奶牛養(yǎng)殖業(yè)為寧夏地區(qū)畜牧業(yè)主要產(chǎn)業(yè)之一,近幾年隨著奶牛存欄數(shù)日趨增加,對奶牛疾病的防控難度也隨之提升。在奶牛乳房炎方面,由肺炎克雷伯氏菌引起的奶牛乳房炎在2016年年底至2017年年初頻繁出現(xiàn),患病牛只除表現(xiàn)乳房炎外,部分牛只還出現(xiàn)全身性感染癥狀甚至死亡現(xiàn)象,給牧場造成巨大損失。該菌對寧夏地區(qū)奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成一定安全隱患,但對寧夏地區(qū)牛源肺炎克雷伯氏菌的研究鮮有報道�；谶@一背景,本研究選擇對寧夏地區(qū)分離得到的牛源肺炎克雷伯氏菌進行一系列實驗室檢測,以期為今后寧夏地區(qū)牛源肺炎克雷伯氏菌的防治工作提供一定理論支持。本研究通過對送往實驗室檢測的病料進行細菌分離培養(yǎng)初步獲得疑似菌株。將疑似菌株進行純化培養(yǎng)后,對純化菌株進行生化試驗、細菌特征性基因（khe基因）PCR擴增從疑似菌株中篩選出肺炎克雷伯氏菌。得到肺炎克雷伯氏菌后,對菌株進行毒力基因及耐藥基因分析,從而通過分子生物學角度為寧夏地區(qū)牛源肺炎克雷伯氏菌病的治療和防治提供—定理論依據(jù)。結(jié)果表明,本研究通過生化實驗及細菌特異性基因khe基因PCR擴增最終從疑似菌株中確定14株肺炎克雷伯氏菌。對菌株進行毒力基因檢測發(fā)現(xiàn),mrkd毒力基因檢出率為... 

【文章來源】：寧夏大學寧夏回族自治區(qū)211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１肺炎克雷伯氏菌ｋｈｅ基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物電泳圖譜??Ｍ：ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００；?Ｎ：陰性對照；１－１４：?ｋｈｅ?基因?ＰＣＲ?擴增產(chǎn)物??－

（表中各項檢測指標代碼含義見附錄）??２．?３．?３肺炎克雷伯氏菌溶血酵素基因（ｋｈｅ）鑒定??細菌溶血酵素基因（ｋｈｅ）凝膠電泳圖譜見圖２－１：??圖２－１肺炎克雷伯氏菌ｋｈｅ基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物電泳圖譜??Ｍ：ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００；?Ｎ：陰性對照；１－１４：?ｋｈｅ?基因?ＰＣＲ?擴增產(chǎn)物??Ｆｉｇ．２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ｋｈｅ?ｇｅｎｅ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｋｅｒ?ＤＬ２０００：?Ｎ：?Ｔｈｅ?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?１－１４：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ｋｈｅ?ｇｅｎｅ??結(jié)果顯示，有１４株疑似菌株ＰＣＲ擴增產(chǎn)物大�。矗埃埃猓鹱笥�，已知該基因ＰＣＲ擴増產(chǎn)物大小??為４２５ｂｐ

分別為：ｍｒｋｄ?為?２８．?６％，ｗａｂｇ?為?９２．?９％，?ｒｍｐａ?為?９２．?９％，ｕｒｅａ?為?０．?０％，?ｆｉｍｈ?為?１４．?３％。??以下為部分菌株毒力基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物凝膠電泳圖譜。??部分肺炎克雷伯氏菌分離株ｍｒｋｌ）毒力基因凝膠電泳圖譜見圖３－１：??■■ｉｓ??圖３－１肺炎克雷伯氏菌ｍｒｋｄ毒力基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物電泳圖譜??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００：?Ｎ：陰性對照；Ｐ：陽性對照；１－４：細菌ｍｒｋｄ基因擴增產(chǎn)物??Ｆｉｇ．３－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ｍｒｋｄ?ｇｅｎｅ??－１７－??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3626967