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犬流感病毒江蘇分離株致病生物學(xué)特性研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-12 12:41
  犬流感病毒(Canine influenza virus, CIV)是新出現(xiàn)的能引起犬嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)疾病的病原體,對(duì)犬的健康構(gòu)成嚴(yán)重危害。犬作為伴侶動(dòng)物在人類生活中占據(jù)特殊地位,因此犬流感病毒的感染也具有重要的公共衛(wèi)生意義。禽源CIV是近年來(lái)在亞洲地區(qū)流行的能夠引起犬嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)疾病的主要病原。目前我國(guó)分離到的CIV絕大多數(shù)是禽源H3N2亞型。本實(shí)驗(yàn)室先前對(duì)禽源H3N2亞型CIV江蘇分離株在小鼠上進(jìn)行的致病性研究顯示,A/canine/Jiangsu/06/2010(CIV06)能夠?qū)π∈笤斐煞瓮飧腥静⑶夷軌蚪?jīng)腸道排出病毒,暗示CIV06很可能具備不同于現(xiàn)已報(bào)道的大多數(shù)CIV毒株的致病生物學(xué)特性。為了研究CIV06對(duì)犬的致病性,在已有CIV06對(duì)小鼠致病性研究的基礎(chǔ)上開展了動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)。感染組采用9只比格犬,鼻內(nèi)接種10795半數(shù)雞胚感染量(EIDso)的病毒液,對(duì)照組接種等量滅菌PBS。感染后第1天犬即出現(xiàn)臨床癥狀,并檢測(cè)到病毒排出。呼吸系統(tǒng)疾病臨床癥狀計(jì)分發(fā)現(xiàn),感染組在感染后第4-6天,臨床癥狀得分達(dá)到峰值。PCR檢測(cè)表明,實(shí)驗(yàn)感染犬經(jīng)呼吸道和消化道途徑均可排毒。熒光定量PCR檢... 

【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 流感病毒的研究進(jìn)展
        1 流感病毒病毒粒子的結(jié)構(gòu)和功能
            1.1 病毒粒子結(jié)構(gòu)
            1.2 病毒粒子的組成
                1.2.1 PB2聚合酶
                1.2.2 PB1聚合酶
                1.2.3 PA聚合酶
                1.2.4 血凝素
                1.2.5 核蛋白
                1.2.6 神經(jīng)氨酸酶
                1.2.7 M1蛋白
                1.2.8 M2蛋白
                1.2.9 非結(jié)構(gòu)蛋白NS1和NS2
            1.3 流感病毒的復(fù)制
        2 流感病毒在自然界的傳播
            2.1 流感病毒的自然宿主
            2.2 流感病毒跨宿主傳播
            2.3 流感病毒對(duì)宿主的適應(yīng)
            2.4 流感病毒的監(jiān)測(cè)
        3 犬流感病毒
            3.1 概述
            3.2 H3N2犬流感病毒
        4 結(jié)束語(yǔ)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 犬流感病毒的致病特征
        1 決定流感病毒毒力的因素
            1.1 病毒的因素
            1.2 宿主的因素
        2 犬流感的臨床癥狀
            2.1 H3N8犬流感病毒感染
            2.2 H3N2犬流感病毒感染
            2.3 H5N2犬流感病毒感染
            2.4 臨床癥狀小結(jié)
        3 犬流感病毒的感染特征
            3.1 病毒感染犬的能力
            3.2 毒株間差異對(duì)感染的影響
            3.3 病理剖檢與組織病理學(xué)觀察
        4 犬流感病毒對(duì)其他動(dòng)物的感染能力
            4.1 馬
            4.2 禽類
            4.3 小鼠和豚鼠
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
    第三章 H3N2亞型犬流感病毒江蘇分離株在犬體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)感染及組織動(dòng)態(tài)分布
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑與儀器
            1.2 毒株
                1.2.1 病毒擴(kuò)增
                1.2.2 病毒純化
                1.2.3 病毒滴度測(cè)定
            1.3 菌株
            1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.5 感染試驗(yàn)
            1.6 臨床癥狀觀察與樣品采集
                1.6.1 臨床數(shù)據(jù)采集
                1.6.2 鼻腔與肛門拭子采集
                1.6.3 血樣采集
                1.6.4 剖檢與臟器樣品采集
            1.7 病毒RNA檢測(cè)
                1.7.1 RNA提取
                1.7.2 cDNA合成
                1.7.3 套式PCR檢測(cè)
                1.7.4 熒光定量PCR檢測(cè)
            1.8 組織病理學(xué)檢查與免疫組織化學(xué)
                1.8.1 組織固定
                1.8.2 組織包埋
                1.8.3 組織切片
                1.8.4 HE染色
                1.8.5 IHC染色
        2 結(jié)果
            2.1 HI試驗(yàn)
            2.2 臨床癥狀表現(xiàn)和評(píng)估
            2.3 血常規(guī)與血液生化指標(biāo)檢測(cè)
            2.4 剖檢
            2.5 病毒排出
            2.6 REAL-TIME PCR檢測(cè)組織中病毒載量
            2.7 組織病理學(xué)與免疫組織化學(xué)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
    第四章 H3N2亞型犬流感病毒江蘇分離株在雞體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)感染及組織動(dòng)態(tài)分布
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑與儀器
            1.2 毒株
            1.3 菌株
            1.4 細(xì)胞
                1.4.1 原代雞胚成纖維細(xì)胞的制備
                1.4.2 MDCK細(xì)胞
            1.5 間接免疫熒光試驗(yàn)
            1.6 實(shí)驗(yàn)感染雞
            1.7 臨床癥狀觀察與樣品采集
                1.7.1 臨床數(shù)據(jù)采集
                1.7.2 鼻腔與肛門拭子采集
                1.7.3 血樣采集
                1.7.4 剖檢與臟器樣品采集
            1.8 病毒RNA檢測(cè)
            1.9 組織病理學(xué)檢查與IHC
        2 結(jié)果
            2.1 IFA
            2.2 HI試驗(yàn)
            2.3 臨床觀察和評(píng)估
            2.4 REAL-TIME PCR檢測(cè)樣品中病毒載量
            2.5 組織病理學(xué)檢查與免疫組織化學(xué)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
全文總結(jié)
致謝



本文編號(hào):3584792

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