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重組羊類泛素ISG15蛋白對盤羊雜交羊感染綿羊肺炎支原體免疫調(diào)節(jié)及治療效果的研究

發(fā)布時間:2021-11-06 09:02
  目的:本實驗以感染綿羊肺炎支原體的綿羊為動物疾病模型,使用重組的類泛素ISG15蛋白治療感染綿羊肺炎支原體的盤羊雜交羊,然后用熒光定量PCR與ELISA的方法,測定各種細(xì)胞因子的表達(dá)變化,分析ISG15蛋白的先天性免疫調(diào)節(jié)和治療作用。方法:(1)將凍存的綿羊肺炎支原體分離株增殖培養(yǎng),測定菌液濃度并稀釋到人工感染的濃度,然后將18只盤羊雜交羊隨機分為A、B、C三個組,6只巴什拜羊為D組,全部氣管內(nèi)注射綿羊肺炎支原體,每天觀察臨床癥狀并檢測體溫,兩周后,用無菌咽拭子隨機采取各組試驗羊的鼻腔分泌物,進行綿羊肺炎支原體培養(yǎng)與生化鑒定,檢測動物人工感染情況。(2)在試驗的第五天(5d),將人工感染綿羊肺炎支原體的羊使用純化的蛋白對其治療,其中A組和D組每天注射生理鹽水;B組使用盤羊雜交羊的重組ISG15蛋白治療,200μg/只·天,C組使用巴什拜羊的重組ISG15蛋白治療,200μg/只·天,每天觀察臨床癥狀,檢測體溫;將死亡的患羊剖檢觀察肺臟病理變化,對比各組羊在治療后的差別。(3)分別在感染前一天(0d)、感染后一天(1d)、感染后五天(5d)、一周(7d)、兩周(14d)、三周(21d),...

【文章來源】: 石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:58 頁

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫的中英文對照
引言
文獻綜述
    1 ISG15 基因的研究進展
    2 綿羊肺炎支原體研究進展
    3 相關(guān)細(xì)胞因子研究進展
    4 熒光定量 PC R 的研究進展
    5 ELISA 的研究進展
試驗一 綿羊肺炎支原體的人工感染
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
實驗二 ISG15 蛋白對感染綿羊肺炎支原體羊的治療作用
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
試驗三 熒光定量 PCR檢測 ISG15 蛋白對盤羊雜交羊感染肺炎支原體的免疫調(diào)節(jié)作用
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
試驗四 ELISA方法檢測ISG15蛋白對盤羊雜交羊感染肺炎支原體的免疫調(diào)節(jié)作用
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
全文總結(jié)
創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表


【參考文獻】:
期刊論文
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[3]泛素樣蛋白ISG15抗病毒機制研究進展 [J]. 朱紫祥,魏建超,史子學(xué),吳開寶,馬志永.  病毒學(xué)報. 2012(01)
[4]盤羊肺炎支原體感染PCR檢測方法的建立與初步應(yīng)用 [J]. 冷青文,李志遠(yuǎn),屈勇剛,魯海富,金云云,王靜梅,剡根強.  獸類學(xué)報. 2011(03)
[5]白細(xì)胞介素2和白細(xì)胞介素6在支原體肺炎患兒血清及誘導(dǎo)痰中表達(dá)及臨床意義研究 [J]. 劉賀臨,王立鎖,鄭申建,魏賢,甘斌.  中國實用兒科雜志. 2011(08)
[6]白細(xì)胞介素-4的研究進展 [J]. 李睿.  華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2011(03)
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博士論文
[1]小尾寒羊5個與繁殖和疾病抗性相關(guān)基因的克隆及比較基因組學(xué)分析[D]. 宋雪梅.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007

碩士論文
[1]雜交盤羊傳染性胸膜肺炎支原體的分離和鑒定[D]. 李志遠(yuǎn).石河子大學(xué) 2010
[2]抗雞γ-干擾素單克隆抗體的制備及定量抗原ELISA檢測方法的建立[D]. 李志中.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]綿羊肺炎支原體生物學(xué)特性及其PCR快速檢測技術(shù)的研究[D]. 張莉.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號:3479550

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