狂犬病是由狂犬病毒（Rabies virus,RABV）引起的一種急性傳染病,人獸共患,一旦發(fā)病,病死率幾乎為100%。控制人間狂犬病傳播最有效的手段是切斷傳染源頭,控制動物間狂犬病的傳播,其防控難點在于流浪動物和野生動物的免疫。因此,急需研發(fā)不依賴于注射接種,適用于大規(guī)模免疫的口服疫苗。乳酸菌是公認安全的益生菌,對腸道的不利環(huán)境具有良好的耐受性,并且重組乳酸菌表達的蛋白無需進行純化可大規(guī)模生產(chǎn)。本研究以乳酸菌為表達載體,狂犬病毒糖蛋白（GP）為候選抗原,構(gòu)建表達狂犬病毒糖蛋白的重組乳酸菌作為新型口服疫苗,通過體內(nèi)外試驗評價其作為新型口服疫苗的潛力,以期為狂犬病口服疫苗的研制提供一種新的策略。1、根據(jù)Genbank載入的狂犬病毒基因序列,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位區(qū)基因RVG,通過PCR方法在其C’端融合特異性樹突狀細胞靶向肽（DCpep）編碼基因后插入到乳酸菌表達載體中,以融合無關(guān)肽（ctrl）編碼基因為對照,分別構(gòu)建表達RVG基因的重組乳酸菌NC8-pgsA’-RVG-DCpep和NC8-pgsA’-RVG-ctrl。通過Western-blot和免疫熒光進行蛋白水平檢測,結(jié)... 

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

狂犬病病毒模式圖（therabiesvirusvirion，來源Matthias等）

基于使用乳酸菌（LAB）作為蛋白質(zhì)抗原或胃腸道中的DNA的遞送載體的四種方法

目的基因的PCR擴增結(jié)果及目的基因的雙酶切鑒定結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]新時代邁向狂犬病消除新征程——記2018年中國狂犬病年會[J]. 李剛,郭守堂,熊鷹.  中國工作犬業(yè). 2018(05)
[2]巴斯德開啟預防醫(yī)學的大門——紀念路易斯·巴斯德發(fā)明狂犬病疫苗130周年[J]. 楊正時,房海.  河北科技師范學院學報. 2015(04)
[3]H9N2亞型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重組乳桿菌的構(gòu)建及免疫原性分析[J]. 石少華,楊文濤,葉麗萍,黃海斌,蔡若鵬,李雨宸,閆曉月,王春鳳,楊桂連.  中國獸醫(yī)科學. 2014(02)
[4]不同疫區(qū)家犬攜帶狂犬病毒的比較研究[J]. 熊成龍,邵中軍,郝宗宇,常文輝,孫建偉,張愛梅,張彥平,姜慶五.  中國熱帶醫(yī)學. 2008(03)
[5]乳酸乳球菌作為黏膜免疫活載體疫苗傳遞抗原的研究進展[J]. 史達,宋巖,李一經(jīng).  微生物學報. 2006(04)

博士論文
[1]中國狂犬病毒的遺傳學特征[D]. 熊成龍.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2006

碩士論文
[1]上海地區(qū)家犬中狂犬病的血清抗體檢測與感染狀況調(diào)查[D]. 沈悅.南京農(nóng)業(yè)大學 2006



本文編號：3654963