從受精卵開始到胚胎發(fā)育形成囊胚,沒有與母體建立聯(lián)系的過程,稱為植入前胚胎發(fā)育。胚胎未形成時,基因就已經(jīng)開始表達(dá),且受到多種網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控,例如發(fā)生組蛋白修飾、DNA甲基化、泛素化、磷酸化等各種相關(guān)的表觀修飾作用�；蛟谵D(zhuǎn)錄后期,翻譯過程中也會受到不同的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控,如MicroRNA作用和細(xì)胞自噬等。DNA甲基化是調(diào)控細(xì)胞分化、重編程和發(fā)病機(jī)制的核心表觀遺傳事件。DNA去甲基化,發(fā)生在植入前胚胎和原始生殖細(xì)胞中。最近的研究表明,Tet3調(diào)節(jié)的5甲基胞嘧啶（5mC）氧化是導(dǎo)致基因組DNA甲基化廣泛缺失的主要原因,但這一過程在牛植入前胚胎中的機(jī)制尚不清楚。因此,本實(shí)驗(yàn)選取牛為研究對象,利用分離DNA的亞硫酸鹽處理試驗(yàn)、熒光定量PCR、免疫熒光染色及小RNA干擾（RNAi）等技術(shù)探索Tet3基因在牛早期植入前胚胎中的表達(dá)情況及其對早期植入前胚胎發(fā)育的影響,為Tet3基因在牛這一物種中的功能研究提供基礎(chǔ),同時也為此基因在其他物種中的研究提供方向。本實(shí)驗(yàn)主要結(jié)果如下:1、利用熒光定量qPCR的方法檢測Tet家族基因在牛MII卵母細(xì)胞和體外受精（IVF）2細(xì)胞、4細(xì)胞、8細(xì)胞及囊胚各階段的表達(dá)情況。結(jié)果顯... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Tet基因家族凝膠電泳

M.DL2000Marker；1.Tet1；2.Tet2；3.Tet3。圖 1.1 Tet 基因家族凝膠電泳Fig.1.1 Gel electrophoresis Tet gene family 家族在牛早期胚胎中的動態(tài)變化采用熒光定量 PCR 技術(shù)對牛卵母細(xì)胞、體外受精 2 細(xì)胞、4胚階段胚胎的 Tet 基因家族進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，Tet3 在牛卵前胚胎中的表達(dá)量明顯高于 Tet1 和 Tet2（圖 1.2）。在整個牛中 Tet3 表達(dá)水平逐漸升高，直到 8 細(xì)胞階段，然后在囊胚期）。

注：紅色為 TET3 蛋白熒光染色，藍(lán)色為細(xì)胞核 DAPI 染圖 1.4 牛早期胚胎中 TET3 的表達(dá)Fig 1.4 Expression of TET3 in early bovine embryosThe DNA(blue) was stained with DAPI

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞技術(shù)的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景[J]. 閆益波,張艷麗,齊巍巍,萬永杰,樊懿萱,王鋒.  遺傳. 2011(04)



本文編號：3544370