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厚垣普可尼亞菌(Pochonia chlamydosporia)ARSEF3539生物學(xué)特性及發(fā)酵液研究

發(fā)布時間:2022-02-20 12:16
  厚垣普可尼亞菌(Pochonia chlamvdosporia)是一種重要的線蟲生防菌。該菌不僅可用于植物性線蟲的防制,也可作用于動物寄生性線蟲,具有很好的研究及應(yīng)用前景。為了解該菌的生長特性和食線蟲卵機理,本文對厚垣普可尼亞菌ARSEF3 5 3 9的形態(tài)學(xué)特性、對動物寄生性線蟲與蟲卵的作用及其發(fā)酵液的生化性質(zhì)等方面進行了研究。結(jié)果如下:厚垣普可尼亞菌ARSEF3539在兩種培養(yǎng)基(CMA、SDA)上菌落形態(tài)略有不同,生長速度也不盡相同:在23 ℃下培養(yǎng)15d時,CM A培養(yǎng)基上菌落半徑約為2.4cm,SDA上則為3.Ocm;兩種培養(yǎng)基上菌絲皆呈放射狀生長,菌絲體致密,氣生菌絲發(fā)達,分生孢子梗單個或輪生于菌絲,每個孢子梗有4~5分支,每個分支頂端分生孢子聚生,孢子透明,呈卵圓形或圓形。老的氣生菌絲膨大處形成外壁厚、磚格狀、多室的厚垣孢子。在厚垣普可尼亞菌ARSEF3539生長良好的CMA培養(yǎng)基表面分別加入秀麗新桿線蟲和蟲卵、馬圓線蟲幼蟲和卵及豬蛔蟲卵。一周后觀察,發(fā)現(xiàn)該菌對秀麗新桿線蟲卵與馬圓線蟲卵侵染率較低,約為2%;對豬蛔蟲卵在發(fā)生侵染的同時,又可破壞其卵殼結(jié)構(gòu),其侵染率為29.... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
研究項目資助說明
摘要
Abstract
縮略詞表
引言
    1 家畜線蟲病概述
    2 家畜線蟲病的防控
    3 普可尼亞菌
        3.1 普可尼亞菌的分類
        3.2 厚垣普可尼亞菌的形態(tài)學(xué)特征
        3.3 厚垣普可尼亞菌的生物學(xué)特性
        3.4 厚垣普可尼亞菌的生防應(yīng)用
    4 普可尼亞菌發(fā)酵工藝的現(xiàn)狀
    5 MTT染色法的應(yīng)用
    6 研究的目的及意義
實驗一 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539的形態(tài)學(xué)及殺家畜寄生性線蟲研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 儀器與設(shè)備
            1.1.2 藥品與試劑
            1.1.3 菌種
            1.1.4 蟲種
            1.1.5 主要溶液
            1.1.6 培養(yǎng)基
        1.2 方法
            1.2.1 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539生長特性的觀測
            1.2.2 秀麗新桿線蟲培養(yǎng)與蟲卵及蟲體的收集
            1.2.3 馬圓線蟲的培養(yǎng)及蟲卵與蟲體的收集
            1.2.4 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539對線蟲卵及幼蟲的作用研究
    2 結(jié)果
        2.1 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539的培養(yǎng)性狀
        2.2 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539生長速度的測定結(jié)果
        2.3 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539的產(chǎn)孢情況
        2.4 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539對家畜寄生性線蟲蟲卵的作用結(jié)果
        2.5 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539對家畜寄生性線蟲幼蟲的作用
    3 討論與小結(jié)
        3.1 討論
        3.2 小結(jié)
實驗二 利用MTT法檢測線蟲活力的研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 儀器與設(shè)備
            1.1.2 藥品與試劑
            1.1.3 蟲種
            1.1.4 主要溶液
            1.1.5 培養(yǎng)基
        1.2 方法
            1.2.1 秀麗新桿線蟲的培養(yǎng)與收集
            1.2.2 MTT比色法檢測波長的確定
            1.2.3 MTT的用量
            1.2.4 DMSO的用量
            1.2.5 藥物的作用時間
    2 結(jié)果
        2.1 最佳檢測波長的測定結(jié)果
        2.2 MTT濃度的測定結(jié)果
        2.3 DMSO體積的測定結(jié)果
        2.4 藥物作用時間的測定結(jié)果
    3 討論與小結(jié)
        3.1 討論
        3.2 小結(jié)
實驗三 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539胞外蛋白酶的誘導(dǎo)及發(fā)酵液生化性質(zhì)研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 儀器與設(shè)備
            1.1.2 藥品與試劑
            1.1.3 菌種及蟲種
            1.1.4 主要溶液
            1.1.5 培養(yǎng)基
        1.2 方法
            1.2.1 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液的制備
            1.2.2 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液的收集
            1.2.3 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液SDS-PAGE分析
            1.2.4 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液中蛋白質(zhì)含量的的測定
            1.2.5 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液蛋白酶活性的測定
            1.2.6 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液磷酸酶活性的測定
            1.2.7 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液殺線蟲毒性試驗
        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2 結(jié)果
        2.1 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液的SDS-PAGE分析結(jié)果
        2.2 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液蛋白質(zhì)含量的測定結(jié)果
        2.3 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液蛋白酶活性的測定結(jié)果
        2.4 厚垣普可尼亞菌RRSEF3539發(fā)酵液磷酸酶活性測定結(jié)果
        2.5 厚垣普可尼亞菌ARSEF3539發(fā)酵液殺線蟲毒性的試驗結(jié)果
    3 討論與小結(jié)
        3.1 討論
        3.2 小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]捕食性真菌Duddingtonia flagrans胞外蛋白質(zhì)的生化性質(zhì)研究[J]. 王瑞,孫曉燕,馬亞囡,楊曉野,楊蓮茹,趙曉慧,李軍燕,牛廣勝,張磊.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2015(08)
[2]捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生質(zhì)體的快速制備與再生[J]. 李軍燕,楊曉野,王瑞,楊蓮茹,張偉,羅曉平,范永生.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2014(07)
[3]MTT法測定大腸桿菌活菌數(shù)實驗研究[J]. 汪志榮,高瓊,馬傳鑫,李燕妮.  環(huán)境科學(xué)學(xué)報. 2011(12)
[4]食線蟲真菌資源研究概況[J]. 張穎,李國紅,張克勤.  菌物學(xué)報. 2011(06)
[5]新鮮鹿糞便中捕食線蟲真菌的分離和鑒定[J]. 楊琳,楊曉燕,李云霞,蘇鴻雁.  大理學(xué)院學(xué)報. 2010(10)
[6]薩克拉普奇尼亞菌串孢變種對南方根結(jié)線蟲卵和雌蟲的致病性[J]. 周艷,蘭木佐,張成敏,武俠.  青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(01)
[7]厚垣普奇尼亞菌Pochonia chlamydosporia產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶對南方根結(jié)線蟲卵孵化的影響[J]. 張成敏,武俠,才秀華.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(10)
[8]MTT法測定乳酸菌活菌數(shù)的研究[J]. 黃立坤,杜鵬,霍貴成.  食品工業(yè). 2008(03)
[9]動物線蟲抗藥機制研究進展[J]. 姜波,楊光友,鄧家波.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(29)
[10]MTT-四氯化碳萃取吸光光度法測定活菌數(shù)[J]. 任嬌蓉,李璐,郜洪文,徐亞同.  環(huán)境科學(xué)與技術(shù). 2007(02)

博士論文
[1]針對小菜蛾的球孢白僵菌孢子可濕性粉劑研制的技術(shù)探索[D]. 田麗.浙江大學(xué) 2005

碩士論文
[1]厚垣孢普可尼亞菌PC152菌株生物學(xué)及制劑工藝研究[D]. 石妍.福建農(nóng)林大學(xué) 2011



本文編號:3635027

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