為研究microRNA-124-3p（miR-124-3p）對(duì)H1N1亞型豬流感病毒（swine influenza virus,SIV）感染小鼠所致肺損傷的調(diào)控作用,本試驗(yàn)構(gòu)建miR-124-3p腺病毒表達(dá)載體,通過(guò)小鼠尾部靜脈注射法構(gòu)建miR-124-3p差異表達(dá)小鼠模型,試驗(yàn)分3組:過(guò)表達(dá)組、抑制組和對(duì)照組。48 h后,各組小鼠鼻腔接種H1N1亞型SIV,每只10⁵ EID₅₀（50μL）。連續(xù)觀察14 d,計(jì)算小鼠平均體重變化率、觀察病理切片并測(cè)定相關(guān)炎癥因子IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果顯示,已成功將pre-miR序列及其sponge序列插入腺病毒的穿梭質(zhì)粒,并將其共轉(zhuǎn)染293A細(xì)胞。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)證實(shí),與對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)組和抑制組小鼠黑色素瘤細(xì)胞miR-124-3p表達(dá)水平分別極顯著升高（P<0.01）和顯著降低（P<0.05）,表明成功構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體。過(guò)表達(dá)組、抑制組和對(duì)照組小鼠體重變化率分別為-5.5%、-12.4%和-8.6%。抑制組和對(duì)照組均可見(jiàn)肺泡壁增厚,其間有多量淋... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2020,47(10)北大核心

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【部分圖文】：

穿梭質(zhì)粒雙酶切鑒定電泳圖

將擴(kuò)增的腺病毒載體感染小鼠黑色素瘤細(xì)胞培養(yǎng)72 h后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,與miR-124-3p對(duì)照組相比,miR-124-3p-over可極顯著提高小鼠黑色素瘤細(xì)胞中miR-124-3p相對(duì)表達(dá)量(P<0.01);miR-124-3p-sponge可顯著抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞中miR-124-3p相對(duì)表達(dá)量(P<0.05)(圖3)。圖3 腺病毒表達(dá)載體感染小鼠黑色素瘤細(xì)胞72 h后miR-124-3p相對(duì)表達(dá)量

腺病毒表達(dá)載體感染小鼠黑色素瘤細(xì)胞72 h后miR-124-3p相對(duì)表達(dá)量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3544096