MCRS1、CDX2和NANOG在體外受精和核移植牛囊胚內(nèi)細胞團及滋養(yǎng)層細胞中的表達
發(fā)布時間：2021-11-04 13:45
胎盤發(fā)育異常是目前公認(rèn)的導(dǎo)致克隆牛體內(nèi)發(fā)育失敗的主要原因,而越來越多的證據(jù)表明在囊胚階段滋養(yǎng)層和內(nèi)細胞分化異常是引起胎盤發(fā)育異常的關(guān)鍵因素。哺乳動物的早期胚胎第一次細胞分化過程極其復(fù)雜,受到多種調(diào)控因子的影響,其中MCRS1、CDX2、NANOG在胚胎發(fā)育過程中起著十分重要的作用。MCRS1主要參與細胞的增殖和轉(zhuǎn)化;CDX2在胚胎發(fā)育過程中的主要作用是維持胚胎生長、誘導(dǎo)細胞分化和器官的形成;NANOG基因?qū)υ缙谂咛ブ信咛ジ杉毎淖晕腋乱约熬S持細胞多潛能性發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用,其被認(rèn)為是全能型或者多能性干細胞的重要標(biāo)志物。截止目前,有關(guān)MCRS1、CDX2和NANOG在體外受精（In vitro fertilization,IVF）以及核移植囊胚內(nèi)細胞團（ICM）和滋養(yǎng)層（TE）細胞的表達模式和作用的研究尚不夠完善,主要原因是囊胚的內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層細胞不易完全分離開來進行針對性的檢測分析。本研究通過體外受精和核移植技術(shù)獲得IVF和核移植囊胚,然后通過磁珠分選的方法分離純化囊胚的ICM和TE細胞;進一步運用qRT-PCR技術(shù)研究兩種囊胚的ICM和TE細胞中MCRS1、CDX2和NANOG的...
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：52 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
磁珠分選后得到的ICM和TE細胞左列為ICM細胞，右列為TE細胞，第一行為Hoechst33342染色，第二行為ConA-FITC染色，第三行為merged圖像
圖 3-1 MCRS1 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 細胞中的相對表達量a.b 表示組間具有顯著性差異（P<0.05）Fig. 3-1 Relative expression levels of MCRS1 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differeletters indicate differences (P < 0.05) CDX2 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達情況以相同的方法得到的 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 細胞，利用熒光定量 PCR 的方法定了CDX2 在IVF 囊胚ICM 和 TE 細胞中的表達情況。經(jīng)過數(shù)據(jù)處理與分析，CD果如圖 3-2 所示，CDX2 在牛 IVF 囊胚的 TE 細胞中的相對表達量顯著高于在 IC的相對表達量（P<0.05）。
圖 3-2 CDX2 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 細胞中的相對表達量a.b 表示組間具有顯著性差異（P<0.05）Fig. 3-2 Relative expression levels of CDX2 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differentletters indicate differences (P < 0.05).2 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達情況對 IVF 囊胚進行磁珠分選得到 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 細胞，然后通過實時熒光 PCR 的方法，分別測定了 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達水平。經(jīng)據(jù)處理和分析，結(jié)果如圖 3-3 所示，NANOG 主要在囊胚的 ICM 中表達，在 TE中的相對表達量較低，且在 ICM 中的相對表達量顯著高于在 TE 細胞中的表達量<0.05）。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Extending the functions of the homeotic transcription factor Cdx2 in the digestive system through nontranscriptional activities[J]. Jean-No?l Freund,Isabelle Duluc,Jean-Marie Reimund,Isabelle Gross,Claire Domon-Dell. World Journal of Gastroenterology. 2015(05)
[2]結(jié)直腸腫瘤的新標(biāo)記——CDX2[J]. 方義湖,來茂德. 國際遺傳學(xué)雜志. 2006(04)
[3]腸道上皮特異性基因CDX2[J]. 宋艷,李凌. 世界華人消化雜志. 2004(02)
[4]牛體外受精技術(shù)研究進展[J]. 黃志堅,黃依明. 福建畜牧獸醫(yī). 2002(01)
[5]卵丘細胞核移植技術(shù)生產(chǎn)克隆牛犢[J]. 安曉榮,茍克勉,關(guān)宏,侯健,林愛星,陳永福,朱士恩,曾申明,田見暉. 中國科學(xué)（C輯:生命科學(xué)）. 2002(01)
本文編號：3475850
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：52 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
磁珠分選后得到的ICM和TE細胞左列為ICM細胞，右列為TE細胞，第一行為Hoechst33342染色，第二行為ConA-FITC染色，第三行為merged圖像
圖 3-1 MCRS1 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 細胞中的相對表達量a.b 表示組間具有顯著性差異（P<0.05）Fig. 3-1 Relative expression levels of MCRS1 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differeletters indicate differences (P < 0.05) CDX2 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達情況以相同的方法得到的 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 細胞，利用熒光定量 PCR 的方法定了CDX2 在IVF 囊胚ICM 和 TE 細胞中的表達情況。經(jīng)過數(shù)據(jù)處理與分析，CD果如圖 3-2 所示，CDX2 在牛 IVF 囊胚的 TE 細胞中的相對表達量顯著高于在 IC的相對表達量（P<0.05）。
圖 3-2 CDX2 在牛 IVF 囊胚的 ICM 和 TE 細胞中的相對表達量a.b 表示組間具有顯著性差異（P<0.05）Fig. 3-2 Relative expression levels of CDX2 in ICM and TE cells of cow IVF blastocyst. Differentletters indicate differences (P < 0.05).2 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達情況對 IVF 囊胚進行磁珠分選得到 IVF 囊胚中的 ICM 和 TE 細胞，然后通過實時熒光 PCR 的方法，分別測定了 NANOG 在 IVF 囊胚 ICM 和 TE 細胞中的表達水平。經(jīng)據(jù)處理和分析，結(jié)果如圖 3-3 所示，NANOG 主要在囊胚的 ICM 中表達，在 TE中的相對表達量較低，且在 ICM 中的相對表達量顯著高于在 TE 細胞中的表達量<0.05）。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Extending the functions of the homeotic transcription factor Cdx2 in the digestive system through nontranscriptional activities[J]. Jean-No?l Freund,Isabelle Duluc,Jean-Marie Reimund,Isabelle Gross,Claire Domon-Dell. World Journal of Gastroenterology. 2015(05)
[2]結(jié)直腸腫瘤的新標(biāo)記——CDX2[J]. 方義湖,來茂德. 國際遺傳學(xué)雜志. 2006(04)
[3]腸道上皮特異性基因CDX2[J]. 宋艷,李凌. 世界華人消化雜志. 2004(02)
[4]牛體外受精技術(shù)研究進展[J]. 黃志堅,黃依明. 福建畜牧獸醫(yī). 2002(01)
[5]卵丘細胞核移植技術(shù)生產(chǎn)克隆牛犢[J]. 安曉榮,茍克勉,關(guān)宏,侯健,林愛星,陳永福,朱士恩,曾申明,田見暉. 中國科學(xué)（C輯:生命科學(xué)）. 2002(01)
本文編號：3475850
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