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圍產(chǎn)期冷熱應(yīng)激對(duì)新生羔羊糖穩(wěn)態(tài)調(diào)控的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-10-16 12:08
  研究背景:長(zhǎng)期的寒冷和炎熱的養(yǎng)殖環(huán)境可導(dǎo)致家畜生產(chǎn)力下降。圍產(chǎn)期間環(huán)境溫度應(yīng)激可使新生羊出生體重降低,甚至導(dǎo)致死亡率的升高。我們前期在重慶地區(qū)的研究表明,季節(jié)性環(huán)境冷熱因素能造成山羊新生兒體重顯著降低,死亡率增高等負(fù)面影響。低出生體重的家畜在幼年和成年都呈現(xiàn)出難以恢復(fù)的代謝紊亂,其結(jié)果是飼料利用率和肉質(zhì)品質(zhì)的降低等,嚴(yán)重危害畜牧生產(chǎn)。雖然環(huán)境熱應(yīng)激的研究在羊上已較為深入,但針對(duì)冷應(yīng)激在山羊生產(chǎn)上的研究卻并不多見;圍產(chǎn)期環(huán)境冷應(yīng)激造成的低出生體重羔羊在其后天生長(zhǎng)過(guò)程中代謝內(nèi)分泌的影響還有待系統(tǒng)性研究。研究目標(biāo):闡釋圍產(chǎn)期冷熱應(yīng)激對(duì)低出生體重新生羊糖穩(wěn)態(tài)的影響,并分析外周組織糖代謝調(diào)控機(jī)制的變化。研究方法:本研究采用圍產(chǎn)期持續(xù)處于冬季、夏季、溫和季節(jié)的重慶大足黑山羊新生羔羊,將其分成“冷應(yīng)激組”、“熱應(yīng)激組”和“溫和組”,檢測(cè)羔羊出生后生長(zhǎng)勢(shì)能變化。通過(guò)對(duì)其葡萄糖耐量和胰島素耐量的檢測(cè),探究羔羊活體水平葡萄糖及胰島素代謝調(diào)控功能。再?gòu)姆肿訉用嫣剿鞲闻K和肌肉糖代謝相關(guān)調(diào)控通路,分析其糖穩(wěn)態(tài)紊亂的機(jī)制。研究結(jié)果和結(jié)論:冷應(yīng)激組和熱應(yīng)激組的羔羊體重較溫和組羔羊出生體重下調(diào)了26.8%和29.8%... 

【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 環(huán)境溫度應(yīng)激對(duì)畜牧業(yè)的影響
    1.2 低出生體重對(duì)胰島素分泌的影響
        1.2.1 胰島素分泌調(diào)控機(jī)制
        1.2.2 低出生體重?fù)p害胰島素分泌功能
    1.3 低出生體重對(duì)外周組織糖脂穩(wěn)態(tài)的影響
        1.3.1 胰島素在外周組織的功能及調(diào)控機(jī)制
        1.3.2 低出生體重對(duì)肝臟糖穩(wěn)態(tài)的影響
        1.3.3 低出生體重對(duì)山羊肌肉糖脂穩(wěn)態(tài)的影響
    1.4 穩(wěn)態(tài)失調(diào)的危害及其研究意義
    1.5 小結(jié)
第2章 前言
第3章 羔羊生長(zhǎng)勢(shì)能、糖耐量和胰島素耐量的測(cè)定
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 主要儀器設(shè)備
        3.1.3 溶液配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 羔羊血瘺管手術(shù)
        3.2.2 葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(GTT)
        3.2.3 胰島素耐量實(shí)驗(yàn)(ITT)
        3.2.4 脂肪酸檢測(cè)
        3.2.5 羔羊的解剖和組織保存
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 數(shù)據(jù)處理
        3.4.1 羔羊0~28日齡內(nèi)體重變化
        3.4.2 葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)(GTT)中羔羊血糖濃度和血漿胰島素濃度的變化
        3.4.3 胰島素耐受實(shí)驗(yàn)(ITT)中羔羊血糖濃度的變化
        3.4.4 三組羔羊的HOMA-IR
        3.4.5 羔羊血漿中游離脂肪酸的濃度
        3.4.6 羔羊解剖后的臟體比
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第4章 肝臟組織糖穩(wěn)態(tài)檢測(cè)
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器設(shè)備
        4.1.4 溶液配制
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 用Trizol法提取組織內(nèi)的RNA
        4.2.2 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質(zhì)量
        4.2.3 引物序列合成
        4.2.4 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        4.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
        4.2.6 組織切片的制作和切片的HE染色
        4.2.7 蛋白免疫印跡
    4.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 肝臟的脂肪異位沉積情況
        4.4.2 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質(zhì)量
        4.4.3 胰島素近端信號(hào)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)信號(hào)的表達(dá)
        4.4.4 糖異生通路相關(guān)調(diào)控因子表達(dá)情況
        4.4.5 脂肪生成通路相關(guān)調(diào)控因子表達(dá)情況
        4.4.6 胰島素信號(hào)相關(guān)的蛋白表達(dá)情況
    4.5 討論
        4.5.1 圍產(chǎn)期冷應(yīng)激組羔羊IRS2表達(dá)量下調(diào)
        4.5.2 圍產(chǎn)期冷應(yīng)激組羔羊PPARγ表達(dá)量上調(diào)
        4.5.3 結(jié)論
    4.6 小結(jié)
第5章 肌肉組織糖脂穩(wěn)態(tài)檢測(cè)
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 溶液配制
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
        5.2.2 用Trizol法提取組織內(nèi)的RNA
        5.2.3 瓊脂糖凝膠電泳確定RNA質(zhì)量
        5.2.4 引物序列合成
        5.2.5 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        5.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
    5.3 數(shù)據(jù)處理
        5.3.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)處理分析:
        5.3.2 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理分析
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 肌肉組織RNA質(zhì)量測(cè)定
        5.4.2 冷應(yīng)激組與溫和組差異基因數(shù)量
        5.4.3 較大Fold Change的差異基因
        5.4.4 qPCR對(duì)轉(zhuǎn)錄組結(jié)果的驗(yàn)證
        5.4.5 差異表達(dá)基因涉及的信號(hào)途徑類別:
        5.4.6 胰島素信號(hào)和脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控信號(hào)的表達(dá)
    5.5 討論
        5.5.1 低出生體重未直接影響肌肉胰島素信號(hào)
        5.5.2 冷應(yīng)激低出生體重羔羊血漿中游離脂肪酸含量上升
        5.5.3 圍產(chǎn)期冷應(yīng)激誘導(dǎo)肌肉內(nèi)的氧化應(yīng)激和胰島素功能紊亂
        5.5.4 結(jié)論
    5.6 小結(jié)
第6章 結(jié)論
第7章 參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]山羊圍產(chǎn)期的飼養(yǎng)管理技術(shù)要點(diǎn)[J]. 叢培強(qiáng).  山東畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[2]熱應(yīng)激影響家畜繁殖機(jī)能的機(jī)理及其調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 郭亮,張敏紅.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2008(09)
[3]宮內(nèi)生長(zhǎng)受限大鼠肝臟糖異生酶的表達(dá)增加與胰島素抵抗[J]. 劉曉梅,盧巖,潘莉莉,李書琴.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2008(02)



本文編號(hào):3439782

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