禽網狀內皮組織增殖病（reticuloendotheliosis, RE）是繼雞馬立克氏病、雞淋巴細胞白血病之后的第三種病毒性腫瘤病。微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability, MSI）廣泛地應用于人類腫瘤病的檢測。目前未見有應用微衛(wèi)星技術研究禽網狀內皮組織增殖病病毒（reticuloendotheliosis virus, REV）感染雞胚成纖維細胞后引起宿主基因組變化的報道。本試驗將REV感染雞胚成纖維細胞后,檢測雞染色體上微衛(wèi)星不穩(wěn)定性,旨在發(fā)現(xiàn)禽網狀內皮組織增殖病病毒感染雞胚成纖維細胞后是否引起宿主基因組的改變,為此病的早期診斷及腫瘤的分子發(fā)病機制提供線索。本試驗中應用22個SPF雞胚培養(yǎng)雞胚成纖維細胞,將每個雞胚的細胞分成兩部分,一半細胞接種REV,另一半作為對照,獲得含試驗和對照的22組樣本,提取細胞的基因組DNA。選取雞1、2、3號染色體上135個微衛(wèi)星標記,分別采用聚合酶鏈式反應、12%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、銀染等技術檢測基因組微衛(wèi)星不穩(wěn)定性。試驗結果統(tǒng)計顯示135個微衛(wèi)星標記,有106個位點發(fā)生不同百分率的MSI,占全部微衛(wèi)星標記的78.... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
ABSTRACT
文中所引部分縮略語
前言
上篇 文獻綜述
    第一章 禽網狀內皮組織增殖病綜述
        1 病原
            1.1 病毒的分類
            1.2 病毒的理化特性
        2 病毒的復制
        3 流行病學
            3.1 分布
            3.2 宿主
            3.3 感染途徑和傳播方式
        4 發(fā)病機制
            4.1 急性網狀內皮細胞腫瘤的形成
            4.2 矮小綜合癥
            4.3 慢性腫瘤的形成
        5 臨床癥狀和病理變化
            5.1 急性網狀內皮細胞增生
            5.2 矮小綜合征
            5.3 慢性腫瘤的形成
        6 診斷
            6.1 病毒分離法
            6.2 間接免疫熒光試驗(IFA)
            6.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
            6.4 PCR方法
        7 防治措施
            7.1 疫苗
            7.2 治療
            7.3 預防和控制措施
        8 小結
        參考文獻
    第二章 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其在腫瘤上的研究
        1 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性
            1.1 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性產生的機制
            1.2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的檢測方法
            1.3 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的腫瘤發(fā)生機制
        2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性在腫瘤學上的應用研究
            2.1 人醫(yī)臨床中微衛(wèi)星不穩(wěn)定性在腫瘤中的發(fā)現(xiàn)
            2.2 禽腫瘤病微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究
        參考文獻
下篇 試驗研究
    第三章 雞胚成纖維細胞的培養(yǎng)及REV病毒感染
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 細胞培養(yǎng)的結果
            2.3 PCR檢測結果
        3 討論
            3.1 關于REV增殖
            3.2 PCR檢測方法的選擇
            3.3 env基因的擴增
            3.4 病毒的純化和負染
        參考文獻
        Abstract
    第四章 CEF感染REV后部分染色體MSI的研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果與分析
            2.1 部分微衛(wèi)星變性聚丙烯酰酰胺凝膠電泳結果
            2.2 不同位點微衛(wèi)星不穩(wěn)定性統(tǒng)計結果
            2.3 不同樣品微衛(wèi)星不穩(wěn)定性統(tǒng)計結果
            2.4 發(fā)生MSI的位點的序列比對結果
        3 討論
            3.1 MSI的發(fā)生
            3.2 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性發(fā)生率與位點有關
            3.3 1,2,3號染色體上MSI的特點及其其臨床病理學意義
        4 小結
        參考文獻
        ABSTRACT
全文總結
創(chuàng)新之處
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]禽網狀內皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表達及ELISA方法的初步建立[J]. 余沖,黃勇,田明星,石敏,李敏,趙芳芳.  浙江大學學報(農業(yè)與生命科學版). 2011(04)
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[3]錯配修復和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與食管癌的關系[J]. 李斌,袁寧.  中國醫(yī)藥指南. 2010(19)
[4]雞胚成纖維細胞感染馬立克氏病病毒后部分染色體上微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[J]. 高喜梅,邱燕,韓濤,姚剛,楊德吉.  新疆農業(yè)大學學報. 2009(01)
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[6]微衛(wèi)星DNA檢測方法的研究[J]. 杜爽,仇雪梅.  生物技術通報. 2008(03)
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[9]微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與惡性腫瘤[J]. 周尊強,趙金鵬.  國際遺傳學雜志. 2006(01)
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博士論文
[1]禽網狀內皮組織增殖病病毒檢測及其動物感染模型的建立[D]. 翟新驗.吉林大學 2007

碩士論文
[1]CEF感染ALV-J后2、3號染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究[D]. 趙波.南京農業(yè)大學 2012
[2]雞胚成纖維細胞感染禽白血病病毒ALV-J后1號染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 吳艷婷.南京農業(yè)大學 2011
[3]雞馬立克腫瘤形成前宿主基因組的部分微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 李尚同.南京農業(yè)大學 2010
[4]馬立克腫瘤及接種火雞皰疹病毒活疫苗后的SPF雞微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究[D]. 郭俊清.南京農業(yè)大學 2009
[5]馬立克氏病病毒感染雞胚成纖維細胞后4號染色上基因微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究[D]. 尚月麗.南京農業(yè)大學 2007
[6]雞馬立克腫瘤發(fā)生后2號染色體微衛(wèi)星標記變化的研究[D]. 夏繼飛.南京農業(yè)大學 2006
[7]禽網狀內皮組織增殖病病毒PCR及RT-PCR檢測方法的研究和p30主要抗原域的原核表達[D]. 葛菲菲.南京農業(yè)大學 2003



本文編號：3475539