發(fā)布時間：2022-02-10 13:47

　　沙門菌是最常見的食源性致病菌之一,其危害范圍極大,能夠引起各類農(nóng)產(chǎn)品的污染。目前,沙門菌所造成的食品污染是國際上極為關(guān)注的食品安全問題,據(jù)估計,美國每年由于沙門菌屬細菌感染的病例約為140萬[1],在中國細菌性食物中毒中有70%～80%是由食入沙門菌而引起,研究其在食品動物中的污染及分布現(xiàn)狀具有重要的公共衛(wèi)生意義。本研究對江蘇省某生豬屠宰場豬源病料,羊屠宰場以及部分豬場送檢樣品的沙門菌進行了分離鑒定,通過藥敏試驗和耐藥基因檢測,初步掌握了所分離的沙門菌耐藥表型,分離菌株耐藥表型與其所攜帶耐藥基因之間的關(guān)系。研究結(jié)果有利于指導(dǎo)生產(chǎn)實踐中抗菌藥物的合理應(yīng)用,同時也能為沙門菌引起的公共衛(wèi)生安全和農(nóng)產(chǎn)品安全問題的研究提供基礎(chǔ)。沙門菌作為一種侵襲性胞內(nèi)菌,經(jīng)減毒后具備強大的侵襲潛力,在宿主體內(nèi)緩慢生長,能夠有效、持續(xù)地刺激機體產(chǎn)生強有力的細胞、體液以及局部黏膜免疫應(yīng)答。本論文在分離株中篩選出1株鼠傷寒沙門菌強毒株rSC0032;在其中分別引入APcrp::TTaraCPBAD crp,△sopB及△pmi突變,構(gòu)建成延遲減毒的重組沙門菌,命名為rSC0117;以BALB/c小鼠為實驗動物,評價了... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２沙門菌分離株的菌體形態(tài)??Ｆｉ．?１－２?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｍｏｒｈｏｌｏｏｆ?Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ?ｉｓｏｌａｔｅｓ??

３．２?ＰＣＲ鑒定沙門菌屬??沙門菌屬及／ｍｚ基因的擴增結(jié)果中，總計８６株菌株能夠擴增出約２６０?ｂｐ與４９５ｂｐ??的ＤＮＡ片段，表明所分離菌中有８６株沙門菌。擴增結(jié)果如圖１－３。??豬源樣品中肝臟、腸道及糞便的分離率分別為８．４３％?（１４／１６６）、２７．８３％?（６４／２３０）、??３．１７％?（２／６３）；羊源樣品中分離到１株沙門菌（２．６３％）；其余送檢樣品中分離到５株沙??門菌。??Ｍ?１?２?３?４?５??■??圖１－３加（２５０ｂｐ），?；ｎ＜４９５ｂｐ）基因擴增結(jié)果??Ｍ：?ＤＬ２０００ＤＮＡｍａｒｋｅｒ；?１：陽性對照；３：陽性結(jié)果；２，４，５：陰性結(jié)果??Ｆｉｇ．?１－３?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｎ?ａｎｄ?ｈｕｔ?ｇｅｎｅｓ??Ｍ：?ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?３：?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ；?２，４？５：?Ｎｅｇａｔｉｖｅ??３．３血清型分布??分離到的８６株沙門菌，編號ｒＳＣ００３１？ｒＳＣ０１１６，經(jīng)血清型鑒定，其中３５株為德爾沙門菌，１６株為里森沙門菌，１１株為紐蘭沙門菌，１１株為鼠傷寒沙門菌，４株為豬霍亂門菌，３株為新斯托夫沙門菌，３株為恩昌加沙門菌，２株為徹斯特沙門菌，１株無法確定屬于Ｅ１群；８６株分離株中ｒＳＣ００６０為羊源分離株，其余均分離自豬源樣本。所有分離株??均分布于Ｂ群（５５．８１％）、Ｃ１群（２３．２６％）及Ｅ１群（２０．９３％）

以ｒＳＣ００３２（ＡＰｅｒｐ：：ＴＴ?ａｒａＣ?ＰＢＡＤ?ｃｒｐ）為受體菌，Ｘ７２１３（ｐＳ００６）為供體菌進行細菌的結(jié)合，??對接合突變體菌落用表３－２中Ａ５＿ｏ／７＿ｇ－Ｆ、Ａ知；ｘ８－Ｒ引物進行菌落ＰＣＲ鑒定，缺失株??陽性菌的ＰＣＲ片段大小為５９３ｂｐ，陰性菌的ＰＣＲ片段大小為２２９１ｂｐ?（圖３－２），表明??ｒＳＣ００３２（ＡＰｃｒｐ：：ＴＴ?ａｒａＣ?Ｐｂａｄ?ｃｒ；？，構(gòu)建成功。??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]雞源沙門氏菌耐藥性、致病性與毒力基因相關(guān)性分析[D]. 王德寧.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3618995