸精技術(shù)對提高母豬配種利用率、減少非生產(chǎn)天數(shù)、組織批次化生產(chǎn)具有重要意義。為探究定時輸精程序處理對母豬繁殖性能的影響機(jī)制,本研究選取健康后備母豬12頭,分為試驗組（T）和對照組（C）,試驗組采用烯丙孕素+PMSG+GnRH處理,對照組不采用任何激素處理,于妊娠第16 d和25 d對母豬進(jìn)行屠宰,采集子宮內(nèi)膜組織作為研究對象,分別記為T₁6組（3頭）、C₁6組（3頭）、T₂5組（3頭）、C₂5組（3頭）。首先觀察子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)變化,隨后對附植位點子宮內(nèi)膜進(jìn)行高通量測序獲得miRNA表達(dá)譜,比較組織發(fā)育和miRNA表達(dá)的差異來探究定時輸精影響后備母豬繁殖性能的機(jī)制。主要結(jié)果如下:定時輸精程序處理對子宮內(nèi)膜厚度、微血管和腺體的發(fā)育均有一定影響,與對照組相比,無論是妊娠第16d還是妊娠第25 d,試驗組后備母豬子宮內(nèi)膜厚度增加,血管更加致密豐富,腺體發(fā)育更發(fā)達(dá),在固有層中分布更均勻,這些變化更有利于早期胚胎的附植。通過對妊娠后備母豬子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行高通量測序,建立了子宮內(nèi)膜miRNA的表達(dá)譜,對測序... 

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 定時輸精與產(chǎn)仔數(shù)
    1.2 miRNA與早期妊娠
        1.2.1 miRNA與胚胎活性
        1.2.2 妊娠子宮內(nèi)膜中的miRNA
        1.2.3 母豬妊娠調(diào)節(jié)中的miRNA
        1.2.4 miR-424及其功能
    1.3 母豬妊娠建立與胚胎丟失
        1.3.1 趨化因子在妊娠早期胚胎丟失中的作用
        1.3.2 早期妊娠母體-胎兒界面免疫細(xì)胞的富集
        1.3.3 外泌體在細(xì)胞通訊間的作用
    1.4 本試驗研究意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗儀器
        2.1.2 試驗試劑
        2.1.3 主要溶液的配制
    2.2 試驗動物的選擇及樣品采集、處理
        2.2.1 試驗?zāi)肛i的選擇
        2.2.2 試驗?zāi)肛i的處理
        2.2.3 子宮內(nèi)膜的采集
        2.2.4 石蠟切片制作及染色
        2.2.5 總RNA的提取
    2.3 子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)錄組測序
        2.3.1 文庫構(gòu)建及測序
        2.3.2 生物信息學(xué)分析及miRNA篩選
        2.3.3 qRT-PCR驗證差異表達(dá)的miRNA
    2.4 miRNA靶基因的篩選與鑒定
        2.4.1 反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA
        2.4.2 引物設(shè)計
        2.4.3 靶基因的擴(kuò)增與定量
3 結(jié)果與分析
    3.1 定時輸精程序?qū)υ缙谌焉锬肛i子宮發(fā)育的影響
    3.2 定時輸精程序處理對子宮內(nèi)膜sRNA轉(zhuǎn)錄的影響
        3.2.1 子宮內(nèi)膜總RNA的提取與質(zhì)量檢測
        3.2.2 原始序列的純化及sRNA序列長度分布
        3.2.3 sRNA的比對及分類注釋
        3.2.4 miRNA的表達(dá)譜分析
        3.2.5 差異miRNA靶基因的GO功能分析
        3.2.6 差異miRNA靶基因的KEGG通路富集分析
        3.2.7 差異表達(dá)miRNA的驗證
    3.3 ssc-miR-424的表達(dá)及其靶基因的篩選
        3.3.1 差異miRNA ssc-miR-424的表達(dá)
        3.3.2 差異表達(dá)miRNA靶基因的篩選
4 討論
    4.1 定時輸精程序?qū)θ焉锬肛i子宮內(nèi)膜的影響
    4.2 定時輸精程序?qū)θ焉锬肛i子宮內(nèi)膜miRNA轉(zhuǎn)錄的影響
    4.3 ssc-miR-424的差異表達(dá)
    4.4 ssc-miR-424及其功能驗證
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
作者簡歷
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]定時輸精技術(shù)對規(guī)�；i場經(jīng)產(chǎn)母豬繁殖性能及效益的影響[J]. 黃正,周劍輝,李智.  今日養(yǎng)豬業(yè). 2019(04)
[2]豬定時輸精技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 郭曉飛,張金龍,李義海,田見暉,李俊杰,翁士喬,張效生.  中國畜牧雜志. 2019(09)
[3]不同定時輸精程序處理對有無初情期后備母豬發(fā)情及妊娠的影響[J]. 魏巧莉,張振紅,趙倩倩,劉明智,翁士喬,白佳樺,劉彥,黃正,田見暉,李俊杰.  畜牧與獸醫(yī). 2019(06)
[4]病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用價值[J]. 曹萍,曲本祥.  影像研究與醫(yī)學(xué)應(yīng)用. 2018(19)
[5]不同定時輸精程序?qū)髠淠肛i繁殖性能的影響[J]. 吳寶云,李賀,張衡,劉仲武,姜思暢,張思思,黃正,李俊杰,孫樹春.  中國畜牧雜志. 2018(07)
[6]母豬定時輸精技術(shù)及存在的若干問題[J]. 李俊杰,劉彥,翁士喬,張守全,田見暉.  豬業(yè)科學(xué). 2018(06)
[7]生殖激素對初情期牦牛子宮生長發(fā)育的影響[J]. 王志強(qiáng),張君,徐尚榮,彭巍,張琳欽.  青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2018(02)
[8]不同胎次加系母豬繁殖性能的相關(guān)研究[J]. 陳松玲,卓如意,蔡月明,陳曉.  豬業(yè)科學(xué). 2018(01)
[9]母豬定時輸精基本理論及應(yīng)用效果評價[J]. 吳俊輝,張童,張守全,衛(wèi)恒習(xí).  豬業(yè)科學(xué). 2017(07)
[10]Cytokines from the pig conceptus:roles in conceptus development in pigs[J]. Rodney D Geisert,Matthew C Lucy,Jeffrey J Whyte,Jason W Ross,Daniel J Mathew.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2015(02)



本文編號：3660943