豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性病毒（porcineepidemic diarrhea virus, PEDV）引起的一種以仔豬腹瀉、嘔吐、脫水為主要臨床癥狀的傳染病。PEDV屬于尼多病毒目（Nidovirales）、冠狀病毒科（Coronaviridae）、冠狀病毒屬（Coronavirus），是有囊膜的正鏈RNA病毒。PEDV基因組為28kb，含有6個開放性閱讀框（ORFs），其中ORF2編碼的纖突蛋白（S蛋白）為PEDV的結(jié)構(gòu)蛋白之一，對于PED的診斷及防治具有重要意義。本研究根據(jù)GenBank公布的PEDV基因組全序列，針對S蛋白中的可誘導(dǎo)強中和反應(yīng)的S1-1抗原表位基因設(shè)計特異性引物對其進行克隆、不同表達載體原核表達，并且利用重組蛋白（His-S1-1）免疫BALB/c小鼠研制單克隆抗體。另外，通過對釀酒酵母真核表達質(zhì)粒pYD1-S1-1的改造，使誘導(dǎo)表達成本大大降低。1. PEDV S1-1基因克隆及原核表達根據(jù)GenBank已發(fā)表的PEDV基因組全序列設(shè)計1對表達引物，通過RT-PCR擴增出PEDV S1-1蛋白的42... 

【文章來源】：江西農(nóng)業(yè)大學江西省

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PEDV結(jié)構(gòu)示意圖

重組質(zhì)粒Fig2-2Digestionidentificati

PCR擴增結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒CH/S株N蛋白基因的遺傳變異及其原核表達[J]. 陳建飛,馮力,時洪艷,孫東波,白興華,佟有恩.  中國預(yù)防獸醫(yī)學報. 2007(11)
[2]豬流行性腹瀉病毒分子生物學研究進展[J]. 孫東波,馮力,時洪艷,陳建飛.  動物醫(yī)學進展. 2006(10)
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[4]抗豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體的研制及其特性鑒定[J]. 孫智鋒,錢永清,方錫玲,聞人楚,唐永蘭,許大新,陳培龍.  中國獸醫(yī)學報. 1998(02)
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[9]應(yīng)用免疫熒光法診斷豬流行性腹瀉的研究[J]. 崔現(xiàn)蘭,馬思奇,王明,于文濤,魏風祥,周金法.  中國畜禽傳染病. 1990(05)

博士論文
[1]豬流行性腹瀉病毒S蛋白抗原表位鑒定及受體結(jié)合域的初步篩選[D]. 孫東波.中國農(nóng)業(yè)科學院 2008
[2]豬流行性腹瀉病毒主要結(jié)構(gòu)蛋白不同抗原片段在重組干酪乳桿菌中的表達及其免疫學評價[D]. 葛俊偉.東北農(nóng)業(yè)大學 2008

碩士論文
[1]豬流行性腹瀉病毒重組M蛋白的原核表達、純化及鑒定[D]. 高慎陽.東北農(nóng)業(yè)大學 2006



本文編號：3393240