發(fā)布時(shí)間：2021-12-09 03:55

　　氟中毒是一種地球化學(xué)性疾病,氟能夠通過血腦屏障對(duì)大腦產(chǎn)生毒害作用,造成中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能障礙。近年來,高氟損傷機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)的研究已經(jīng)成為氟中毒研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)氟中毒可以降低子代大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,大腦皮質(zhì)和海馬結(jié)構(gòu)損傷,出現(xiàn)病理學(xué)改變,神經(jīng)細(xì)胞凋亡率升高,DNA損傷嚴(yán)重等現(xiàn)象。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)的成功為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究提供了很好的細(xì)胞模型,神經(jīng)細(xì)胞也廣泛應(yīng)用于神經(jīng)細(xì)胞毒性效應(yīng)和神經(jīng)毒性作用機(jī)制的研究。為了進(jìn)一步豐富氟中毒理論,本試驗(yàn)以體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞為研究對(duì)象,采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5個(gè)不同濃度的氟化鈉(NaF)進(jìn)行細(xì)胞攻毒試驗(yàn),研究不同濃度氟化鈉對(duì)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活性、細(xì)胞骨架及細(xì)胞內(nèi)微管相關(guān)蛋白MAP2表達(dá)的影響。 本試驗(yàn)應(yīng)用新生3天以內(nèi)的SD乳鼠作為試驗(yàn)材料,無菌分離大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞,以DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng),待4h細(xì)胞貼壁后更換為無血清培養(yǎng)基Neurobasal,第3d半量換液,建立穩(wěn)定的SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)體系。神經(jīng)細(xì)胞于培養(yǎng)第7天采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5個(gè)不同濃度的...

【文章來源】： 河南科技學(xué)院河南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 前言
    2 氟能通過血-腦屏障
    3 高氟對(duì)智商的影響
    4 高氟對(duì)行為的影響
    5 高氟對(duì)動(dòng)物腦重的影響
    6 氟對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的直接損傷
        6.1 氟對(duì)大腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)、受體及蛋白的影響
        6.2 氟對(duì)中樞神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)的影響
        6.3 氟對(duì)大腦氧化代謝的影響
    7 氟中毒與細(xì)胞骨架的研究情況
    8 體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的應(yīng)用
第二章 SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的的原代培養(yǎng)
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 相關(guān)試驗(yàn)試劑
        1.3 主要試劑的配制
        1.4 主要儀器設(shè)備
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 試驗(yàn)相關(guān)材料準(zhǔn)備
        2.2 SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3 SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的尼氏染色(Nissl's staining)鑒定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 原代培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞不同時(shí)期的形態(tài)觀察
        3.2 原代培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞尼氏染色(Nissl's staining)鑒定
    4 討論
        4.1 神經(jīng)細(xì)胞的原代培養(yǎng)及意義
        4.2 大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的改進(jìn)
        4.3 大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞Nissl's染色的特異性
    5 小結(jié)
第三章 高氟對(duì)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活性及細(xì)胞骨架的影響
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 相關(guān)試驗(yàn)試劑
        1.3 主要試驗(yàn)試劑的配制
        1.4 主要試驗(yàn)儀器設(shè)備
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 光學(xué)顯微鏡觀察高氟致神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)變化
        2.2 掃描電鏡觀察氟致神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)變化
        2.3 透射電鏡觀察氟致神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化
        2.4 MTT比色法檢測(cè)高氟對(duì)大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞活性的影響
        2.5 高氟對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞骨架的影響
        2.6 免疫熒光方法檢測(cè)高氟對(duì)神經(jīng)細(xì)胞微管相關(guān)蛋白MAP2的影響
    3 結(jié)果與分析
        3.1 光學(xué)顯微鏡觀察氟致神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)變化
        3.2 掃描電鏡觀察氟致神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)變化
        3.3 透射電鏡觀察氟致神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)變化
        3.4 高氟對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞活性的影響
        3.5 高氟對(duì)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞骨架的影響
        3.6 高氟對(duì)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)微管相關(guān)蛋白MAP2表達(dá)的影響
    4 討論
        4.1 氟中毒對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毒性影響
        4.2 高氟對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)損傷
        4.3 MTT比色法測(cè)定高氟對(duì)神經(jīng)細(xì)胞活性的影響
        4.4 高氟對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞骨架及細(xì)胞內(nèi)MAP2表達(dá)的影響
    5 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]新生大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及其鑒定 [J]. 宋海巖,王志勇,李娜娜.  實(shí)用兒科臨床雜志. 2012(02)
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[6]大鼠海馬中氟濃度與膽堿酯酶活力的關(guān)系 [J]. 翟金霞,郭智勇,胡傳來,王取南,朱啟星.  中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 2003(02)
[7]氟對(duì)大鼠腦細(xì)胞DNA的損傷及誘導(dǎo)凋亡的作用 [J]. 陳軍,陳學(xué)敏,楊克敵,夏濤,謝虹.  中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2002(04)
[8]大鼠慢性氟中毒神經(jīng)細(xì)胞病理改變的研究 [J]. 呂曉紅,李廣生,呂曉麗.  中國(guó)地方病學(xué)雜志. 2001(06)
[9]飲高氟水小鼠腦海馬回組織超微結(jié)構(gòu)觀察 [J]. 孫增榮,劉風(fēng)貞,楊海賢,白景文,于德奎,呂嚴(yán),吳麗娜.  中國(guó)地方病學(xué)雜志. 2000(05)
[10]高氟區(qū)4～7歲兒童智商調(diào)查研究 [J]. 王國(guó)建,楊德龍,賈風(fēng)格,王惠琴.  地方病通報(bào). 1996(01)



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