牛結(jié)核病是由牛分枝桿菌所引起的疾病，是一種慢性消耗性的人、畜、禽共患的嚴重傳染病。在牛結(jié)核病發(fā)現(xiàn)早期，由于缺乏預(yù)防疫苗和特異性診斷試劑，使得該病的全球性蔓延逐步升級。嚴重危害人類、家畜和野生動物的健康，造成極大的經(jīng)濟損失。正因如此，開發(fā)安全、高效疫苗及敏感性、特異性良好的診斷抗原已成為當下的研究熱點。MPB70和MPB64屬于MPB系列蛋白，是存在于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)濾液中的分泌性蛋白。二者均可以誘導較強的記憶性T細胞免疫反應(yīng)。CD4+T細胞和CD8+T細胞受到刺激并激活產(chǎn)生高水平IFN-γ。因此MPB70和MPB64是研制新型疫苗和診斷試劑的理想抗原。為增加單一抗原的抗原性，本研究將MPB70和MPB64抗原的DNA片段通過SOE-PCR原理進行融合，并將該融合基因mpb70-64克隆到pMD18-T載體上，以構(gòu)建重組質(zhì)粒pMD-mpb70-64。將該重組質(zhì)粒與表達載體pET28a（+），分別用BamHⅠ和EcoRⅠ雙酶切線性化，將純化后融合基因mpb70-64亞克隆到表達載體pET28a（+），構(gòu)建原核表達質(zhì)粒pET-mpb70-64。并將帶有pET-mpb70-64重組表達質(zhì)粒導入... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    1.1 結(jié)核病的現(xiàn)狀
    1.2 牛結(jié)核病病原史
    1.3 流行病學
    1.4 診斷技術(shù)的發(fā)展
    1.5 牛分枝桿菌的保護性抗原
    1.6 本研究的目的和意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 牛分枝桿菌 MPB70-MPB64 融合蛋白的表達及純化
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 MPB70-MPB64 在牛結(jié)核病 ELISA 檢測中的初步應(yīng)用
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果分析
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3573974