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表達豬O型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重組桿狀病毒的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究

發(fā)布時間:2021-11-06 09:55
  口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的以侵害偶蹄獸為主的急性烈性傳染病。該病以血清型多、傳染性強、傳播快,感染率高、流行范圍大、宿主譜廣等特點著稱,可再現(xiàn)感染,嚴(yán)重危害全球養(yǎng)殖業(yè)。聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)和世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將該病列為A類動物傳染病,并列入重大跨國動物疫病的全球消滅計劃。目前主要應(yīng)用的口蹄疫疫苗包括滅活疫苗、亞單位疫苗,DNA疫苗和病毒活載體疫苗等。以滅活疫苗應(yīng)用最多,在我國口蹄疫的預(yù)防控制中發(fā)揮了重要的作用,但是它存在著滅活不徹底、潛在的生物安全等顯著缺點。P1蛋白是FMDV的主要免疫原性蛋白,為FMDV的結(jié)構(gòu)蛋白,在蛋白酶的作用下可以裂解成VP0、VP1、VP3結(jié)構(gòu)蛋白形成病毒的衣殼。P1、VP0、VP1和VP3基因是研究FMDV新型疫苗的主要基因。鑒于此,本研究開展以下研究內(nèi)容:1、表達FMDV主要免疫原性基因的重組桿狀病毒rBac-VP130、rBac-P111、rBac-P11-3C 的構(gòu)建將FMDV耿馬毒株的主要免疫原性基因VP0、VP1、VP3,FMDV耿馬毒株三個拷貝的P1基因(GMP1)以及GMP1和3C基因分別插入桿狀病毒表達載... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

表達豬O型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重組桿狀病毒的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究


圖1-1?2013年第一季度口蹄疫世界流行現(xiàn)狀(0皿,2013)??Flg.1-1?FMD?Ou化reaks?dluring?化e?first?quarter?in?2013?(OIE,?2013?)??

病毒粒子,口蹄疫病毒,正鏈,基因組結(jié)構(gòu)


??圖1-1?2013年第一季度口蹄疫世界流行現(xiàn)狀(0皿,2013)??Flg.1-1?FMD?Ou化reaks?dluring?化e?first?quarter?in?2013?(OIE,?2013?)??FMDV的血清型及流行毒株在不同的地區(qū)是不同的,全球wo型多見,C型少??見。1990年流行的泛亞株0型FMDV使許多的國家大規(guī)模的爆發(fā)了?口蹄疫。而2009??年在廣東發(fā)現(xiàn)豬0型口蹄疫耿馬毒株W后,最近在中國及其周邊國家主要流行該毒??株。在2011年黃山口蹄疫會議上,國家參考實驗室劉向濤研究員指出耿馬毒株在未??來一段時間是我國主要的流行毒株,對豬0型口蹄疫的防控工作主要W耿馬毒株為??重點(黃山病毒學(xué)研討會)。??2??

轉(zhuǎn)移載體,構(gòu)建策略,重組桿狀病毒


表達豬o型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重組桿狀病毒的構(gòu)建及其生物學(xué)特巧研究表達FMDVP1基因的重姐桿狀病毒巧ac-Plll的構(gòu)建??.1重組轉(zhuǎn)移載體pFBDpH-Pl-Pl-Pl的構(gòu)建??tUpMD-Pl質(zhì)粒為模板,通過含有不同酶切位點的特異性引物從P1基因P1公awHI-尼coRI、P1扣/I-/加dm、Pl々7d-TVod片段,分別連到PMD-18T。利用4丄1相同的克隆方法將P1基因插入桿狀病毒載體pFas化acDual-eGFP-p得重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pFBDpH-Pl-Pl-Pl?(pFBDpH-PHl),經(jīng)酶切鑒定體構(gòu)建正確(如圖4-9,4-10所示)。??PolvA??—?

【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬口蹄疫的流行與防控[J]. 陳世平.  今日養(yǎng)豬業(yè). 2012(05)
[2]桿狀病毒表達載體系統(tǒng)的特點及其在寄生蟲學(xué)上的應(yīng)用[J]. 王海,胡少敏,吳忠道,余新炳.  國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊). 2004(04)
[3]桿狀病毒表達系統(tǒng)研究進展及在寄生蟲基因工程 疫苗中的應(yīng)用前景[J]. 景志忠,王佩雅,才學(xué)鵬.  中國獸醫(yī)科技. 2001(03)

碩士論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征重組假型桿狀病毒基因工程疫苗研究[D]. 王升平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號:3479623

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