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LDH@SiO 2 殼-核納米復合材料的合成及其作為新城疫DNA疫苗載體的研究

發(fā)布時間:2021-11-04 13:47
  新城疫(Newcastle disease, ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一種致死性、高度接觸性的禽類傳染病,給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的危害,被國際獸醫(yī)局(OIE)定為A類傳染病。ND的主要癥狀是呼吸困難、下痢、神經(jīng)紊亂、黏膜和漿膜出血。ND防治的主要途徑是免疫接種,滅活苗和弱毒苗是目前常用的預防新城疫的兩種疫苗,雖然滅活苗和弱毒苗免疫效果尚可,但是免疫保護周期不長,且還會出現(xiàn)毒力返強。DNA疫苗雖然既可以誘導體液免疫和細胞免疫,但DNA疫苗存在體內(nèi)易降解、抗原表達量低等不足之處。利用可生物降解材料作為基因遞送載體,可保護DNA免遭核酸酶降解,提高其轉染效率及其靶向性,增強免疫效果。本試驗以自行合成的可降解生物材料LDH@SiO2殼-核納米復合材料為基因遞送載體,以新城疫病毒pVAX1-F (o)為模型藥物,制備PFDNA-LDH@SiO2-NPs,并對pFDNA-LDH@SiO2-NPs制備工藝、理化特性、穩(wěn)定性、抑菌活性等進行了較為詳細的研究。試驗結果表明, 以本試驗確定的最佳工藝制備的pFDNA-LDH@SiO2-NPs形態(tài)規(guī)則、分散性好,平均粒徑為371.93nm, Zeta... 

【文章來源】:黑龍江大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

LDH@SiO 2 殼-核納米復合材料的合成及其作為新城疫DNA疫苗載體的研究


圖3-2?Si化納米粒子掃描電鏡下形態(tài).Fig3-2?Morphology?of?Si〇2?by?scanning?electroexerime打tal

形態(tài)圖,形態(tài),納米粒,帶正電


即得評DNA-Si〇2-NPs。??3.2.3?pFDNA-Si〇2-NPs?表征??采用本試驗碗定的優(yōu)化工藝制備的pFDNA-Si〇2-NPsTEM觀察結果見圖3-4。??納米粒表面光滑、呈球形、形態(tài)規(guī)則、粒徑平均、分散性好,無明顯黏連、??塌陷等現(xiàn)象。從圖3-5可W看出,W優(yōu)化工藝制各的pFDNA-SK)2-NPs粒徑??范圍在81.26?100.27nm么間,粒徑分布較窄,平均粒徑為90.5nm。從表3-4可W??看出,所合成的Si〇2納米粒的Ze化電位為-21.08mV,APTES-Si〇2納米粒的Zeta??電位為巧8.37mV,pFDNA-Si02-NPsZe化電位為+1.43mV。Si02納米粒表面富含??桂徑基,因而帶負電箭,而進行氨基化修飾后,因為氨基帶正電荷致使AFTES-Si〇2??納米粒帶正電荷,帶正電荷的APTES-Si〇2納米粒與帶負電荷的質(zhì)粒DNA通過靜??電吸附結合

粒徑分布,放曲線,釋放量


?'??3.2.7阱DNA-Si〇2-NPs體外釋放試驗??從圖3-9中可W看出,在12h時pFDNA-Si〇2-NPs中的質(zhì)粒DNA釋放量達到??(32.8化1.47)?%?(n=3),釋放速度很快,在24h時釋放量法到(42.2化1.35)??〇/〇(n=3),在0 ̄24h之間,質(zhì)粒DNA的釋放是一個突釋的過程;在24 ̄9化??之間,釋放量達到(64.27±1.52)?%?(n=3);在9化之后質(zhì)粒的釋放速度逐??漸放慢并趙于平緩,在288h時質(zhì)粒DNA的釋放量達到(71.42±1.2)%(n=3)。??100「??90?-??9?80?-??70?-?????-*?????*??桓?60?-??銀加-??廣?40?-??蛛?/??<?30?Y??e?20?-j??a?10?/??Q?^?1?I?1?1?I?1?I?I?I?1?I?1?1??0?24?48?72?96?120?144?168?192?216?240?264?288?312??時間/小時??圖3-9?pFDNA-Si〇2-NPs體外擇放曲線??Figure?3-9?The?releasing?curve?of?pFDNA-Si〇2-NPs?in?vitro??3.3?阱DNA-LDH@Si〇2-NPs?制備??3.3.1?陽DNA-LDH@Si〇2-NPs?表征??3.3.1.1?pFDNA-LDH@W〇2-NPs形態(tài)、粒徑分布和Zda電位檢測??圖?3-10?中給出了?pFDNA-S沿2-NPs、LDH?和?pFDNA-LDH@S沿2-NPs?的透射??電鏡圖。從圖3-10?(a)可W看出

【參考文獻】:
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本文編號:3475854

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