本試驗(yàn)對(duì)單寧酸（TA）介導(dǎo)的動(dòng)物腎細(xì)胞毒性的分子機(jī)制展開(kāi)研究,旨在為消減和利用飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子提供試驗(yàn)依據(jù)。采用豬腎細(xì)胞系PK-15細(xì)胞,以不同濃度[0（空白對(duì)照）、10、20、30μmol/L]TA處理PK-15細(xì)胞24 h后,測(cè)定細(xì)胞活性、乳酸脫氫酶（LDH）活性、氧化損傷指標(biāo)、線粒體膜電位（MMP）、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)量、細(xì)胞周期。結(jié)果顯示:TA劑量依賴性地降低PK-15細(xì)胞的活力。與空白對(duì)照相比,30μmol/L TA極顯著增加了培養(yǎng)基中LDH的活性（P<0.01）;極顯著升高了PK-15細(xì)胞中丙二醛（MDA）含量（P<0.01）,顯著或極顯著降低了谷胱甘肽（GSH）含量（P<0.01）以及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）（P<0.01）、超氧化物歧化酶（SOD）（P<0.01）和過(guò)氧化氫酶（CAT）（P<0.05）活性,極顯著增加了活性氧（ROS）含量（P<0.01）;極顯著降低了MMP（P<0.01）。與空白對(duì)照相比,30μmol/L TA可使Bcl-2相關(guān)的X蛋白（Bax）/B細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）（P<0.0... 

【文章來(lái)源】：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2020,32(09)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

TA對(duì)PK-15細(xì)胞的毒性作用

ROS是主要發(fā)生在氧化應(yīng)激反應(yīng)中的重要的信號(hào)分子。相反，SOD、GSH-Px和CAT是清除ROS的3種重要抗氧化酶。當(dāng)抗氧化酶活性降低時(shí)，ROS的積累會(huì)引起脂質(zhì)過(guò)氧化，主要表現(xiàn)為MDA含量的增加。通過(guò)分析不同濃度TA對(duì)MDA含量的影響（圖2-A）發(fā)現(xiàn)，隨著TA濃度的增加，MDA含量呈劑量依賴性增加，且20、30μmol/L TA處理PK-15細(xì)胞24 h后MDA含量較空白對(duì)照極顯著增加（P<0.01）。如圖2-B至圖2-E所示，高濃度（30μmol/L)TA處理PK15細(xì)胞后，GSH-Px(P<0.01）、SOD(P<0.01）和CAT活性（P<0.05）顯著或極顯著降低；如圖2-F和圖2-G所示，ROS含量與TA濃度成正比，20、30μmol/L TA處理PK-15細(xì)胞24 h后ROS含量較空白對(duì)照極顯著增加（P<0.01）。此外，與空白對(duì)照相比，10、20、30μmol/L TA處理PK-15細(xì)胞24 h后GSH含量均極顯著降低（P<0.01）。上述結(jié)果證實(shí)了TA可以誘導(dǎo)PK-15細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)。2.3 TA誘導(dǎo)MMP降低

采用PI/RNaseA染色液和流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期分析。經(jīng)30μmol/L的TA處理24 h后，PK-15細(xì)胞的S期狀態(tài)較未處理細(xì)胞顯著增加（圖5-A和圖5-B）。與空白對(duì)照相比，PK-15細(xì)胞處于S期的比例由22.15%增加到46.82%，說(shuō)明30μmol/L TA處理使PK-15細(xì)胞S期阻滯。圖4 TA對(duì)PK-15細(xì)胞線粒體通路凋亡蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同來(lái)源單寧酸替代高鋅對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 藍(lán)林誠(chéng),沈水寶,農(nóng)斯偉,伍校軍,吳克寧,韋區(qū),李修宇,郭輝.  飼料研究. 2019(07)
[2]栗樹(shù)單寧對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道形態(tài)和通透性及抗氧化性能的影響[J]. 鄧文,張世昌,蔡榮斌,任時(shí)成,周小娟.  中國(guó)飼料. 2018(01)
[3]單寧的抗?fàn)I養(yǎng)作用與去除方法的研究進(jìn)展[J]. 艾慶輝,苗又青,麥康森.  中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(Z1)
[4]單寧急性毒性及其對(duì)小鼠丙二醛和抗氧化酶的影響[J]. 秦緒軍,海春旭,何偉,梁欣,趙康濤,張曉迪,陳宏莉,劉瑞.  衛(wèi)生毒理學(xué)雜志. 2004(02)

碩士論文
[1]單寧酸提高保育豬生產(chǎn)性能及其機(jī)制研究[D]. 胡愛(ài)國(guó).福建農(nóng)林大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3573629