發(fā)布時(shí)間：2021-11-06 08:33

　　口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒引起的豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物的一種烈性傳染病，給流行國家和地區(qū)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，篩選與田間流行毒株基因型相近的、免疫原性良好的、適合生產(chǎn)特性的制造疫苗毒株，將對(duì)疫情的有效控制會(huì)起到非常重要的作用。本論文針對(duì)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院國家口蹄疫參考實(shí)驗(yàn)室分離鑒定的四株東南亞拓?fù)湫途挼?8系O型口蹄疫乳鼠毒，開展了實(shí)驗(yàn)室乳鼠傳代、實(shí)驗(yàn)室方瓶細(xì)胞傳代馴化、生產(chǎn)車間細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)傳代適應(yīng)以及制作疫苗的評(píng)價(jià)工作；根據(jù)以上三階段毒種傳代過程中的收毒時(shí)間、病毒含量以及對(duì)靶動(dòng)物和靶細(xì)胞的適應(yīng)情況，選擇出一株傳代穩(wěn)定、病毒含量較高的適合生產(chǎn)的疫苗種毒株—O/XJ/10-11株。經(jīng)傳代培養(yǎng)后，將收獲的S01、S02、S03三批次病毒液分別按照工藝要求進(jìn)行滅活處理，制成滅活疫苗（期間進(jìn)行滅活效果檢驗(yàn)、成品性狀檢驗(yàn)、成品安全檢驗(yàn)等），與現(xiàn)行經(jīng)典的OZK/93株制作的3批疫苗同時(shí)免疫經(jīng)篩選的易感動(dòng)物豬，在同等條件下飼養(yǎng)，比較疫苗免疫后28天供試豬血清抗體效價(jià)，并進(jìn)行疫苗交叉攻毒保護(hù)試驗(yàn)，初步評(píng)估兩種疫苗的免疫效果。結(jié)果顯示，兩種疫苗免疫動(dòng)物后，都可刺... 

【文章來源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

接毒前（100×）

期間每個(gè)滴度換一支吸頭，取 10-4，10-5，10-6，10-7，10-8，10-9等各稀釋度，接種于生長有 BHK-21 細(xì)胞單層的 96 孔培養(yǎng)板中，每稀釋度接種 4~5 孔，每孔接毒 0.1ml，同時(shí)，設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照。接種后置 37℃下 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) 3 日，每日觀察細(xì)胞病變，根據(jù)出現(xiàn)細(xì)胞病變孔數(shù)，按照 Reed-Muench 法計(jì)算 TCID50。3.2 結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，O/GD/10-9 株、O/GX/10-10 株毒在 BHK-21 細(xì)胞上傳代三代后，并無典型 CPE 出現(xiàn)，無法進(jìn)行 TCID50測(cè)定，因而本實(shí)驗(yàn)改用 PK-15 細(xì)胞對(duì)兩株毒進(jìn)行傳代馴化，當(dāng)傳至第三代，表現(xiàn)出一定的口蹄疫典型 CPE 后，改用 BHK-21 細(xì)胞繼續(xù)傳代才獲得了典型 CPE。其余兩株毒傳代表現(xiàn)正常，在 BHK-21 細(xì)胞傳代三代后，逐漸出現(xiàn)典型 CPE。四株毒種 BF5 代毒接種 BHK-21 細(xì)胞前及出現(xiàn) CPE 后，細(xì)胞顯微成像圖如下：

圖 3-3 接毒前（100×） 圖 3-4 接種 O/GD/10-9 株后細(xì)胞 CPE（100×圖 3-5 接毒前（100×） 圖 3-6 接種 O/GX/10-10 株后細(xì)胞 CPE（100×

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3479505