為制備牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）gD蛋白單克隆抗體,并對其免疫學特性進行分析與鑒定。用CHO細胞表達的IBRV-gD蛋白作為免疫原免疫8周齡的Balb/c小鼠,無菌取其脾細胞與SP2/0細胞進行細胞融合,篩選陽性雜交瘤細胞株,經(jīng)小鼠腹腔注射,待小鼠腹腔膨脹后,收集腹水,純化后進行單克隆抗體濃度、純度、類及亞類、抗體效價、相對親和常數(shù)、Western blot和間接免疫熒光測定。結(jié)果表明,篩選到2株陽性雜交瘤細胞株,分別命名為4G3D4和9D7A7。4G3D4和9D7A7這2株單抗純化后的濃度分別為2.6 mg/mL、1.6 mg/mL;親和常數(shù)分別為2.30E+10、1.88E+09;抗體亞類均為IgG1,輕鏈為kappa鏈;且均能與IBRV發(fā)生特異性反應,與接種IBRV的MDBK細胞發(fā)生反應,產(chǎn)生特異性熒光;間接ELISA測定腹水效價分別為1∶204 800、1∶12 800。利用CHO細胞表達的IBRV-gD蛋白成功制備了2株單克隆抗體,為下一步建立特異性的IBRV檢測方法奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：動物醫(yī)學進展. 2020,41(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

2株單克隆抗體的Western blot鑒定

2株單抗的純度鑒定

2株單抗的親和常數(shù)測定

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3397281