為了探究穿心蓮內(nèi)酯對豬鏈球菌生物被膜形成的抑制作用及其相關(guān)機制,試驗選取豬鏈球菌2型,利用蓋玻片碎片法建立體外生物被膜模型,結(jié)晶紫染色（CV）和掃描電鏡（SEM）檢測豬鏈球菌生物被膜。采用細胞培養(yǎng)板體外培養(yǎng)豬鏈球菌,在96孔板內(nèi)采用二倍稀釋法測定穿心蓮內(nèi)酯對豬鏈球菌的最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）。革蘭氏陰性菌和陽性菌中普遍存在一種密度感應(yīng)系統(tǒng)被稱為LuxS/AI-2型密度感應(yīng)系統(tǒng),這種系統(tǒng)可以產(chǎn)生一種信號誘導(dǎo)分子被用來進行細菌種間的交流,此種信號分子在多種生理功能中都起到了重要的作用;運用哈維弧菌生物發(fā)光法對AI-2信號分子進行測定;通過qPCR檢測密度感應(yīng)系統(tǒng)（QS系統(tǒng)）中相關(guān)基因lasR和rhlR,以及調(diào)節(jié)基因pvdQ和毒力基因gapdh,sly,fbps,ef,gdh,mrp,cps2J,luxS的mRNA水平差異。結(jié)果:（1）結(jié)晶紫染色結(jié)果顯示:穿心蓮內(nèi)酯在亞抑菌濃度下（1/2 MIC,1/4 MIC,1/8MIC）能使細菌生物被膜形成量減少,并呈劑量依賴性,掃描電鏡觀察可見陰性對照組細菌鑲嵌于生物被膜中,這與結(jié)晶紫染色結(jié)果一致;（2）穿心蓮內(nèi)酯對豬鏈球菌的M... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

生物被膜的形成的三個階段：最初黏附，成熟和最后分散Fig.1-1Threephasesofbiofilmdevelopment:initialattachment,maturation,andfinal

圖 1-2 鏈球菌 QS 系統(tǒng)調(diào)節(jié)示意圖Fig. 1-2 Schematic of Streptococcus QS system adjustment良好的生物被膜形成能力和清晰的群體傳感系統(tǒng)。因此，它已成系統(tǒng)的主要模式。肺炎鏈球菌的菌群傳感系統(tǒng)是一種編碼 44 種 com CDE operon。由剪切作用激活的 17 個氨基酸肽被稱為有效信群體感應(yīng)信號[94]，CSP 可以通過 ABC 基因編碼的 ABC 轉(zhuǎn)運體釋種跨膜蛋白，有 440 個氨基酸，其中 N-末端含有一個大約 200 個SP 的 c 端，包含約 240 個氨基酸，是 CSP 激活的 Com D 組氨酸激氨酸激酶反應(yīng)的調(diào)控[96]。CSP 最初被認為與肺炎鏈球菌的形成有步研究，發(fā)現(xiàn) CSP 可以介導(dǎo)生物被膜在高濃度細菌中的形成。研物被膜形成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)中起著關(guān)鍵作用[97]。變異鏈球菌是缺失 菌生物被膜形成能力的降低和生物被膜結(jié)構(gòu)的改變。然而，CSP現(xiàn)在細胞外游離 DNA 和細菌釋放的胞外多糖的調(diào)控上[98]。革蘭肽（AI）作為誘導(dǎo)分子的信號因子。這個信號分子通過釋放不同當信號因子在一定程度上積累，細菌細胞膜上的信號識別因子開的多肽識別[99]。不同細菌分泌的小多肽分子大小明顯不同。由于過細菌的細胞壁，所以它們需要通過 ABC 傳輸系統(tǒng)，atp-bin 磁帶

圖 1-3 穿心蓮內(nèi)酯的分子結(jié)構(gòu)圖Fig. 1-3 The chemical structure of Andrographolide囊有益，可增加肝重量，縮短環(huán)己巴比妥鈉誘導(dǎo)的糖胺和乙酰苯酚引起的肝毒性。據(jù)報道，穿心蓮的的死亡[108]。對 W256 移植瘤有一定的抑制作用[109]。采用脫水穿大、中、低劑量的脫氫穿心蓮能抑制腫瘤細胞，隨果確實穩(wěn)定[110]。體外實驗表明，穿心蓮能抑制體外注射液有明顯鎮(zhèn)靜作用，可以縮短戊巴比妥鈉對小戊巴比妥鈉的閾值誘導(dǎo)麻醉[112]。穿心蓮內(nèi)酯可增加素可導(dǎo)致幼齡小鼠胸腺萎縮[113]。

【參考文獻】：
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本文編號：3564303