發(fā)布時(shí)間：2021-11-04 08:50

　　豬鏈球菌（Streptococcus Suis,S.suis）導(dǎo)致患病豬的腦膜炎,敗血癥以及各種化膿性炎癥,是引起公共衛(wèi)生危害的重要病原之一。按照莢膜抗原的血清學(xué)分類(lèi),目前共有35個(gè)豬鏈球菌的血清型。此外還存在不能定型或者不屬于現(xiàn)有血清型的菌株。1.仔豬腦膜炎新型豬鏈球菌分離株的鑒定和毒力分析2013年3月至5月,江蘇某豬場(chǎng)大量斷奶仔豬患病死亡。發(fā)病率達(dá)35%,死亡率為90%�；疾�(dòng)物表現(xiàn)出共濟(jì)失調(diào)、轉(zhuǎn)圈、頭部震顫等明顯的腦膜炎癥狀。剖檢9只瀕臨死亡的病豬發(fā)現(xiàn),腦部均有不同程度的水腫和點(diǎn)狀出血。從仔豬腦組織中分離培養(yǎng)獲得一株細(xì)菌,命名為CZ130302。通過(guò)生化鑒定,結(jié)合16S rRNA基因和谷氨酸脫氫酶基因（gdh）的測(cè)序鑒定,確定該細(xì)菌（CZ130302）為豬鏈球菌。電鏡觀察CZ130302株有莢膜結(jié)構(gòu),與參考血清的凝集試驗(yàn)和多重PCR分型鑒定方法進(jìn)一步確定該分離株不屬于現(xiàn)有的任一血清型。制備豬鏈球菌CZ130302菌株的高免血清。該血清與現(xiàn)有的35個(gè)血清型菌株進(jìn)行凝集反應(yīng)試驗(yàn),結(jié)果均為陰性。150只BALB/c小鼠隨機(jī)分為15組,測(cè)定CZ130302的半數(shù)致死量（LD5o）為2.... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 豬鏈球菌的鑒定分型研究進(jìn)展
    1 生化鑒定
    2 血清學(xué)分型
    3 分子生物學(xué)分型技術(shù)
        3.1 多重PCR技術(shù)(Mulitiplex PCR)
        3.2 多位點(diǎn)序列分型(MLST)技術(shù)
        3.3 利用看家基因?qū)ωi鏈球菌的鑒定和分群
        3.4 多位點(diǎn)酶電泳法(MEE)技術(shù)
        3.5 限制性?xún)?nèi)切酶圖譜分析法(REA)
        3.6 脈沖凝膠電泳(PFGE)分型
        3.7 隨機(jī)擴(kuò)增核酸片段多態(tài)性分析(RAPD)
        3.8 基于EF等毒力因子的分型
        3.9 核糖體酶切分型(Ribotyping)
    參考文獻(xiàn)
第二篇 實(shí)驗(yàn)研究
    第二章 仔豬腦膜炎新型分離株的鑒定
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 病原的檢測(cè)和分離
            1.2 菌株、質(zhì)粒和培養(yǎng)條件
            1.3 病毒的檢測(cè)
            1.4 細(xì)菌的培養(yǎng)特性分析
            1.5 血清凝集試驗(yàn)
            1.6 多重PCR(Multiplex PCR)反應(yīng)
            1.7 毒力表型鑒定
            1.8 BALB/c小鼠攻毒試驗(yàn)
            1.9 細(xì)胞黏附試驗(yàn)
            1.10 CZ130302抗血清的制備
        2 結(jié)果
            2.1 病原的鑒定
            2.2 血清凝集試驗(yàn)
            2.3 PCR反應(yīng)
            2.4 毒力表型鑒定
            2.5 BALB/c小鼠攻毒試驗(yàn)
            2.6 小鼠攻毒臟器分布試驗(yàn)
            2.7 細(xì)胞黏附試驗(yàn)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
    第三章 CZ130302株基因組分析及PCR定型方法的建立
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 基因組測(cè)序
            1.2 CPS基因的補(bǔ)洞和拼接
            1.3 ORF分析與BPGN命名
            1.4 序列比較與進(jìn)化分析
            1.5 cpn60、recN和sodA的進(jìn)化樹(shù)分析
            1.6 MLST分型
            1.7 CPS合成聚合酶以及翻轉(zhuǎn)酶等基因分析
            1.8 CPS HGs的比對(duì)
            1.9 PCR分型方法的建立
            1.10 未定型菌株的定型篩選
            1.11 新定型菌株的生物學(xué)特性分析
        2 結(jié)果
            2.1 CPS的測(cè)序結(jié)果
            2.2 CPS HGs分析
            2.3 MLST分型
            2.4 HGs的比對(duì)結(jié)果
            2.5 cpn60、recN和sodA的進(jìn)化樹(shù)分析
            2.6 CPS的合成途徑聚合酶以及翻轉(zhuǎn)酶等基因分析
            2.7 新血清型PCR檢測(cè)方法的建立
            2.8 新型檢測(cè)方法的建立
            2.9 新型菌株毒力因子的檢測(cè)
            2.10 新型菌株半數(shù)致死量的測(cè)定
            2.11 莢膜電鏡
            2.12 細(xì)胞黏附試驗(yàn)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
全文總結(jié)
致謝
博士在讀期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬鏈球菌2型感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 宋潔,黎庶.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2010(03)
[2]體內(nèi)表達(dá)新基因trag在豬鏈球菌的分布及其免疫反應(yīng)性分析[J]. 祝昊丹,顧宏偉,陸承平.  微生物學(xué)報(bào). 2008(12)
[3]豬鏈球菌35個(gè)血清型標(biāo)準(zhǔn)抗血清的制備及應(yīng)用[J]. 姜艷華,孫乾,王楷宬,黃保續(xù),辛長(zhǎng)衛(wèi),姜平,范偉興.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2008(09)
[4]用斑馬魚(yú)檢測(cè)豬鏈球菌2型的致病力[J]. 濮俊毅,黃新新,陸承平.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(11)
[5]豬鏈球菌1998分離株病原特性鑒定[J]. 姚火春,陳國(guó)強(qiáng),陸承平.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 1999(02)



本文編號(hào)：3475404