雞Pax7基因多態(tài)性及組織表達規(guī)律的研究
發(fā)布時間：2021-09-19 03:02
Pax7基因調(diào)控骨骼肌衛(wèi)星細胞的增殖和分化，是一個重要的轉(zhuǎn)錄因子。Pax7基因在遺傳突變方面的研究，多集中于人、小鼠等，對于畜禽來說較少，目前，在雞上還沒有Pax7基因遺傳變異的相關(guān)報道。本試驗利用DNA混池測序技術(shù)對雞Pax7基因篩選變異位點，用PCR-RFLP技術(shù)分析其變異位點，并在固始雞安卡雞F2代資源群中分析其群體遺傳特性，對雞的生長性狀、屠體性狀、肉質(zhì)性狀等經(jīng)濟性狀及血液生化指標與多態(tài)位點進行關(guān)聯(lián)分析；根據(jù)雞Pax7基因在DNA水平上遺傳變異的分析及該基因突變對雞生長發(fā)育的影響，我們進一步在mRNA水平上研究Pax7基因不同發(fā)育階段的表達規(guī)律，進一步推測進一步該基因的表達與雞生長發(fā)育之間的關(guān)系，為研究Pax7基因功能提供更多的線索。主要結(jié)果如下:1、在雞Pax7基因的第5外顯子和第3內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)了兩個SNP位點命名為g.42723T>C位點、g.3194-3224缺失位點。其中g(shù).42723T>C位點屬于同義突變，缺失位點g.3194-3224在第三內(nèi)含子上，是一個31bp的缺失。2、關(guān)聯(lián)分析結(jié)果可知：Pax7基因g.42723T>C位點對雞4、8、10、12...
【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：64 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
Pax7基因蛋白結(jié)構(gòu)示意圖
圖 1-2 肌纖維形成過程示意圖[19]Fig.1-2 The schematic representation of myofibers[19]Pax7 基因功能研究ax7 基因在胚胎發(fā)育早期表達，參與胚胎早期近軸中胚層的發(fā)育，對機體骨骼肌的自和修復(fù)有著不可替代的作用[13]。胚胎發(fā)育時，Pax7 基因的缺乏會導(dǎo)致肌肉衛(wèi)星細胞減，無法完成細胞周期從而細胞開始凋亡；Pax7基因有一定的抗凋亡作用[20]。年來，關(guān)于 Pax7 基因的研究主要在其功能上，主要研究 Pax7 基因在肌肉形成、受復(fù)、維持狀態(tài)中自我更新等過程中的作用。有研究報道：在小鼠上，敲除 Pax7 基因組織，無法形成正常的肌纖維，小鼠在此后的 2-3 周會死亡[21]； Pax7 基因的正常表miRNA 干擾后，其下游基因 Myf5 和 MyoD 表達受到影響，肌肉不能正常發(fā)育[22]；構(gòu)x7-EnR 結(jié)構(gòu)（與 Pax7 基因起拮抗作用），發(fā)現(xiàn)肌肉衛(wèi)星細胞能正常分化成肌肉細胞eale 等研究證明 Pax7 基因可作為治療肌肉發(fā)育障礙或肌肉萎縮等肌肉疾病的靶標基shido 等在過度肥大的大鼠肌肉中研究 Pax7 基因的表達模式，發(fā)現(xiàn)大鼠發(fā)育早期的肌過量，這是因為 Pax7 調(diào)節(jié)肌肉衛(wèi)星細胞時自我更新的作用[25]。Kirkpatrick 研究報道
圖 1-3 熒光定量 PCR 擴增曲線Fig. 1-3 The real-time PCR dynamic curve資料來源：www.ibioo.com學(xué)種類學(xué)包括熒光染料和熒光探針。熒光探針[48]是在熒光能量共振轉(zhuǎn)移的基交探針[49]、分子信標等。SYBR Green 染料是一種 DNA 結(jié)合染料，嵌出熒光[50]，它的非特異性很強，可以結(jié)合多個模板，不受反應(yīng)體系的量 PCR 的定量方法量 PCR 可分為相對定量和絕對定量。相對定量通過計算樣本與參照品，絕對定量通過比較樣本與已知標準曲線而推算的樣本目的 DNA 的量量需要選擇內(nèi)參基因來標準化模板的量，一般選擇持家基因作為內(nèi)參基Ct 值法，假設(shè)每經(jīng)過一次循環(huán)，產(chǎn)物數(shù)量增加一倍，通過 Ct值反應(yīng)起算出相對表達量。量需要制定標準曲線，通常選取質(zhì)粒 DNA 作為絕對定量的標準品[52]
【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國部分地方雞種肌肉組織學(xué)特點及其肉品質(zhì)的比較研究[J]. 吳信生,陳國宏,陳寬維,王克華,常洪,童海兵,吳兆林,李碧春,張學(xué)余. 江蘇農(nóng)學(xué)院學(xué)報. 1998(04)
[2]江西玉山豬肌肉組織學(xué)特征與肉質(zhì)的關(guān)系[J]. 王亞鳴,劉龍芳. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1994(03)
碩士論文
[1]雞肌纖維特性及Myogenin基因多態(tài)性的研究[D]. 秦召.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[2]雞血清生化指標與部分脂肪性狀相關(guān)性及谷草轉(zhuǎn)氨酶同工酶的研究[D]. 梅承君.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3400878
【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】：64 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
Pax7基因蛋白結(jié)構(gòu)示意圖
圖 1-2 肌纖維形成過程示意圖[19]Fig.1-2 The schematic representation of myofibers[19]Pax7 基因功能研究ax7 基因在胚胎發(fā)育早期表達，參與胚胎早期近軸中胚層的發(fā)育，對機體骨骼肌的自和修復(fù)有著不可替代的作用[13]。胚胎發(fā)育時，Pax7 基因的缺乏會導(dǎo)致肌肉衛(wèi)星細胞減，無法完成細胞周期從而細胞開始凋亡；Pax7基因有一定的抗凋亡作用[20]。年來，關(guān)于 Pax7 基因的研究主要在其功能上，主要研究 Pax7 基因在肌肉形成、受復(fù)、維持狀態(tài)中自我更新等過程中的作用。有研究報道：在小鼠上，敲除 Pax7 基因組織，無法形成正常的肌纖維，小鼠在此后的 2-3 周會死亡[21]； Pax7 基因的正常表miRNA 干擾后，其下游基因 Myf5 和 MyoD 表達受到影響，肌肉不能正常發(fā)育[22]；構(gòu)x7-EnR 結(jié)構(gòu)（與 Pax7 基因起拮抗作用），發(fā)現(xiàn)肌肉衛(wèi)星細胞能正常分化成肌肉細胞eale 等研究證明 Pax7 基因可作為治療肌肉發(fā)育障礙或肌肉萎縮等肌肉疾病的靶標基shido 等在過度肥大的大鼠肌肉中研究 Pax7 基因的表達模式，發(fā)現(xiàn)大鼠發(fā)育早期的肌過量，這是因為 Pax7 調(diào)節(jié)肌肉衛(wèi)星細胞時自我更新的作用[25]。Kirkpatrick 研究報道
圖 1-3 熒光定量 PCR 擴增曲線Fig. 1-3 The real-time PCR dynamic curve資料來源：www.ibioo.com學(xué)種類學(xué)包括熒光染料和熒光探針。熒光探針[48]是在熒光能量共振轉(zhuǎn)移的基交探針[49]、分子信標等。SYBR Green 染料是一種 DNA 結(jié)合染料，嵌出熒光[50]，它的非特異性很強，可以結(jié)合多個模板，不受反應(yīng)體系的量 PCR 的定量方法量 PCR 可分為相對定量和絕對定量。相對定量通過計算樣本與參照品，絕對定量通過比較樣本與已知標準曲線而推算的樣本目的 DNA 的量量需要選擇內(nèi)參基因來標準化模板的量，一般選擇持家基因作為內(nèi)參基Ct 值法，假設(shè)每經(jīng)過一次循環(huán)，產(chǎn)物數(shù)量增加一倍，通過 Ct值反應(yīng)起算出相對表達量。量需要制定標準曲線，通常選取質(zhì)粒 DNA 作為絕對定量的標準品[52]
【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國部分地方雞種肌肉組織學(xué)特點及其肉品質(zhì)的比較研究[J]. 吳信生,陳國宏,陳寬維,王克華,常洪,童海兵,吳兆林,李碧春,張學(xué)余. 江蘇農(nóng)學(xué)院學(xué)報. 1998(04)
[2]江西玉山豬肌肉組織學(xué)特征與肉質(zhì)的關(guān)系[J]. 王亞鳴,劉龍芳. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1994(03)
碩士論文
[1]雞肌纖維特性及Myogenin基因多態(tài)性的研究[D]. 秦召.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[2]雞血清生化指標與部分脂肪性狀相關(guān)性及谷草轉(zhuǎn)氨酶同工酶的研究[D]. 梅承君.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號：3400878
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