山羊奶豐富的脂肪酸成分賦予其獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,其中多不飽和脂肪酸具有預(yù)防心血管疾病和提高機(jī)體免疫力等功能,對(duì)人體具有重要的生理意義。脂肪酸去飽和酶2（Fatty acid desaturation 2）作為多不飽和脂肪酸如花生四烯酸（AA）和二十二碳六烯酸（DHA）等合成過程中的限速酶,可以在脂肪酸鏈的第6、7位將其底物脫氫形成雙鍵。因此,研究FADS2基因功能及轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)理對(duì)于羊奶多不飽和酸脂肪酸代謝具有重要的理論意義和實(shí)踐指導(dǎo)意義。本研究以奶山羊（Capra hircus）原代乳腺上皮細(xì)胞為材料,利用PCR技術(shù)克隆得到奶山羊FADS2基因序列,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析;利用腺病毒介導(dǎo)的過表達(dá)技術(shù)和si-RNA介導(dǎo)的干擾技術(shù)研究奶山羊FADS2基因?qū)ι窖蛉橄僦舅岽x的影響;克隆FADS2基因的5’側(cè)翼序列,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析;通過缺失突變方法確定FADS2啟動(dòng)子的活性區(qū)域,同時(shí)突變活性區(qū)域的重要元件初步探究FADS2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)理。本研究主要結(jié)果如下:1.成功克隆得到FADS2基因（登錄號(hào)為MK292654）的CDS區(qū)1 335 bp,編碼444個(gè)氨基酸,與綿羊（Ovis arie... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PUFAs合成途徑(GuillouHetal.2010)

PUFAs 對(duì)于人類身體健康具有重要的生理作用，并且山羊奶中含有豐富的多不飽和脂肪酸，因此，研究山羊乳 PUFAs 的合成代謝具有重要的意義。圖1-2 ω-6 和ω-3多不飽和脂肪酸脂質(zhì)介質(zhì)產(chǎn)物的代謝途徑(Wang DDubois R N 2010)Figure1-2 Metabolic pathways of lipid products of 3 ω-6 and ω-3 PUFAs1.2.1 ω-3 PUFAs 的功能ω-3 PUFAs 包括 α 亞麻酸[ALA(18:3 9,12,15)]、十八碳四烯酸[SDA (18:4 6,9,12,15)]、二十碳五烯酸[EPA(20:5 5,8,11,14,17)]及二十二碳六烯酸[DHA(22:6 4,7,10,13,16,19)]等，其中DHA 是 ω-3 PUFAs 最主要的組成成分，對(duì)于多種代謝疾病具有重要的調(diào)控作用。心血管疾病（CVD）是全世界發(fā)病率和死亡率最高的慢性非傳染性疾病，ω-3PUFAs 對(duì) CVD 的積極影響被認(rèn)為是由多種機(jī)制介導(dǎo)的，包括改變細(xì)胞膜的理化性質(zhì)、跨膜通道和蛋白質(zhì)的直接相互作用(Turk H FChapkin R S 2013)，也可以通過核受體和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)基因表達(dá)、改變二十類烷酸組成以及將ω-3 PUFA 轉(zhuǎn)化為具有生物活性的代謝物等，進(jìn)而預(yù)防心律失常、血小板凝聚、動(dòng)脈炎癥反應(yīng)；降低血液中甘油三酯水平，降低血壓和改善血管松弛等(Serini S et al. 2017)。ω-3 PUFAs

由于前列腺素 D2、E2 和 I2 存在于睪丸和附睪中，AA 與雄性生殖具有密切(Sorrentino C et al. 1998)。Safarinejad 等人發(fā)現(xiàn)不育男性血清和精子中 AA/DH顯高于正常男性(Safarinejad M R et al. 2010)，但是 AA 在精子獲能和頂體反應(yīng)要的作用，其中富含 AA 的番茄紅素可以改善不育男性精漿中 AA/DHA 比例功妊娠的可能性(Radka F et al. 2015)。同時(shí) AA 以磷脂形式構(gòu)成神經(jīng)細(xì)胞膜的，表明 AA 對(duì)大腦發(fā)育是不可缺少的，在細(xì)胞分裂和信號(hào)傳導(dǎo)中起著重要的tsuki HOkuda S 1995)。因此，保持體內(nèi)一定水平的 AA，對(duì)于生殖健康和大腦重要的作用，但是當(dāng)機(jī)體中富集大量 AA 時(shí)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體肥胖和誘發(fā)炎癥。 脂肪酸去飽和酶的研究進(jìn)展脂肪酸去飽和酶家族（Fatty acid desaturation family）可以在長(zhǎng)鏈脂肪酸�；ㄎ恢靡腚p鍵，從而影響脂肪酸本身的生物學(xué)特性和產(chǎn)生新的物質(zhì)。FADSFADS1、FADS2和FADS3基因，這三個(gè)亞型位于人類11號(hào)染色體的同一區(qū)域，度同源性(Marquardt A et al. 2000)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]山羊INSIG1基因超表達(dá)對(duì)乳腺上皮細(xì)胞中脂質(zhì)合成的影響[J]. 王苗,羅軍,許會(huì)芬,朱江江,赫秋亞,姚大為,史懷平.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2016(09)
[2]奶山羊ELOVL6基因啟動(dòng)子的克隆及活性區(qū)域分析[J]. 赫秋亞,羅軍,姚大為,趙博,王苗,許會(huì)芬,王會(huì),史懷平.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]深黃被孢霉M6-22 Δ6-脂肪酸脫氫酶基因在釀酒酵母中的表達(dá)[J]. 劉莉,李明春,胡國(guó)武,張麗,邢來君.  微生物學(xué)報(bào). 2001(04)

博士論文
[1]SREBP-1基因?qū)ι窖蛉橄偕掀ぜ?xì)胞脂肪酸代謝的調(diào)控作用研究[D]. 許會(huì)芬.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016

碩士論文
[1]過表達(dá)與干擾LXRβ基因?qū)δ躺窖蛉橄偕掀ぜ?xì)胞脂質(zhì)代謝的影響[D]. 張倡琿.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]奶山羊脂肪酸合酶基因乙酰/丙二酸單酰轉(zhuǎn)移酶區(qū)域的過表達(dá)研究[D]. 朱江江.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3533961