片形吸蟲�。╢ascioliasis）是由片形科、片形屬（Fasciola）吸蟲,如大片形吸蟲（Fasciola gigantica）、肝片形吸蟲（Fasciola hepatica）及其中間型（intermediate form）的感染引起的一種人獸共患寄生蟲病。大片形吸蟲病分布于熱帶和亞熱帶地區(qū),肝片形吸蟲病主要分布于溫帶地區(qū),給畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,同時(shí)嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全。鈣結(jié)合蛋白（Calcium-binding protein,CaBp）屬于蠕蟲鈣結(jié)合蛋白家族,具有鈣結(jié)合位點(diǎn),可通過與不同信號(hào)分子的結(jié)合在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮作用,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞存活、增殖、黏附、遷移、血管新生等多種腫瘤特征性生物學(xué)過程。亮氨酸氨基肽酶（Leucine aminopeptidases,LAPs）是一種廣泛存在于原核和真核細(xì)胞的金屬蛋白酶,是從蛋白質(zhì)和肽段切割N端殘基而發(fā)揮作用的胞漿酶,具有消化、與宿主互作、蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)、腫瘤生長、組織侵襲和新陳代謝等多種功能。本實(shí)驗(yàn)通過采取形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)相結(jié)合的方法來進(jìn)行大片形吸蟲的鑒定。鑒定正確后,以肝片形吸蟲CaBp2（Fh CaBp2）的序列為參... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 片形吸蟲病
        1.1.1 病原及其生活史
        1.1.2 流行情況及危害
        1.1.3 診斷方法及防控措施
    1.2 排泄分泌產(chǎn)物的概述
    1.3 排泄分泌產(chǎn)物在寄生蟲免疫功能中研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 大片形吸蟲的鑒定
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 大片形吸蟲CaBp2基因的克隆、表達(dá)
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 重組FgCaBp2及重組FgLAP蛋白免疫活性研究
        2.3.1 材料
        2.3.2 方法
    2.4 兩種蛋白對山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的作用
        2.4.1 材料
        2.4.2 方法
3 結(jié)果
    3.1 大片形吸蟲鑒定
        3.1.1 片形吸蟲蟲體形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        3.1.2 片形吸蟲分子生物學(xué)鑒定結(jié)果
    3.2 FgCaBp2基因的克隆表達(dá)結(jié)果
        3.2.1 FgCaBp2基因克隆結(jié)果
        3.2.2 FgCaBp2基因生物信息學(xué)分析結(jié)果
        3.2.3 重組克隆質(zhì)粒pMD19-T-rFgCaBp2的鑒定
        3.2.4 重組表達(dá)質(zhì)粒pET-30a-rFgCaBp2的鑒定
        3.2.5 目的蛋白的表達(dá)與分析
    3.3 重組FgCaBp2及重組Fg LAP蛋白的免疫活性
        3.3.1 兩種蛋白與人工感染山羊的陽性血清的Western-blot分析
        3.3.2 間接ELISA檢測兩種蛋白免疫家兔制備的多克隆抗體滴度與最佳稀釋度
        3.3.3 兩種蛋白與相應(yīng)兔源多克隆抗體的Western-blot分析
    3.4 兩種蛋白對山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的作用
        3.4.1 兩種蛋白與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合作用
        3.4.2 兩種蛋白對山羊PBMCs細(xì)胞因子分泌及總NO的產(chǎn)生的影響
        3.4.3 兩種蛋白對山羊PBMCs的增殖與遷移作用
        3.4.4 兩種蛋白對山羊PBMCs凋亡及山羊單核細(xì)胞吞噬功能的影響
4 討論
    4.1 大片形吸蟲的鑒定
    4.2 rFgCaBp2基因的克隆、表達(dá)與純化
    4.3 rFgCaBp2蛋白與rFgLAP蛋白的免疫活性
    4.4 兩種蛋白對山羊PBMCs功能的影響
        4.4.1 兩種蛋白與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的體外結(jié)合
        4.4.2 兩種蛋白對山羊PBMCs細(xì)胞因子分泌的影響及總NO的產(chǎn)生
        4.4.3 兩種蛋白對山羊PBMCs的增殖與遷移作用
        4.4.4 兩種蛋白對山羊PBMCs的凋亡與山羊單核細(xì)胞吞噬功能的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]旋毛蟲ES抗原對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞NOD1受體通路影響的研究[J]. 李曉云,韓彩霞,陰玥,胡靜,張妍,孟詩,孟小晴,宋銘忻.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]華支睪吸蟲鈣結(jié)合蛋白Cs16的重組表達(dá)及血清診斷應(yīng)用的初步評(píng)價(jià)[J]. 濮玨彪,唐莉莉,殷岑楠,杜新月,吳健樺,趙蔚,劉登宇,王兆軍,吳琛耘.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(03)
[3]捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蘇氨酸醛縮酶結(jié)構(gòu)域包含蛋白的克隆與表達(dá)及其體外對山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞功能的影響[J]. 溫玉玲,王玉儉,吳玲燕,嚴(yán)若峰,徐立新,宋小凱,李祥瑞.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(03)
[4]片形吸蟲與片形吸蟲病(四)[J]. 張毅強(qiáng).  廣西畜牧獸醫(yī). 2011(06)
[5]片形吸蟲與片形吸蟲病(一)[J]. 張毅強(qiáng).  廣西畜牧獸醫(yī). 2011(03)

博士論文
[1]甘肅省牦牛肝片形吸蟲病血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查及不同發(fā)育期大片形吸蟲轉(zhuǎn)錄組和MicroRNA組研究[D]. 張曉軒.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]大片吸蟲兩種排泄分泌蛋白的克隆、表達(dá)及其對山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞功能影響的研究[D]. 田艾靈.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[2]大片形吸蟲ES與宿主互作抗原的篩選、鑒定及分析[D]. 岳東梅.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2017
[3]云南大理市片形吸蟲的分子鑒定及部分線粒體DNA的序列研究[D]. 郭田田.昆明醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3475840