發(fā)布時間：2021-09-11 11:40

　　大豆凝集素（SBA）是大豆抗營養(yǎng)因子中重要的一種，影響動物的腸道結構和功能，從而降低了動物對大豆蛋白的利用效率。因此，本論文通過三個試驗，研究不同濃度的SBA對上皮細胞膜完整性和屏障功能的影響，為進一步探究大豆凝集素的抗營養(yǎng)機理奠定了基礎。試驗I：采用機械刮取與膠原酶Ⅳ消化相結合的方法分離新生的仔豬小腸上皮細胞，結合相差消化法與相差貼壁法對分離的細胞進行純化，通過觀察細胞形態(tài)和采用細胞免疫組織化學法對純化的細胞進行鑒定。試驗結果顯示：機械刮取結合膠原酶Ⅳ消化法獲得了生長狀態(tài)良好的仔豬小腸上皮細胞，在倒置顯微鏡下觀察，細胞形態(tài)呈卵圓形或多角形，且細胞邊界清晰。純化后，當細胞純度達到95%以上時，采用角蛋白8單克隆抗體鑒定，結果呈陽性。試驗II：不同濃度的SBA對豬小腸上皮細胞完整性的影響。分別用濃度為0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mg/mlSBA處理仔豬小腸上皮細胞24h、48h和72h后，通過觀察細胞形態(tài)，測定跨上皮細胞電阻值（TEER），細胞存活（MTT值）以及細胞培養(yǎng)液中堿性磷酸酶（AP）的活性，反映SBA對細胞膜通透性的的影響。試驗結果表明：1)隨著SBA濃度... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 大豆凝集素的研究進展
        1.1 凝集素的發(fā)現(xiàn)與定義
        1.2 大豆凝集素的結構
        1.3 大豆凝集素的抗營養(yǎng)作用
    第二章 腸道屏障的研究進展
        2.1 腸道黏膜屏障
        2.2 屏障功能損傷的后果
        2.3 屏障功能的評估方法
    第三章 緊密連接蛋白的研究進展
        3.1 緊密連接蛋白
        3.2 腸上皮細胞機械屏障中緊密連接蛋白的功能
第二篇 研究內容
    第一章 仔豬小腸上皮細胞的原代培養(yǎng)
        1.1 材料與方法
        1.2 結果
        1.3 討論
        1.4 結論
    第二章 大豆凝集素對豬小腸上皮細胞通透性的影響
        2.1 材料與方法
        2.2 結果
        2.3 討論
        2.4 結論
    第三章 大豆凝集素對上皮細胞緊密連接蛋白分布與相對表達量的影響
        3.1 材料與方法
        3.2 結果與分析
        3.3 討論
        3.4 結論
結論
參考文獻
附錄
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]腸道屏障功能及其評價指標的研究進展[J]. 胡紅蓮,高民.  中國畜牧雜志. 2012(17)
[2]雞胚小腸上皮細胞的分離及原代培養(yǎng)研究[J]. 洪智敏,賈永杰,瞿明仁,黎觀紅,劉思國.  江西農業(yè)大學學報. 2011(06)
[3]模擬失重對大鼠小腸黏膜緊密連接蛋白表達的影響`[J]. 陳英,楊春敏,毛高平,王萍,劉慶森,郭明洲.  航天醫(yī)學與醫(yī)學工程. 2011(05)
[4]堿性磷酸酶特性及其應用的研究進展[J]. 王秋穎.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(01)
[5]大豆凝集素的研究進展[J]. 李鵬,付永平,張輝.  糧油加工. 2010(07)
[6]α-酮戊二酸對脂多糖應激斷奶仔豬空腸黏膜蛋白合成和抗氧化能力的影響[J]. 劉堅,侯永清,丁斌鷹,劉玉蘭,朱惠玲,王蕾,李永塘.  中國畜牧雜志. 2010(11)
[7]仔豬小腸黏膜特異性結合大豆凝集素的免疫組化研究[J]. 王利民,胡海霞,楊樹寶,欒維民,秦貴信.  中國畜牧雜志. 2010(11)
[8]Occludin蛋白調控機制及臨床意義的研究進展[J]. 張宇飛,嵇武,黎介壽.  腸外與腸內營養(yǎng). 2010(03)
[9]新生仔豬小腸上皮細胞的分離培養(yǎng)和鑒定[J]. 王靜,張彥明,仝鋼,劉芳寧,周宏超,何雷,楊小云,徐彥召,洪海霞.  畜牧獸醫(yī)學報. 2010(01)
[10]緊密連接蛋白claudin的研究進展[J]. 雷軍,夏祥國.  瀘州醫(yī)學院學報. 2009(06)

博士論文
[1]大豆凝集素在不同種屬動物體內的消化動力學及抗營養(yǎng)作用比較研究[D]. 王利民.吉林農業(yè)大學 2007

碩士論文
[1]大豆凝集素受體標記及大豆凝集素對大鼠小腸上皮細胞的影響[D]. 穆成龍.吉林農業(yè)大學 2011
[2]大豆凝集素對體外培養(yǎng)的兔小腸上皮細胞的影響及靶位點的標記[D]. 劉飛飛.吉林農業(yè)大學 2011



本文編號：3392933