發(fā)布時間：2021-10-07 13:57

　　為建立鑒別A型塞尼卡病毒（SVA）與O型、亞洲I型、A型口蹄疫病毒（FMDV）的快速檢測方法,本研究分別設(shè)計4對特異性引物,用于擴(kuò)增SVA 3D基因（157 bp）、O型FMDV VP1基因（240 bp）、亞洲I型FMDV VP1基因（460 bp）、A型FMDV VP1基因（320 bp）。經(jīng)優(yōu)化引物濃度、退火溫度等反應(yīng)條件,初步建立了同時檢測SVA與O型、亞洲I型、A型FMDV的多重RT-PCR方法。利用該方法同時檢測SVA及O型、亞洲I型、A型FMDV、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬偽狂犬病病毒、豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、PCV3等主要豬源病毒,結(jié)果顯示該方法僅對SVA及O型、亞洲I型、A型FMDV檢測為陽性,其他均為陰性,特異性較強(qiáng);SVA、O型、亞洲I型、A型FMDV重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品10倍倍比稀釋后利用本研究建立的多重RT-PCR方法檢測,結(jié)果顯示同一反應(yīng)體系中,4種重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢出下限均為2.5×10²拷貝/μL,敏感性較高;批內(nèi)、批間重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果一致,該方法重復(fù)性較好。利用本實(shí)驗(yàn)建立的方法對2019年采集自... 

【文章來源】：中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2020,42(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【圖文】：

多重RT-PCR引物濃度的優(yōu)化結(jié)果

多重RT-PCR特異性試驗(yàn)結(jié)果

隨機(jī)選取終濃度均為2.5×107拷貝/μL的4種重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品混合物作為模板，以相同的條件進(jìn)行多重PCR的批內(nèi)和批間重復(fù)性試驗(yàn)，結(jié)果顯示，批內(nèi)和批間重復(fù)性試驗(yàn)均能擴(kuò)增出均勻一致的目的條帶（圖5），表明該方法重復(fù)性較好。圖5 多重RT-PCR重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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