副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis, HPS）是正常豬群上呼吸道的一種常見(jiàn)的共生菌,但在特定的條件下可以侵入機(jī)體,并引發(fā)以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎等為主要特征的疾病,該病又被稱為革拉瑟氏�。℅lasser’s disease）。最近副豬嗜血桿菌病已經(jīng)成為豬場(chǎng)保育仔豬死亡的一個(gè)主要原因,但是引起其致病的原因仍然還不是很清楚。HPS常在健康豬的鼻腔、扁桃體、氣管中分離到,因此區(qū)分出正常棲生菌株與致病性菌株是確診該病的關(guān)鍵所在。毒力因子是區(qū)分致病與非致病菌株的重要標(biāo)志物,目前,副豬嗜血桿菌的毒力因子尚未被闡明。蛋白質(zhì)是生命體發(fā)揮生物學(xué)功能的真正載體,因此在蛋白質(zhì)水平研究副豬嗜血桿菌的毒力因子將為建立區(qū)分致病性生菌株和非致病性菌株的鑒別診斷方法及致病機(jī)理提供了新的線索。本研究針對(duì)副豬嗜血桿菌臨床分離株血清13型14A7-2和血清不定型20A3-2開(kāi)展差異蛋白研究。根據(jù)其引起的臨床癥狀、潛在毒力基因檢測(cè)和動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,確定14A7-2和20A3-2菌株分別為毒力菌株和非毒力菌株。提取14A7-2菌株和20A3-2菌株的菌體蛋白,優(yōu)化HPS菌體蛋白雙向電泳條件... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
上篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 副豬嗜血桿菌研究進(jìn)展
        1 生物學(xué)特性
        2 流行病學(xué)
        3 致病機(jī)理
        4 毒力因子
            4.1 血清型與毒力
            4.2 外膜蛋白(Outer Membrane Protein,OMP)
            4.3 脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)
            4.4 三聚自身轉(zhuǎn)運(yùn)子(virulence-associated trimeric autotransporters,VtaA)
            4.5 神經(jīng)氨酸酶(Neuramidinase,NA)
            4.6 莢膜多糖(CPS)
            4.7 其它毒力因子
        5 診斷
        參考文獻(xiàn)
    第二章 蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展
        1 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)
            1.1 雙向電泳技術(shù)
            1.2 質(zhì)譜技術(shù)
            1.3 生物信息學(xué)分析
        2 比較蛋白質(zhì)組學(xué)在細(xì)菌學(xué)研究中的應(yīng)用
            2.1 比較蛋白質(zhì)組學(xué)
            2.2 比較蛋白質(zhì)組學(xué)在細(xì)菌學(xué)研究中的應(yīng)用
        3 蛋白質(zhì)組學(xué)在副豬嗜血桿菌上的應(yīng)用
        4 總結(jié)與展望
        參考文獻(xiàn)
下篇 研究?jī)?nèi)容
    第三章 副豬嗜血桿菌菌體蛋白雙向電泳圖譜的建立及分析
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 試驗(yàn)方法
        2 結(jié)果
            2.1 14A7-2和20A3-2菌株的生長(zhǎng)曲線
            2.2 菌株毒力的鑒定
            2.3 菌體蛋白濃度測(cè)定的結(jié)果
            2.4 副豬嗜血桿菌毒力菌株14A7-2與非毒力菌株20A3-2 2-DE圖譜及分析
            2.5 差異蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果
        3 討論
            3.1 蛋白樣品的制備
            3.2 IPG膠條的長(zhǎng)度
            3.3 IPG膠條的pH范圍
            3.4 蛋白樣品的上樣量
            3.5 染色方法
            3.6 質(zhì)譜鑒定和分析的差異蛋白質(zhì)
        參考文獻(xiàn)
    第四章 副豬嗜血桿菌主要差異蛋白點(diǎn)的驗(yàn)證
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 試驗(yàn)方法
        2 結(jié)果
            2.1 furp、q和abc基因的克隆
            2.2 序列測(cè)定結(jié)果
            2.3 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
            2.4 重組蛋白的純化
            2.5 免疫血清的效價(jià)
            2.6 菌體蛋白的免疫印跡
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]副豬嗜血桿菌ompP2基因的結(jié)構(gòu)特征及其與毒力的聯(lián)系[J]. 趙倩,湯承,楊發(fā)龍,邵國(guó)青,岳華.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2010(06)
[2]ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制[J]. 王華丙,張振義,包銳,陳宇星.  生命的化學(xué). 2007(03)
[3]副豬嗜血桿菌病研究進(jìn)展[J]. 華升,梅書棋,曾德芳,徐滌平,李勇.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(11)
[4]雙向電泳-質(zhì)譜技術(shù)篩選肝癌血清標(biāo)記物[J]. 馮鉅濤,劉銀坤,MOHAMAD RADWAN ALMOFTI,代智,周海君,宋海燕,陸豪杰,湯釗猷.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(07)
[5]差異蛋白質(zhì)組學(xué)及其應(yīng)用[J]. 何大澄,肖雪媛.  北京師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2002(04)

碩士論文
[1]副豬嗜血桿菌的分離鑒定及其在模擬體內(nèi)發(fā)病條件下培養(yǎng)的蛋白組學(xué)研究[D]. 楊顯超.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]副豬嗜血桿菌外膜蛋白圖譜的建立及D15免疫原性鑒定[D]. 郭一.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]副豬嗜血桿菌體內(nèi)誘導(dǎo)抗原的研究及真核表達(dá)文庫(kù)的構(gòu)建[D]. 陳鑫.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[4]SCOTS技術(shù)的建立及在副豬嗜血桿菌功能基因篩選中的應(yīng)用[D]. 胡軍勇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3544236