少孢節(jié)叢孢菌侵染性胞外絲氨酸蛋白酶的基因克
發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 10:27
家畜消化道線蟲病是一類嚴(yán)重危害動物養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的寄生蟲疾病,每年給我國畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,對家畜消化道線蟲病的防治主要依靠化學(xué)驅(qū)蟲藥物,但長期使用易使蟲體產(chǎn)生抗藥性,降低藥效;同時(shí),動物性食品中的藥物殘留不但影響人類的身體健康還會對生態(tài)環(huán)境造成污染。為了克服化學(xué)藥物防控帶來的弊端,國內(nèi)外相繼開展了家畜線蟲病生物防控研究,通過線蟲的天敵—捕食線蟲性真菌及其侵染線蟲過程中分泌的毒力因子(胞外蛋白酶)來控制線蟲病已經(jīng)顯示出巨大的應(yīng)用潛力,被認(rèn)為是一種人-動物-環(huán)境友好型線蟲病生物防控方法。因此,分離捕食線蟲性真菌、研究其侵染線蟲的胞外蛋白酶對于家畜消化道線蟲病的科學(xué)防控具有重要意義。本研究以具有強(qiáng)捕食線蟲活性的少孢節(jié)叢孢菌新疆分離株XJ-XAo1為研究對象,克隆了其侵染性絲氨酸蛋白酶XAoz1、P12和P186的基因,進(jìn)行了生物信息學(xué)分析;將絲氨酸蛋白酶XAoz1基因克隆入酵母表達(dá)載體中,在畢赤酵母系統(tǒng)誘導(dǎo)表達(dá),對表達(dá)的重組蛋白酶開展了殺線蟲活性分析。該研究揭示了少孢節(jié)叢孢菌XJ-XAo1株在侵染線蟲過程中分泌的毒力因子XAoz1的基因結(jié)構(gòu)特征,分析了重組蛋白酶reXAoz...
【文章來源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)211工程院校
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
1 捕食線蟲性真菌的捕食器官
2 捕食線蟲性真菌對寄生線蟲的作用
3 捕食線蟲性真菌侵染性胞外蛋白酶
4 展望
第二篇 實(shí)驗(yàn)研究
實(shí)驗(yàn)一 少孢節(jié)叢孢菌胞外絲氨酸類蛋白酶的基因克隆及序列分析
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 少孢節(jié)叢孢菌新疆分離株XJ-XAo1的形態(tài)特征
2.2 絲氨酸類蛋白酶基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
2.3 絲氨酸類蛋白酶基因的生物信息學(xué)分析
2.4 XAoz1絲氨酸蛋白酶的二/三級結(jié)構(gòu)預(yù)測
2.5 絲氨酸類蛋白酶基因的同源性及遺傳進(jìn)化分析
3 討論
實(shí)驗(yàn)二 少孢節(jié)叢孢菌胞外絲氨酸蛋白酶XAoz1在畢赤酵母系統(tǒng)的表達(dá)
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 XAoz1成熟肽編碼基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
2.2 重組表達(dá)載體的鑒定
2.3 重組畢赤酵母的鑒定
2.4 重組蛋白酶表達(dá)的鑒定
3 討論
實(shí)驗(yàn)三 重組絲氨酸蛋白酶的純化及殺線蟲活性研究
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 純化重組蛋白酶的特性
2.2 重組絲氨酸蛋白酶的殺線蟲活性研究
3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]食線蟲真菌資源研究概況[J]. 張穎,李國紅,張克勤. 菌物學(xué)報(bào). 2011(06)
[2]少孢節(jié)叢孢菌的分離鑒定及捕食線蟲活性研究[J]. 孟慶玲,王為升,王俊偉,才學(xué)鵬,羅建勛,陳創(chuàng)夫,喬軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(03)
[3]用嗜線蟲真菌防治家畜胃腸道線蟲病的研究進(jìn)展[J]. 王琳. 中國獸藥雜志. 2006(03)
[4]口服少孢節(jié)叢孢菌孢子對家畜糞便中線蟲幼蟲的殺滅研究[J]. 楊曉野,吳彩艷,楊蓮茹,劉珍蓮. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(09)
[5]捕食線蟲性真菌——少孢節(jié)叢孢菌體外殺寄生性線蟲幼蟲的研究[J]. 楊曉野,楊蓮茹,劉珍蓮,王燕,汪明,劉軍. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(03)
[6]捕食線蟲性真菌的分離培養(yǎng)及分布規(guī)律[J]. 楊曉野,楊蓮茹,劉珍蓮,董世娟,考桂蘭. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2003(04)
[7]食線蟲菌物胞外蛋白酶基因工程研究進(jìn)展[J]. 趙明蓮,廖昌瓏,莫明和,張克勤. 中國生物工程雜志. 2002(05)
[8]云南省捕食線蟲真菌資源調(diào)查[J]. 畢廷菊,張克勤,李文鵬. 云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(01)
[9]中國的捕食線蟲真菌——Ⅴ.節(jié)叢孢屬[J]. 張克勤,周薇,何世川,黃大飛. 真菌學(xué)報(bào). 1994(02)
[10]捕食線蟲真菌在我國的分布[J]. 劉杏忠,裘維蕃,繆作清. 真菌學(xué)報(bào). 1993(03)
博士論文
[1]食線蟲真菌侵染性胞外蛋白酶的基因克隆與表達(dá)[D]. 趙明蓮.云南大學(xué) 2003
本文編號:3634854
【文章來源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)211工程院校
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
1 捕食線蟲性真菌的捕食器官
2 捕食線蟲性真菌對寄生線蟲的作用
3 捕食線蟲性真菌侵染性胞外蛋白酶
4 展望
第二篇 實(shí)驗(yàn)研究
實(shí)驗(yàn)一 少孢節(jié)叢孢菌胞外絲氨酸類蛋白酶的基因克隆及序列分析
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 少孢節(jié)叢孢菌新疆分離株XJ-XAo1的形態(tài)特征
2.2 絲氨酸類蛋白酶基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
2.3 絲氨酸類蛋白酶基因的生物信息學(xué)分析
2.4 XAoz1絲氨酸蛋白酶的二/三級結(jié)構(gòu)預(yù)測
2.5 絲氨酸類蛋白酶基因的同源性及遺傳進(jìn)化分析
3 討論
實(shí)驗(yàn)二 少孢節(jié)叢孢菌胞外絲氨酸蛋白酶XAoz1在畢赤酵母系統(tǒng)的表達(dá)
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 XAoz1成熟肽編碼基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
2.2 重組表達(dá)載體的鑒定
2.3 重組畢赤酵母的鑒定
2.4 重組蛋白酶表達(dá)的鑒定
3 討論
實(shí)驗(yàn)三 重組絲氨酸蛋白酶的純化及殺線蟲活性研究
摘要
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 純化重組蛋白酶的特性
2.2 重組絲氨酸蛋白酶的殺線蟲活性研究
3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]食線蟲真菌資源研究概況[J]. 張穎,李國紅,張克勤. 菌物學(xué)報(bào). 2011(06)
[2]少孢節(jié)叢孢菌的分離鑒定及捕食線蟲活性研究[J]. 孟慶玲,王為升,王俊偉,才學(xué)鵬,羅建勛,陳創(chuàng)夫,喬軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(03)
[3]用嗜線蟲真菌防治家畜胃腸道線蟲病的研究進(jìn)展[J]. 王琳. 中國獸藥雜志. 2006(03)
[4]口服少孢節(jié)叢孢菌孢子對家畜糞便中線蟲幼蟲的殺滅研究[J]. 楊曉野,吳彩艷,楊蓮茹,劉珍蓮. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(09)
[5]捕食線蟲性真菌——少孢節(jié)叢孢菌體外殺寄生性線蟲幼蟲的研究[J]. 楊曉野,楊蓮茹,劉珍蓮,王燕,汪明,劉軍. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(03)
[6]捕食線蟲性真菌的分離培養(yǎng)及分布規(guī)律[J]. 楊曉野,楊蓮茹,劉珍蓮,董世娟,考桂蘭. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2003(04)
[7]食線蟲菌物胞外蛋白酶基因工程研究進(jìn)展[J]. 趙明蓮,廖昌瓏,莫明和,張克勤. 中國生物工程雜志. 2002(05)
[8]云南省捕食線蟲真菌資源調(diào)查[J]. 畢廷菊,張克勤,李文鵬. 云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(01)
[9]中國的捕食線蟲真菌——Ⅴ.節(jié)叢孢屬[J]. 張克勤,周薇,何世川,黃大飛. 真菌學(xué)報(bào). 1994(02)
[10]捕食線蟲真菌在我國的分布[J]. 劉杏忠,裘維蕃,繆作清. 真菌學(xué)報(bào). 1993(03)
博士論文
[1]食線蟲真菌侵染性胞外蛋白酶的基因克隆與表達(dá)[D]. 趙明蓮.云南大學(xué) 2003
本文編號:3634854
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