本研究旨在探究豬精子獲能處理對精子蛋白泛素化水平的影響以及添加泛素結(jié)合酶（E2）抑制劑NSC697923對精子蛋白泛素化水平和精卵結(jié)合能力的影響。實驗設(shè)6個處理,即空白對照組（未添加任何試劑）、陰性對照組（添加DMSO）和4個NSC697923處理組（5、10、15、20μmol/L NSC697923）。通過Western blotting方法定量分析獲能精子的泛素化水平以及抑制泛素化后精子的獲能水平;采用Hoechst染色法檢測NSC697923處理組精子與成熟卵母細(xì)胞共孵育6 h后精子的黏附率。結(jié)果表明:豬精子獲能后精子蛋白的泛素化水平顯著高于鮮精組;NSC697923處理組未能檢測到精子獲能狀態(tài);NSC697923處理組精子黏附率顯著低于對照組。綜上表明,泛素-蛋白酶體系統(tǒng)是豬精子獲能過程必不可少的一環(huán),獲能伴隨著精子蛋白泛素化水平上調(diào),抑制泛素化后精卵結(jié)合能力下降,據(jù)此提出把精子蛋白泛素化作為檢測精子獲能標(biāo)志的可能性,但仍需要進(jìn)一步驗證。 

【文章來源】：中國畜牧雜志. 2020,56(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

精子頂體反應(yīng)效果的驗證

檢測精子獲能狀態(tài)后，對鮮精、獲能精子、頂體反應(yīng)精子蛋白重新進(jìn)行免疫印跡分析，結(jié)果如圖3所示，鮮精組在30 ku處標(biāo)記出Ub-蛋白條帶，而獲能和頂體反應(yīng)組在30 ku和46 ku處均標(biāo)記出Ub-蛋白條帶；獲能精子組和頂體反應(yīng)組精子蛋白總泛素化水平顯著高于鮮精組，表明精子獲能或頂體反應(yīng)時伴隨著精子蛋白泛素化水平上調(diào)。圖3 精子獲能和頂體反應(yīng)對精子蛋白泛素化水平的影響

精子獲能和頂體反應(yīng)對精子蛋白泛素化水平的影響


本文編號：3448100