本研究所選定的兩個候選基因豬磷酸葡萄糖變位酶1（Phosphoglucomutase 1, PGM1）和豬尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2（UDP-glucose pyrophosphorylase 2, UGP2）基因的功能是第一次在豬上進(jìn)行鑒定和檢驗。豬PGM1基因和豬UGP2基因的具體功能和表達(dá)分布在豬上都還沒有相關(guān)的研究報道。通過不同發(fā)育時期豬骨骼肌芯片的聚類分析,篩選獲得大量影響胴體和肉質(zhì)性狀的基因,其中包括豬PGM1基因和豬UGP2基因等。同時,豬PGM1基因在蛋白表達(dá)篩選中具有表現(xiàn)出顯著差異,并且豬UGP2基因所編碼蛋白是參與糖代謝的一個的酶,豬PGMl基因和豬UGP2基因的功能研究,到目前為止還沒有詳細(xì)的報道。本文從發(fā)掘新的候選基因出發(fā),以期尋找到影響肉質(zhì)品質(zhì)的關(guān)鍵基因,改善肉質(zhì)品質(zhì)。本研究從大白豬和梅山豬中提取的核酸樣品,利用實時定量RT-PCR技術(shù)分析了豬PGMl基因和豬UGP2基因在豬肌肉組織中的表達(dá)分布,以及骨骼肌不同發(fā)育階段的分布規(guī)律,分離鑒定了兩個基因啟動子核心區(qū)域,初步掌握了其與肌肉形成發(fā)育之問的關(guān)系,其結(jié)果如下：1.利用生物信息學(xué)方法,獲得豬PGM1基因mR... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１豬尸Ｇ＇Ｍ／基因的開放閱讀框預(yù)湖??．?－?ｅｎ?ｒｅａｉｎｆｒａｍｅ?ｏｆｏｒｃｎ????

該基因所編碼蛋白在體外哺乳動物網(wǎng)狀細(xì)胞的半衰期為３０ｈ，不穩(wěn)定系數(shù)為??３４．２７，表明該蛋白為典型的穩(wěn)定性蛋白，定位在胞質(zhì)膜上，不存在信號狀位點，為??親水性蛋白，如圖２－２所示。??Ｐｒ－ｏ＾Ｓｅ＊?１?？?ｅｕ＇ｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕ？＊ｒ－?？？ｑｕ＊ｎｏ＊??１?■?丫－?Ｈｐｈｏｂ．?／?％?Ｐｏｏｌｔｔｔｆ＊?—??！，?，??百－?－?－?－?－?ｊ??－?－．?－?－—?Ｉ?Ｉ?－?ｊ?■??＊．］ＩＷ曜?ｔ??Ｉ??－，?＾＾?＾??Ｐｏｉｉ？１?ｏｎ??圖２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ疏水性圖Ｘ軸表示気基酸的位置，Ｙ軸表示疏水性值??豬ＰＧＭ１蛋白的疏水性圖??Ｆｉｇ．?２－２?Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ．?Ｘ?ａｘｉｓ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｌｏｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ，?Ｙ?ａｘｉｓ??ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｖａｌｕｅ?ｏｆ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ．??Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ?ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ＰＧＭｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ，??Ｇ州Ｂａｎｋ數(shù)拋庫中己有的ＰＧＭ／基因ｍＲＮＡ序列：人（Ｈｏｍｏ?ｓａｐｉｅｎｓ，??ＮＭ＿００１１７２８１８．１）

馬及大腦皮層，共１２個組織的總ＲＮＡ。??利用提�。裕颍椋铮�?Ｒｅａｇｅｎｔ試劑盒提取組織的總ＲＮＡ，凝膠電泳檢測總ＲＮＡ的完??整性的結(jié)果如圖２￣４所示，從電泳圖可Ｗ看出，總ＲＮＡ的完整性達(dá)到后續(xù)的試驗要??求。同時，用分光光度計測定所提取總ＲＮＡ的分光光度值，檢測提�。遥危恋募兌�，??后續(xù)的試驗要求所提取民ＮＡ的分光光度值須在１．８？２．０么間。不滿足要求樣品均重??新提取，直到滿足要求，所提取的總ＲＮＡ的純度均符合后續(xù)試驗耍求。??Ｗｙｆｆ－ｃｉｃ／ｍ為內(nèi)參基因檢測反轉(zhuǎn)錄合成ｃＤＮＡ第一條鏈質(zhì)量，擴(kuò)増后得到產(chǎn)物約??為１５８?ｂｐ。檢測結(jié)果如圖２－５所示。各個樣品均保持較高純度，滿足試驗要求。??Ｍ??１８Ｓ??圖２－４總ＲＮＡ的凝膠電泳檢測結(jié)果??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??Ｆｉｇ．?２－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００．??！．??ｒ??ｈ??ｉ??ｉ??ｒ??ｔ??ｒ??；ｉ‘??３６??

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號：3564275