發(fā)布時(shí)間：2021-10-28 05:50

　　本研究從秦皇島、北京和遼寧等雞場(chǎng)采集病料,經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)、純培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察,獲得10個(gè)分離菌株,以金黃色葡萄球菌（ATCC25923）為參考菌株,采用API20E和PCR兩種方法對(duì)其鑒定。API20E檢測(cè)結(jié)果表明：有7株為沙門(mén)氏菌,3株為非沙門(mén)氏菌；沙門(mén)氏菌16S rRNA;基因序列PCR擴(kuò)增、序列分析表明：3株非沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌參考菌株未擴(kuò)出,而7株沙門(mén)氏菌擴(kuò)出預(yù)期的條帶,進(jìn)一步對(duì)其序列與NCBI上登陸的各種沙門(mén)氏菌分析表明,它們屬于腸道沙門(mén)氏菌。說(shuō)明API20E和PCR方法都適用于沙門(mén)氏菌的快速鑒定,且兩種方法結(jié)合可增加鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：36 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
文獻(xiàn)綜述
    1 微生物與生化沙門(mén)氏菌的檢測(cè)法
        1.1 標(biāo)準(zhǔn)的沙門(mén)氏菌檢測(cè)法(GB 4789.4-2010)
            1.1.1 疏水網(wǎng)格濾膜法(hydrophobic grid-membrane filter,HGMF)
            1.1.2 顯色培養(yǎng)基法
            1.1.3 添加物質(zhì)法
        1.2 自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)檢測(cè)沙門(mén)氏菌
        1.3 4-甲基傘形酮辛酯(MUCAP)試劑檢測(cè)方法
        1.4 沙門(mén)氏菌污染肉的快速檢驗(yàn)
    2 免疫學(xué)沙門(mén)氏菌的檢測(cè)法
        2.1 免疫熒光技術(shù)(Immuno-fluorescence technique)
        2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)
        2.3 自動(dòng)酶標(biāo)免疫測(cè)儀
        2.4 乳膠凝集法(latex agglutination test)
        2.5 免疫擴(kuò)散法(immunodiffusion method)
        2.6 免疫磁珠法(MACS)
        2.7 免疫沉淀反應(yīng)(Immunoprecipitation)
        2.8 葡萄球菌A蛋白協(xié)凝試驗(yàn)法(Staphylococcal Protein A簡(jiǎn)稱SPA)
    3 分子生物學(xué)檢測(cè)法
        3.1 PCR技術(shù)
            3.1.1 Real-time PCR
            3.1.2 Multiplex PCR技術(shù)
            3.1.3 Nested PCR
            3.1.4 RT-PCR
        3.2 基因芯片(DNA chip)
        3.3 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)
        3.4 核酸分子雜交
    4 其他檢測(cè)方法
        4.1 噬菌體裂解法
        4.2 電阻抗法
        4.3 生物傳感器檢測(cè)法(Biosensor)
前言
1 材料
    1.1 菌株來(lái)源
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 API20E試劑條鑒定
    2.2 PCR檢測(cè)
        2.2.1 細(xì)菌模版DNA的提取
        2.2.2 細(xì)菌模版DNA的凝膠電泳檢測(cè)
        2.2.3 PCR引物設(shè)計(jì)
        2.2.4 PCR
3 結(jié)果
    3.1 API 20E生化鑒定結(jié)果
    3.2 基因組DNA提取結(jié)果
    3.3 16S rRNA擴(kuò)增結(jié)果
    3.4 供試菌株16S rRNA核酸序列的遺傳距離與同源性比較
    3.5 供試菌株16S rRNA核酸序列同源性分析
4 分析與討論
參考文獻(xiàn)
Abstract
附件1
    BJ090504-1
    LN091007-1
    HQ030710-1
    LT080910-1
    HQ010915-1
    HQ020508-1
    HQ030906-1
致謝



本文編號(hào)：3462365