定時(shí)輸精技術(shù)對(duì)提高母豬配種利用率、減少非生產(chǎn)天數(shù)、組織批次化生產(chǎn)具有重要意義。為探究定時(shí)輸精程序處理對(duì)母豬繁殖性能的影響機(jī)制,本研究選取健康后備母豬12頭,分為試驗(yàn)組（T）和對(duì)照組（C）,試驗(yàn)組采用烯丙孕素+PMSG+GnRH處理,對(duì)照組不采用任何激素處理,于妊娠第16 d和25 d對(duì)母豬進(jìn)行屠宰,采集子宮內(nèi)膜組織作為研究對(duì)象,分別記為T(mén)₁6組（3頭）、C₁6組（3頭）、T₂5組（3頭）、C₂5組（3頭）。首先觀察子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)變化,隨后對(duì)附植位點(diǎn)子宮內(nèi)膜進(jìn)行高通量測(cè)序獲得miRNA表達(dá)譜,比較組織發(fā)育和miRNA表達(dá)的差異來(lái)探究定時(shí)輸精影響后備母豬繁殖性能的機(jī)制。主要結(jié)果如下:定時(shí)輸精程序處理對(duì)子宮內(nèi)膜厚度、微血管和腺體的發(fā)育均有一定影響,與對(duì)照組相比,無(wú)論是妊娠第16d還是妊娠第25 d,試驗(yàn)組后備母豬子宮內(nèi)膜厚度增加,血管更加致密豐富,腺體發(fā)育更發(fā)達(dá),在固有層中分布更均勻,這些變化更有利于早期胚胎的附植。通過(guò)對(duì)妊娠后備母豬子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行高通量測(cè)序,建立了子宮內(nèi)膜miRNA的表達(dá)譜,對(duì)測(cè)序... 

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 定時(shí)輸精與產(chǎn)仔數(shù)
    1.2 miRNA與早期妊娠
        1.2.1 miRNA與胚胎活性
        1.2.2 妊娠子宮內(nèi)膜中的miRNA
        1.2.3 母豬妊娠調(diào)節(jié)中的miRNA
        1.2.4 miR-424及其功能
    1.3 母豬妊娠建立與胚胎丟失
        1.3.1 趨化因子在妊娠早期胚胎丟失中的作用
        1.3.2 早期妊娠母體-胎兒界面免疫細(xì)胞的富集
        1.3.3 外泌體在細(xì)胞通訊間的作用
    1.4 本試驗(yàn)研究意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)儀器
        2.1.2 試驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要溶液的配制
    2.2 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇及樣品采集、處理
        2.2.1 試驗(yàn)?zāi)肛i的選擇
        2.2.2 試驗(yàn)?zāi)肛i的處理
        2.2.3 子宮內(nèi)膜的采集
        2.2.4 石蠟切片制作及染色
        2.2.5 總RNA的提取
    2.3 子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
        2.3.1 文庫(kù)構(gòu)建及測(cè)序
        2.3.2 生物信息學(xué)分析及miRNA篩選
        2.3.3 qRT-PCR驗(yàn)證差異表達(dá)的miRNA
    2.4 miRNA靶基因的篩選與鑒定
        2.4.1 反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA
        2.4.2 引物設(shè)計(jì)
        2.4.3 靶基因的擴(kuò)增與定量
3 結(jié)果與分析
    3.1 定時(shí)輸精程序?qū)υ缙谌焉锬肛i子宮發(fā)育的影響
    3.2 定時(shí)輸精程序處理對(duì)子宮內(nèi)膜sRNA轉(zhuǎn)錄的影響
        3.2.1 子宮內(nèi)膜總RNA的提取與質(zhì)量檢測(cè)
        3.2.2 原始序列的純化及sRNA序列長(zhǎng)度分布
        3.2.3 sRNA的比對(duì)及分類(lèi)注釋
        3.2.4 miRNA的表達(dá)譜分析
        3.2.5 差異miRNA靶基因的GO功能分析
        3.2.6 差異miRNA靶基因的KEGG通路富集分析
        3.2.7 差異表達(dá)miRNA的驗(yàn)證
    3.3 ssc-miR-424的表達(dá)及其靶基因的篩選
        3.3.1 差異miRNA ssc-miR-424的表達(dá)
        3.3.2 差異表達(dá)miRNA靶基因的篩選
4 討論
    4.1 定時(shí)輸精程序?qū)θ焉锬肛i子宮內(nèi)膜的影響
    4.2 定時(shí)輸精程序?qū)θ焉锬肛i子宮內(nèi)膜miRNA轉(zhuǎn)錄的影響
    4.3 ssc-miR-424的差異表達(dá)
    4.4 ssc-miR-424及其功能驗(yàn)證
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
作者簡(jiǎn)歷
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3660943