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Ⅱ型豬細(xì)環(huán)病毒及Ⅱ型豬圓環(huán)病毒雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法的建立

發(fā)布時間:2022-02-15 16:54
  為了在臨床上能夠同時、快速、準(zhǔn)確的檢測Ⅱ型豬細(xì)環(huán)病毒(TTSuV2)和Ⅱ型豬圓環(huán)病毒(PCV2),本試驗根據(jù)GenBank上公布的TTSuV2和PCV2序列中的高度保守片段設(shè)計引物,并分別合成標(biāo)記羧基熒光素試劑(FAM)和六氯熒光素(HEX)報告基團的探針,建立雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法,并對該方法的靈敏度、穩(wěn)定性和特異性進行評價。結(jié)果顯示,建立的雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法對TTSuV2和PCV2的最低檢測濃度均為1×102拷貝/μL,與豬源的其他病毒性病原體無交叉反應(yīng)。應(yīng)用建立的檢測方法對采集的300份病料樣品進行檢測。結(jié)果顯示,PCV2單獨感染率為36.0%,TTSuV2單獨感染率為60.0%,2種病毒混合感染率為14.8%。表明本試驗建立的雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法比普通PCR更加敏感,可應(yīng)用于臨床檢測TTSuV2和PCV2,并可分析TTSuV2和PCV2的載量與相關(guān)疾病的關(guān)系。 

【文章來源】:中國獸醫(yī)雜志. 2020,56(04)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

Ⅱ型豬細(xì)環(huán)病毒及Ⅱ型豬圓環(huán)病毒雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法的建立


PCV2 與 TTSuV2重組質(zhì)粒PCR結(jié)果

擴增曲線,熒光定量PCR,交叉反應(yīng),基因組


分別以PEDV、PRRSV、PRV、SFV、PCV1、TTSuV1基因組為模板,對雙重?zé)晒舛縋CR進行特異性鑒定,結(jié)果如圖2、3所示。結(jié)果表明,本試驗所建立的雙重?zé)晒舛縋CR對PCV2及TTSuV2有很好的特異性,與其他豬病毒無交叉反應(yīng)。圖3 TTSuV2的特異性擴增曲線

擴增曲線,熒光定量PCR,敏感性


TTSuV2的特異性擴增曲線

【參考文獻】:
碩士論文
[1]豬細(xì)環(huán)病毒2型感染與豬斷奶后多系統(tǒng)哀竭綜合征的相關(guān)性分析[D]. 王園.北京農(nóng)學(xué)院 2016



本文編號:3626986

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