防御素是一種廣泛存在于生物界的可以殺死細(xì)菌、真菌或者病毒等微生物并有抗腫瘤活性的短肽,是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分。研究表明,綿羊血液中雌激素的變化會(huì)引起其生殖器官β-防御素1（sheep beta defensin 1 SBD-1）表達(dá)量的變化,并呈正相關(guān)。進(jìn)行體外雌激素對(duì)綿羊輸卵管上皮細(xì)胞內(nèi)SBD-1表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究,對(duì)研究雌激素和粘膜免疫的關(guān)系意義較大。本實(shí)驗(yàn)通過RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)不同濃度的17-β雌二醇（17β-estrodiol E₂）、作用不同時(shí)間后對(duì)培養(yǎng)的綿羊輸卵管上皮細(xì)胞SBD-1表達(dá)的影響,確定出適合的添加劑量和時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,10^-8mol/L為E₂刺激最佳的濃度,3.5 h為其最高表達(dá)量時(shí)間點(diǎn),與對(duì)照組0h相比有顯著性升高（P<0.05）,3.5h后隨著時(shí)間的增加,SBD-1的表達(dá)量逐漸降低,但均高于對(duì)照組。通過對(duì)E₂作用培養(yǎng)的輸卵上皮細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,結(jié)果表明,在所有差異基因中共有619個(gè)富集到GO-Term中,其中顯著性富集到生物過程的基因有氧化還原過... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PI3K-Akt通路Fig.1PI3K-AktPathway

PI3K/Akt 信號(hào)傳導(dǎo)通路是生物機(jī)體中一個(gè)關(guān)鍵的調(diào)節(jié)通路，隨著研究的深入，與其有關(guān)的下游通路也相繼被人們發(fā)現(xiàn)。而與它相關(guān)的下游關(guān)鍵蛋白也逐漸被人們重視起來，進(jìn)行更深入的研究。例如 NF-κB、GSK-3β、m TOR、Bad、MDM2、Caspase9、P70S6K、FKHR 等[36]。這些通路的相關(guān)生物學(xué)功能，對(duì)生物體既有好的促進(jìn)作用，同時(shí)對(duì)生物體也有壞的一面，通過對(duì)該通路進(jìn)行更加深入的研究，了解它的作用機(jī)制和所有相關(guān)的關(guān)鍵蛋白的調(diào)節(jié)機(jī)制，為藥物開發(fā)和疾病治療提供理論知識(shí)。1.6 MAPK 信號(hào)通路的研究進(jìn)展1.6.1 MAPK 信號(hào)通路的概述MAPK 是一類廣泛存在于哺乳動(dòng)物體內(nèi)的一類絲/蘇氨酸蛋白激酶，主要有ERK1/2、ERK5、JNK 和 p38 四個(gè)亞族。在真核細(xì)胞內(nèi)，MAPK 通過轉(zhuǎn)錄因子磷酸化而改變基因的表達(dá)水平，參與介導(dǎo)胚胎發(fā)育、細(xì)胞生長、增殖、分化、凋亡等多種復(fù)雜的生物功能[38]。MAPK 通路可以被細(xì)胞外的信號(hào)或刺激所激活，如物理應(yīng)激、生長因子、炎癥因子、細(xì)菌和病毒等。該通路采用經(jīng)典的三級(jí)激酶級(jí)聯(lián)傳遞信號(hào)的方式[38]。具體過程如下圖 2 所示。

圖 3 體外培養(yǎng)輸卵管上皮細(xì)胞Fig.3 The character of oviduct epithelial cellE2細(xì)胞毒性檢測(cè)培養(yǎng)綿羊輸卵管上皮細(xì)胞的活性和添加 E2等對(duì)細(xì)行檢測(cè)，如圖 4、5 所示，體外添加 E2細(xì)胞的活和增殖無明顯差異，說明添加一定量的 E2等對(duì)細(xì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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