PCV2是目前豬場中普遍存在的一種病原,可以引起多種豬圓環(huán)病毒病,如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PDNS）、仔豬先天性震顫（CT）、豬呼吸道疾病綜合征（PRDC）、豬增生性壞死性肺炎（PNP）和繁殖障礙等,其中最為嚴(yán)重的是PMWS,給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,對PMWS的防治越來越引起人們的關(guān)注。谷氨酰胺是哺乳動物體內(nèi)含量最豐富的游離氨基酸,可以作為氧化燃料,為糖異生和脂肪合成提供前體,在基因和蛋白表達(dá)等方面起到調(diào)節(jié)作用。谷氨酰胺還可以影響病毒的感染和復(fù)制,人巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染需要依賴于谷氨酰胺,在無谷氨酰胺的培養(yǎng)基中不能產(chǎn)生感染的病毒粒子,在缺乏谷氨酰胺培養(yǎng)的倉鼠腎細(xì)胞（BHK）細(xì)胞中,日本血球凝集病毒（HJV）的釋放和包膜蛋白的合成被明顯抑制,但水皰性口炎病毒（VSV）和新城疫病毒（NDV）的生長不受谷氨酰胺的影響。目前尚無有關(guān)谷氨酰胺對PCV2體外感染復(fù)制的研究報道。本論文主要研究了谷氨酰胺對PCV2在PK15細(xì)胞中復(fù)制的影響及其機(jī)理,為谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)上的應(yīng)用和PCV2的體外增殖提供理論參考。試驗一:谷氨酰胺對PK15細(xì)胞增殖和PC... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號與縮略語
前言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)研究進(jìn)展
        1 生物學(xué)特性
            1.1 病原學(xué)
            1.2 基因結(jié)構(gòu)
            1.3 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄
            1.4 細(xì)胞培養(yǎng)特性
        2 流行病學(xué)
        3 PCV2相關(guān)疾病
            3.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)
            3.2 豬皮炎與腎病綜合癥(PDNS)
            3.3 繁殖障礙
            3.4 仔豬先天性震顫(CT)
            3.5 豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)
            3.6 豬增生性壞死性肺炎(PNP)
        4 豬圓環(huán)病毒病的診斷
        5 豬圓環(huán)病毒病的防治
            5.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理
            5.2 生物安全強(qiáng)化
            5.3 控制營養(yǎng)結(jié)構(gòu)
            5.4 控制混合感染
            5.5 合理治療與免疫
            5.6 實施嚴(yán)格的引進(jìn)及繁育管理
        參考文獻(xiàn)
    第二章 谷氨酰胺研究進(jìn)展
        1 谷氨酰胺的理化性質(zhì)
        2 谷氨酰胺的代謝
            2.1 腸道
            2.2 骨骼肌
            2.3 肝臟
            2.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        3 谷氨酰胺的營養(yǎng)作用
        4 谷氨酰胺的抗氧化作用
        5 谷氨酰胺與免疫
        6 谷氨酰胺與病毒感染
        7 谷氨酰胺的應(yīng)用
        參考文獻(xiàn)
第二部分 試驗研究
    第三章 谷氨酰胺對PCV2在PK15中復(fù)制的影響
        1 材料與方法
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑和材料
            1.3 細(xì)胞傳代和病毒培養(yǎng)
            1.4 MTT法測定細(xì)胞增殖
            1.5 病毒總DNA提取
            1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
            1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細(xì)胞感染率
            1.8 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 不同濃度谷氨酰胺對PK15細(xì)胞增殖的影響
            2.2 PCV2在正常培養(yǎng)基和無谷氨酰胺培養(yǎng)基中的復(fù)制
            2.3 不同濃度谷氨酰胺對PCV2在PK15細(xì)胞中感染復(fù)制的影響
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第四章 谷氨酰胺影響PCV2復(fù)制的機(jī)理研究
        1 材料與方法
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑和材料
            1.3 細(xì)胞傳代和病毒培養(yǎng)
            1.4 試驗設(shè)計
            1.5 細(xì)胞內(nèi)GSH、SOD和MDA的測定
            1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
            1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細(xì)胞感染率
            1.8 熒光定量PCR檢測p38 mRNA的表達(dá)
            1.9 Western blot檢測p38磷酸化水平
            1.10 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 降低谷氨酰胺濃度對PK15細(xì)胞抗氧化能力的影響
            2.2 降低谷氨酰胺濃度對PCV2復(fù)制的影響
            2.3 降低谷氨酰胺濃度對PCV2感染細(xì)胞中p38 MAPK的影響
            2.4 不同處理對病毒感染細(xì)胞內(nèi)GSH水平的影響
            2.5 不同處理對PCV2復(fù)制的影響
            2.6 不同處理對細(xì)胞p38蛋白表達(dá)的影響
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]PCV-2感染仔豬的病理學(xué)變化及淋巴結(jié)細(xì)胞凋亡的研究[D]. 施旅娟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
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[4]谷氨酰胺的抗動物應(yīng)激研究[D]. 謝新民.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號：3632838