本文關鍵詞：丙酸睪酮對小鼠睪丸BNNF、NGF、NT-3和NT-4神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：哺乳動物的繁殖活動除了下丘腦-垂體-性腺軸的激素調(diào)控外,也受多種細胞因子的調(diào)節(jié),其中包括神經(jīng)營養(yǎng)素。神經(jīng)營養(yǎng)素(Neurotrophins)是在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的一類蛋白家族,是神經(jīng)細胞存活和發(fā)育的主要調(diào)節(jié)因子。神經(jīng)營養(yǎng)素家族包括神經(jīng)生長因子(NGF),腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF),神經(jīng)營養(yǎng)素3(NT-3)和神經(jīng)營養(yǎng)素4(NT-4)。它們主要是在腦和神經(jīng)組織表達,對神經(jīng)細胞的分化和神經(jīng)元存活具有重要作用。雄激素主要是由睪丸合成和分泌,與動物生殖有著極其密切的關系,能夠影響精子發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)營養(yǎng)因子和雄激素在動物生殖調(diào)控中發(fā)揮著重要作用。然而在雄性生殖調(diào)控中,雄激素和神經(jīng)營養(yǎng)素之間的關系并不明確。本文以小鼠為研究對象,探究丙酸睪酮對小鼠睪丸神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響,以揭示雄激素與神經(jīng)營養(yǎng)素在雄性生殖中的調(diào)節(jié)關系,研究內(nèi)容如下:1、丙酸睪酮對小鼠睪丸神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響用丙酸睪酮處理小鼠0、6、12和24h后,收集睪丸,觀察睪丸形態(tài)變化,檢測睪丸中神經(jīng)營養(yǎng)素m RNA和蛋白質(zhì)的表達變化。小鼠睪丸切片HE染色結果顯示,高劑量丙酸睪酮嚴重破壞了睪丸結構,精子發(fā)生出現(xiàn)異常。神經(jīng)營養(yǎng)素定量結果表明,丙酸睪酮處理小鼠,12小時后發(fā)生明顯作用,能促進睪丸中BDNF、NT-3和NT-4的表達,而抑制NGF的表達。2、丙酸睪酮對TM4和GC-1spg細胞神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響。用丙酸睪酮處理TM4和GC-1spg細胞,通過CCK8法檢測細胞活力變化,運用熒光定量來檢測神經(jīng)營養(yǎng)素m RNA的變化,利用細胞免疫熒光檢測神經(jīng)營養(yǎng)素蛋白質(zhì)的表達變化。細胞活力實驗結果顯示,丙酸睪酮對TM4和GC-1spg細胞活性無明顯影響。熒光定量與細胞免疫熒光結果表明,丙酸睪酮處理TM4細胞,使BDNF和NT4的表達在12h降低,到24h又恢復到正常水平,而NGF和NT-3的表達在12h后受到抑制。對于GC-1spg細胞,丙酸睪酮處理使BDNF和NGF的表達在6h到12h降低,24h后表達升高,最終BDNF表達水平高于正常,而NGF表達回到正常水平;NT-3的表達量在6h下降,12h升高,而在24h又下降,出現(xiàn)回復現(xiàn)象,NT-4的表達則在6h后受到了抑制。綜上所述,我們的研究結果表明,高劑量的丙酸睪酮會嚴重破壞睪丸的正常結構,使精子發(fā)生異常,出現(xiàn)雄性不育。丙酸睪酮能夠調(diào)節(jié)睪丸中神經(jīng)營養(yǎng)素的表達,參與調(diào)控雄性生殖。
【關鍵詞】：丙酸睪酮 小鼠 睪丸 神經(jīng)營養(yǎng)素 表達
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S814
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-12
• 中英文對照表12-13
• 前言13-15
• 第一篇 文獻綜述15-27
• 第1章 雄激素與雄性動物生殖15-23
• 1.1 雄激素15
• 1.2 雄激素受體15-17
• 1.3 雄激素與雄性動物生殖17-21
• 1.3.1 雄激素的生物作用17-18
• 1.3.2 睪丸的結構與功能18-20
• 1.3.3 雄激素與雄性生殖20-21
• 1.4 雄激素與神經(jīng)營養(yǎng)素21
• 1.5 雄激素的應用21-23
• 第2章 神經(jīng)營養(yǎng)素研究進展23-27
• 2.1 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）23-24
• 2.2 神經(jīng)生長因子(NGF)24-25
• 2.3 神經(jīng)營養(yǎng) 3（NT-3）和神經(jīng)營養(yǎng)素 4（NT-4）25-27
• 第二篇 研究內(nèi)容27-57
• 第1章丙酸睪酮對小鼠睪丸神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響27-47
• 1.1 材料27-29
• 1.1.1 實驗動物27
• 1.1.2 主要實驗儀器27-28
• 1.1.3 主要試劑28
• 1.1.4 主要試劑配制28-29
• 1.2 方法29-40
• 1.2.1 實驗動物分組及處理29
• 1.2.2 小鼠睪丸組織石蠟切片制備29
• 1.2.3 小鼠睪丸組織HE染色29-30
• 1.2.4 小鼠睪丸總RNA提取及反轉錄30-31
• 1.2.5 物設計與合成31-32
• 1.2.6 目的基因克隆32-35
• 1.2.7 熒光定量35-36
• 1.2.8 小鼠睪丸總蛋白提取及濃度測定36-37
• 1.2.9 蛋白免疫印跡37-40
• 1.2.10數(shù)據(jù)統(tǒng)計40
• 1.3 結果分析40-44
• 1.3.1 小鼠睪丸形態(tài)變化40-41
• 1.3.2 小鼠睪丸總RNA提取41-42
• 1.3.3 目的基因擴增及測序42
• 1.3.4 小鼠睪丸神經(jīng)營養(yǎng)素mRNA表達42-43
• 1.3.5 小鼠睪丸神經(jīng)營養(yǎng)素蛋白表達43-44
• 1.4 討論44-46
• 1.5 小結46-47
• 第2章 丙酸睪酮對TM3、TM4及GC-1spg細胞神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響47-57
• 2.1 材料47-48
• 2.1.1 實驗材料47
• 2.1.2 主要儀器47
• 2.1.3 主要試劑47
• 2.1.4 主要試劑配制47-48
• 2.2 方法48-49
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)及處理48
• 2.2.2 CCK8測細胞活力48-49
• 2.2.3 細胞免疫熒光49
• 2.2.4 RNA提取與反轉錄、目的基因擴增及測序和熒光定量49
• 2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計49
• 2.3 結果分析49-54
• 2.3.1 丙酸睪酮對TM4和GC-1spg細胞活力的影響49-50
• 2.3.2 TM4和GC-1spg細胞神經(jīng)營養(yǎng)素蛋白表達50
• 2.3.3 丙酸睪酮對TM4和GC-1spg細胞神經(jīng)營養(yǎng)素mRNA表達的影響50-52
• 2.3.4 丙酸睪酮對TM4和GC-1spg細胞神經(jīng)營養(yǎng)素蛋白表達的影響52-54
• 2.4 討論54-56
• 2.5 小結56-57
• 結論57-58
• 參考文獻58-70
• 導師簡介70-71
• 作者簡介71-72
• 攻讀學位期間發(fā)表論文及科研成果72-73
• 致謝73

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 常青;王麗梅;黑常春;蔡玉芳;吳凱;孔斌;朱萬平;沈新生;趙承軍;;雙氫睪酮調(diào)節(jié)原代培養(yǎng)大鼠Sertoli細胞GDNF的表達[J];基礎醫(yī)學與臨床;2015年11期

2 李江源;;精子發(fā)生的內(nèi)分泌激素調(diào)節(jié)[J];生殖醫(yī)學雜志;2014年09期

3 黃瑞;朱偉杰;;睪丸支持細胞連接結構在精子發(fā)生過程的作用[J];生殖與避孕;2013年03期

4 周曉東;宋小駿;袁力;;神經(jīng)生長因子對精子活動力的影響[J];醫(yī)學研究生學報;2012年04期

5 何紅云;鄧儀昊;楊新文;楊開明;;葛根素減輕乙醇導致大鼠生精細胞的凋亡[J];基礎醫(yī)學與臨床;2009年12期

6 李亞;王倫安;吳泰相;;雄激素受體基因CAG重復多態(tài)性與男性不育關系的Meta分析[J];中華男科學雜志;2009年09期

7 甄景波;李文平;李華健;左巖;修賀明;;單側睪丸扭轉對生殖細胞凋亡及黃芪保護作用的實驗研究[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2009年05期

8 章勁夫;桂亞平;胡佳華;;乙醇導致小鼠生精細胞慢性損傷與FasL表達的關系[J];細胞生物學雜志;2009年04期

9 沈美玲;;人類生精細胞凋亡的調(diào)控因素[J];山東醫(yī)學高等專科學校學報;2009年03期

10 李冬梅;孫慧萍;閻賦琴;;神經(jīng)生長因子藥效學研究[J];中國實驗動物學報;2008年02期

  本文關鍵詞：丙酸睪酮對小鼠睪丸BNNF、NGF、NT-3和NT-4神經(jīng)營養(yǎng)素表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：364480