山羊奶豐富的脂肪酸成分賦予其獨特的營養(yǎng)價值,其中多不飽和脂肪酸具有預防心血管疾病和提高機體免疫力等功能,對人體具有重要的生理意義。脂肪酸去飽和酶2（Fatty acid desaturation 2）作為多不飽和脂肪酸如花生四烯酸（AA）和二十二碳六烯酸（DHA）等合成過程中的限速酶,可以在脂肪酸鏈的第6、7位將其底物脫氫形成雙鍵。因此,研究FADS2基因功能及轉錄調控機理對于羊奶多不飽和酸脂肪酸代謝具有重要的理論意義和實踐指導意義。本研究以奶山羊（Capra hircus）原代乳腺上皮細胞為材料,利用PCR技術克隆得到奶山羊FADS2基因序列,并進行生物信息學分析;利用腺病毒介導的過表達技術和si-RNA介導的干擾技術研究奶山羊FADS2基因對山羊乳腺脂肪酸代謝的影響;克隆FADS2基因的5’側翼序列,并進行生物信息學分析;通過缺失突變方法確定FADS2啟動子的活性區(qū)域,同時突變活性區(qū)域的重要元件初步探究FADS2基因的轉錄調控機理。本研究主要結果如下:1.成功克隆得到FADS2基因（登錄號為MK292654）的CDS區(qū)1 335 bp,編碼444個氨基酸,與綿羊（Ovis arie... 

【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PUFAs合成途徑(GuillouHetal.2010)

PUFAs 對于人類身體健康具有重要的生理作用，并且山羊奶中含有豐富的多不飽和脂肪酸，因此，研究山羊乳 PUFAs 的合成代謝具有重要的意義。圖1-2 ω-6 和ω-3多不飽和脂肪酸脂質介質產物的代謝途徑(Wang DDubois R N 2010)Figure1-2 Metabolic pathways of lipid products of 3 ω-6 and ω-3 PUFAs1.2.1 ω-3 PUFAs 的功能ω-3 PUFAs 包括 α 亞麻酸[ALA(18:3 9,12,15)]、十八碳四烯酸[SDA (18:4 6,9,12,15)]、二十碳五烯酸[EPA(20:5 5,8,11,14,17)]及二十二碳六烯酸[DHA(22:6 4,7,10,13,16,19)]等，其中DHA 是 ω-3 PUFAs 最主要的組成成分，對于多種代謝疾病具有重要的調控作用。心血管疾�。–VD）是全世界發(fā)病率和死亡率最高的慢性非傳染性疾病，ω-3PUFAs 對 CVD 的積極影響被認為是由多種機制介導的，包括改變細胞膜的理化性質、跨膜通道和蛋白質的直接相互作用(Turk H FChapkin R S 2013)，也可以通過核受體和轉錄因子調節(jié)基因表達、改變二十類烷酸組成以及將ω-3 PUFA 轉化為具有生物活性的代謝物等，進而預防心律失常、血小板凝聚、動脈炎癥反應；降低血液中甘油三酯水平，降低血壓和改善血管松弛等(Serini S et al. 2017)。ω-3 PUFAs

由于前列腺素 D2、E2 和 I2 存在于睪丸和附睪中，AA 與雄性生殖具有密切(Sorrentino C et al. 1998)。Safarinejad 等人發(fā)現(xiàn)不育男性血清和精子中 AA/DH顯高于正常男性(Safarinejad M R et al. 2010)，但是 AA 在精子獲能和頂體反應要的作用，其中富含 AA 的番茄紅素可以改善不育男性精漿中 AA/DHA 比例功妊娠的可能性(Radka F et al. 2015)。同時 AA 以磷脂形式構成神經細胞膜的，表明 AA 對大腦發(fā)育是不可缺少的，在細胞分裂和信號傳導中起著重要的tsuki HOkuda S 1995)。因此，保持體內一定水平的 AA，對于生殖健康和大腦重要的作用，但是當機體中富集大量 AA 時會導致機體肥胖和誘發(fā)炎癥。 脂肪酸去飽和酶的研究進展脂肪酸去飽和酶家族（Fatty acid desaturation family）可以在長鏈脂肪酸�；ㄎ恢靡腚p鍵，從而影響脂肪酸本身的生物學特性和產生新的物質。FADSFADS1、FADS2和FADS3基因，這三個亞型位于人類11號染色體的同一區(qū)域，度同源性(Marquardt A et al. 2000)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]山羊INSIG1基因超表達對乳腺上皮細胞中脂質合成的影響[J]. 王苗,羅軍,許會芬,朱江江,赫秋亞,姚大為,史懷平.  畜牧獸醫(yī)學報. 2016(09)
[2]奶山羊ELOVL6基因啟動子的克隆及活性區(qū)域分析[J]. 赫秋亞,羅軍,姚大為,趙博,王苗,許會芬,王會,史懷平.  農業(yè)生物技術學報. 2016(06)
[3]深黃被孢霉M6-22 Δ6-脂肪酸脫氫酶基因在釀酒酵母中的表達[J]. 劉莉,李明春,胡國武,張麗,邢來君.  微生物學報. 2001(04)

博士論文
[1]SREBP-1基因對山羊乳腺上皮細胞脂肪酸代謝的調控作用研究[D]. 許會芬.西北農林科技大學 2016

碩士論文
[1]過表達與干擾LXRβ基因對奶山羊乳腺上皮細胞脂質代謝的影響[D]. 張倡琿.西北農林科技大學 2017
[2]奶山羊脂肪酸合酶基因乙酰/丙二酸單酰轉移酶區(qū)域的過表達研究[D]. 朱江江.西北農林科技大學 2011



本文編號：3533961