Bloom解旋酶基因（BLM基因）是RecQ解旋酶家族中的重要成員,在細(xì)胞DNA的復(fù)制、重組、修復(fù)、及維持染色體末端穩(wěn)定性等過程中具有重要作用。人BLM基因突變會(huì)使BLM解旋酶活性降低,DNA修復(fù)過程受阻,導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定,進(jìn)而引起B(yǎng)loom綜合征（Bloom syndrome,BS）。BS是一種罕見隱性常染色體遺傳疾病,患者易患各種類型癌癥。關(guān)于畜禽BLM基因與疫病相關(guān)性的研究卻少有報(bào)導(dǎo)。本試驗(yàn)選取從江香豬為研究對(duì)象,采用PCR擴(kuò)增、分子克隆、原核表達(dá)、親和層析和熒光偏振等方法和技術(shù),對(duì)豬BLM基因的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究,為豬重大疾病的發(fā)生、發(fā)展和防控等方面提供科學(xué)依據(jù)和新的思路。研究結(jié)果如下:（1）運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)BLM基因在不同病理及豬不同組織中的表達(dá)差異,結(jié)果顯示:以心臟組織為對(duì)照,BLM基因在從江香豬各組織中均能檢測(cè)到表達(dá),其中在睪丸中的相對(duì)表達(dá)量最高,其次為肺、肝、脾、心、腎、小腸、大腸,在睪丸和肺組織中的表達(dá)水平均高于其他組織,為極顯著差異（P<0.01）。BLM基因在豬繁殖與呼吸道綜合征肺組織、雞白血病肝組織和鴨瘟肝組織中的表達(dá)水平均高于正常組織的表達(dá)水平... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DNA解旋酶的解鏈模型（引自Ren,2007）

圖 1.2 RecQ 解旋酶結(jié)構(gòu)域（Garcia , 2004）Fig. 1.2 structure domain of RecQ helicaseRecQ 解旋酶核心結(jié)構(gòu)域大約由 450 個(gè)氨基酸組成，含有 7 個(gè)保守的基序：Motif I、I-VI（Sharma et al.,2005），是 SF1 和 SF2 解旋酶超家族的特征性標(biāo)記。主要參與 的識(shí)別結(jié)合與偶聯(lián) NTP 水解放能與核酸底物解旋（史婧，2017）。RecQ 解旋酶除個(gè)保守的基序外，還含有一個(gè)連接在 Motif I N 末端的 Motif 0 基序（Bernstein et003），此基序非常重要。如當(dāng) Motif 0 中保守的谷氨酸（glutamine）突變成為精氨arginine）時(shí)，將會(huì)導(dǎo)致 Bloom 綜合癥的發(fā)生（Ellis et al.,1996），還會(huì)使此蛋白的 酶活性和 DNA 解旋活性喪失（Bahr et al.,1998）。RQC 結(jié)構(gòu)域位于保守的解旋酶結(jié)構(gòu)域的 C 末端，參與調(diào)控蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)反應(yīng)和 結(jié)合反應(yīng)。目前除了 RecQ4、RecQ5α和 RecQ5γ之外，絕大多數(shù) RecQ 解旋酶都含QC 基序。RQC 結(jié)構(gòu)域含有一個(gè) Zn2+結(jié)合區(qū)域和一個(gè)側(cè)翼解旋區(qū)域，能輔助結(jié)合，具有分子開關(guān)的作用（Bernstein et al.,2003）。當(dāng)大腸桿菌 RecQ 解旋酶的 Zn2+

DNA 修復(fù)過程受阻，導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定，進(jìn)而引起 BS（Sudha et人 BLM 基因位于 15q26.1 區(qū)帶上（張永娟等，2012），CDS 區(qū)包括 4254 碼 1417 個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量約為 159kD（Kitao et al.,1998；段志強(qiáng)等，201旋酶包含 RecQ 家族中高度保守的三大結(jié)構(gòu)域：解旋酶核心結(jié)構(gòu)域（Velank9；Lee et al.,2006）、RQC 結(jié)構(gòu)域（Rezazadeh，2012）、HRDC 結(jié)構(gòu)域（Kil008），除此之外，人BLM解旋酶在近C1334-1349端含有一個(gè)核定位信號(hào)序列（NLM 合成后向細(xì)胞核的靶向定位（Kaneko et al.,1997；劉金河等，2014）。B在 DNA 代謝過程中均起到重要作用，如在 DNA 復(fù)制時(shí)可修復(fù)停止或受到叉（Justin et al.,2003）。在 DNA 重組的過程中 BLM 解旋酶可以促進(jìn)同源重的溶解并阻礙鏈的交叉（Leonard et al.,2003）。BLM 解旋酶在 DNA 修復(fù)中在于對(duì)細(xì)胞 S 期感知并修復(fù)受損 DNA（Wang et al.,2000；Brosh et al.,2001；S014）。BLM 解旋酶可參與端粒末端的修復(fù)和加工以此來維護(hù)染色體的sko et al.,2002；張永娟，2012）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]甘草次酸抑制前列腺癌細(xì)胞侵襲遷移的分子機(jī)制研究[D]. 陳福.貴州大學(xué) 2017
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[5]豬肉質(zhì)性狀相關(guān)基因FoxO4、PRKAA1的克隆表達(dá)及功能研究[D]. 孫成娟.貴州大學(xué) 2017
[6]關(guān)嶺牛MSTN基因啟動(dòng)子相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的篩選、克隆及表達(dá)純化[D]. 夏丹.貴州大學(xué) 2016
[7]BLM基因在白血病細(xì)胞中的表達(dá)及其臨床意義[D]. 張永娟.蚌埠醫(yī)學(xué)院 2012
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本文編號(hào)：3403363