谷氨酰胺對PCV2在PK15細胞中復制的影響及其機理研究
發(fā)布時間:2022-02-19 11:44
PCV2是目前豬場中普遍存在的一種病原,可以引起多種豬圓環(huán)病毒病,如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、仔豬先天性震顫(CT)、豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)、豬增生性壞死性肺炎(PNP)和繁殖障礙等,其中最為嚴重的是PMWS,給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經濟損失,對PMWS的防治越來越引起人們的關注。谷氨酰胺是哺乳動物體內含量最豐富的游離氨基酸,可以作為氧化燃料,為糖異生和脂肪合成提供前體,在基因和蛋白表達等方面起到調節(jié)作用。谷氨酰胺還可以影響病毒的感染和復制,人巨細胞病毒(HCMV)感染需要依賴于谷氨酰胺,在無谷氨酰胺的培養(yǎng)基中不能產生感染的病毒粒子,在缺乏谷氨酰胺培養(yǎng)的倉鼠腎細胞(BHK)細胞中,日本血球凝集病毒(HJV)的釋放和包膜蛋白的合成被明顯抑制,但水皰性口炎病毒(VSV)和新城疫病毒(NDV)的生長不受谷氨酰胺的影響。目前尚無有關谷氨酰胺對PCV2體外感染復制的研究報道。本論文主要研究了谷氨酰胺對PCV2在PK15細胞中復制的影響及其機理,為谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)上的應用和PCV2的體外增殖提供理論參考。試驗一:谷氨酰胺對PK15細胞增殖和PC...
【文章來源】:南京農業(yè)大學江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號與縮略語
前言
第一部分 文獻綜述
第一章 豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)研究進展
1 生物學特性
1.1 病原學
1.2 基因結構
1.3 復制和轉錄
1.4 細胞培養(yǎng)特性
2 流行病學
3 PCV2相關疾病
3.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)
3.2 豬皮炎與腎病綜合癥(PDNS)
3.3 繁殖障礙
3.4 仔豬先天性震顫(CT)
3.5 豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)
3.6 豬增生性壞死性肺炎(PNP)
4 豬圓環(huán)病毒病的診斷
5 豬圓環(huán)病毒病的防治
5.1 加強飼養(yǎng)管理
5.2 生物安全強化
5.3 控制營養(yǎng)結構
5.4 控制混合感染
5.5 合理治療與免疫
5.6 實施嚴格的引進及繁育管理
參考文獻
第二章 谷氨酰胺研究進展
1 谷氨酰胺的理化性質
2 谷氨酰胺的代謝
2.1 腸道
2.2 骨骼肌
2.3 肝臟
2.4 細胞培養(yǎng)
3 谷氨酰胺的營養(yǎng)作用
4 谷氨酰胺的抗氧化作用
5 谷氨酰胺與免疫
6 谷氨酰胺與病毒感染
7 谷氨酰胺的應用
參考文獻
第二部分 試驗研究
第三章 谷氨酰胺對PCV2在PK15中復制的影響
1 材料與方法
1.1 主要儀器
1.2 主要試劑和材料
1.3 細胞傳代和病毒培養(yǎng)
1.4 MTT法測定細胞增殖
1.5 病毒總DNA提取
1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細胞感染率
1.8 數(shù)據分析
2 結果
2.1 不同濃度谷氨酰胺對PK15細胞增殖的影響
2.2 PCV2在正常培養(yǎng)基和無谷氨酰胺培養(yǎng)基中的復制
2.3 不同濃度谷氨酰胺對PCV2在PK15細胞中感染復制的影響
3 討論
參考文獻
第四章 谷氨酰胺影響PCV2復制的機理研究
1 材料與方法
1.1 主要儀器
1.2 主要試劑和材料
1.3 細胞傳代和病毒培養(yǎng)
1.4 試驗設計
1.5 細胞內GSH、SOD和MDA的測定
1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細胞感染率
1.8 熒光定量PCR檢測p38 mRNA的表達
1.9 Western blot檢測p38磷酸化水平
1.10 數(shù)據分析
2 結果
2.1 降低谷氨酰胺濃度對PK15細胞抗氧化能力的影響
2.2 降低谷氨酰胺濃度對PCV2復制的影響
2.3 降低谷氨酰胺濃度對PCV2感染細胞中p38 MAPK的影響
2.4 不同處理對病毒感染細胞內GSH水平的影響
2.5 不同處理對PCV2復制的影響
2.6 不同處理對細胞p38蛋白表達的影響
3 討論
參考文獻
全文總結
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒病及其生物制品學的研究進展[J]. 郎洪武,陳曉春,吳華偉,鄧永,高金源,楊漢春. 中國獸醫(yī)科學. 2012(05)
[2]病毒感染與氧化應激的關系[J]. 施志慧,史訓龍,朱海燕,周珮. 復旦學報(醫(yī)學版). 2012(01)
[3]精氨酸和谷氨酰胺對豬小腸上皮細胞增殖的影響及機理探討[J]. 聶新志,蔣宗勇,林映才,鄭春田,周桂蓮,汪仕奎,王麗. 中國農學通報. 2012(02)
[4]淺談仔豬PMWS的認識及防控策略[J]. 吳舒淵. 中國畜禽種業(yè). 2011(12)
[5]豬圓環(huán)病毒病的流行病學調查[J]. 廖榮斌,趙洪翠,李文濤,肖文,劉英玉,劉曉麗,李慶,王雷,何啟蓋. 養(yǎng)豬. 2011(01)
[6]豬圓環(huán)病毒感染相關疾病及防控措施[J]. 陳潔,金爾光,郭一,葉勝強,錢運國,童偉文,鮑伯勝. 現(xiàn)代農業(yè)科技. 2010(21)
[7]豬圓環(huán)病毒�。≒CVD)研究進展[J]. 宋長緒,梁鵬帥. 廣東農業(yè)科學. 2010(09)
[8]谷氨酰胺對免疫功能的影響[J]. 李寧,賴萬強. 醫(yī)學綜述. 2010(06)
[9]谷氨酰胺生理功能與應用研究進展[J]. 王書平,劉俊華. 安徽農業(yè)科學. 2009(22)
[10]p38絲裂原活化蛋白激酶抑制劑研究進展[J]. 王國軍,劉亞偉,李玉花,姜勇. 生物技術通訊. 2009(03)
博士論文
[1]谷氨酰胺對早期斷奶仔豬腸道營養(yǎng)與免疫功能影響機理的研究[D]. 劉濤.華中農業(yè)大學 2002
[2]谷氨酰胺對早期斷奶仔豬腸道的保護作用及其機理研究[D]. 張軍民.中國農業(yè)科學院 2000
碩士論文
[1]谷胱甘肽納米脂質體的研制[D]. 王祥.江南大學 2008
[2]PCV-2感染仔豬的病理學變化及淋巴結細胞凋亡的研究[D]. 施旅娟.南京農業(yè)大學 2006
[3]仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征防治技術研究[D]. 胡興海.南京農業(yè)大學 2005
[4]谷氨酰胺的抗動物應激研究[D]. 謝新民.南京農業(yè)大學 2003
本文編號:3632838
【文章來源】:南京農業(yè)大學江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號與縮略語
前言
第一部分 文獻綜述
第一章 豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)研究進展
1 生物學特性
1.1 病原學
1.2 基因結構
1.3 復制和轉錄
1.4 細胞培養(yǎng)特性
2 流行病學
3 PCV2相關疾病
3.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)
3.2 豬皮炎與腎病綜合癥(PDNS)
3.3 繁殖障礙
3.4 仔豬先天性震顫(CT)
3.5 豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)
3.6 豬增生性壞死性肺炎(PNP)
4 豬圓環(huán)病毒病的診斷
5 豬圓環(huán)病毒病的防治
5.1 加強飼養(yǎng)管理
5.2 生物安全強化
5.3 控制營養(yǎng)結構
5.4 控制混合感染
5.5 合理治療與免疫
5.6 實施嚴格的引進及繁育管理
參考文獻
第二章 谷氨酰胺研究進展
1 谷氨酰胺的理化性質
2 谷氨酰胺的代謝
2.1 腸道
2.2 骨骼肌
2.3 肝臟
2.4 細胞培養(yǎng)
3 谷氨酰胺的營養(yǎng)作用
4 谷氨酰胺的抗氧化作用
5 谷氨酰胺與免疫
6 谷氨酰胺與病毒感染
7 谷氨酰胺的應用
參考文獻
第二部分 試驗研究
第三章 谷氨酰胺對PCV2在PK15中復制的影響
1 材料與方法
1.1 主要儀器
1.2 主要試劑和材料
1.3 細胞傳代和病毒培養(yǎng)
1.4 MTT法測定細胞增殖
1.5 病毒總DNA提取
1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細胞感染率
1.8 數(shù)據分析
2 結果
2.1 不同濃度谷氨酰胺對PK15細胞增殖的影響
2.2 PCV2在正常培養(yǎng)基和無谷氨酰胺培養(yǎng)基中的復制
2.3 不同濃度谷氨酰胺對PCV2在PK15細胞中感染復制的影響
3 討論
參考文獻
第四章 谷氨酰胺影響PCV2復制的機理研究
1 材料與方法
1.1 主要儀器
1.2 主要試劑和材料
1.3 細胞傳代和病毒培養(yǎng)
1.4 試驗設計
1.5 細胞內GSH、SOD和MDA的測定
1.6 實時熒光定量PCR測定PCV2 DNA拷貝數(shù)
1.7 間接免疫熒光檢測PCV2陽性細胞感染率
1.8 熒光定量PCR檢測p38 mRNA的表達
1.9 Western blot檢測p38磷酸化水平
1.10 數(shù)據分析
2 結果
2.1 降低谷氨酰胺濃度對PK15細胞抗氧化能力的影響
2.2 降低谷氨酰胺濃度對PCV2復制的影響
2.3 降低谷氨酰胺濃度對PCV2感染細胞中p38 MAPK的影響
2.4 不同處理對病毒感染細胞內GSH水平的影響
2.5 不同處理對PCV2復制的影響
2.6 不同處理對細胞p38蛋白表達的影響
3 討論
參考文獻
全文總結
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒病及其生物制品學的研究進展[J]. 郎洪武,陳曉春,吳華偉,鄧永,高金源,楊漢春. 中國獸醫(yī)科學. 2012(05)
[2]病毒感染與氧化應激的關系[J]. 施志慧,史訓龍,朱海燕,周珮. 復旦學報(醫(yī)學版). 2012(01)
[3]精氨酸和谷氨酰胺對豬小腸上皮細胞增殖的影響及機理探討[J]. 聶新志,蔣宗勇,林映才,鄭春田,周桂蓮,汪仕奎,王麗. 中國農學通報. 2012(02)
[4]淺談仔豬PMWS的認識及防控策略[J]. 吳舒淵. 中國畜禽種業(yè). 2011(12)
[5]豬圓環(huán)病毒病的流行病學調查[J]. 廖榮斌,趙洪翠,李文濤,肖文,劉英玉,劉曉麗,李慶,王雷,何啟蓋. 養(yǎng)豬. 2011(01)
[6]豬圓環(huán)病毒感染相關疾病及防控措施[J]. 陳潔,金爾光,郭一,葉勝強,錢運國,童偉文,鮑伯勝. 現(xiàn)代農業(yè)科技. 2010(21)
[7]豬圓環(huán)病毒�。≒CVD)研究進展[J]. 宋長緒,梁鵬帥. 廣東農業(yè)科學. 2010(09)
[8]谷氨酰胺對免疫功能的影響[J]. 李寧,賴萬強. 醫(yī)學綜述. 2010(06)
[9]谷氨酰胺生理功能與應用研究進展[J]. 王書平,劉俊華. 安徽農業(yè)科學. 2009(22)
[10]p38絲裂原活化蛋白激酶抑制劑研究進展[J]. 王國軍,劉亞偉,李玉花,姜勇. 生物技術通訊. 2009(03)
博士論文
[1]谷氨酰胺對早期斷奶仔豬腸道營養(yǎng)與免疫功能影響機理的研究[D]. 劉濤.華中農業(yè)大學 2002
[2]谷氨酰胺對早期斷奶仔豬腸道的保護作用及其機理研究[D]. 張軍民.中國農業(yè)科學院 2000
碩士論文
[1]谷胱甘肽納米脂質體的研制[D]. 王祥.江南大學 2008
[2]PCV-2感染仔豬的病理學變化及淋巴結細胞凋亡的研究[D]. 施旅娟.南京農業(yè)大學 2006
[3]仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征防治技術研究[D]. 胡興海.南京農業(yè)大學 2005
[4]谷氨酰胺的抗動物應激研究[D]. 謝新民.南京農業(yè)大學 2003
本文編號:3632838
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