血吸蟲�。⊿chistosomiasis）是由血吸蟲（Schistosome）感染所引起的一種嚴(yán)重危害人、畜健康的寄生蟲病,流行于全球74個國家和地區(qū),約有5-6億人受到威脅。目前,防治血吸蟲病的主要策略是依賴于治療藥物吡喹酮的廣泛應(yīng)用,然而,防治實(shí)踐已表明單依靠藥物治療不能解決重復(fù)感染的問題,并且,藥物的不斷使用可能會引起抗藥性蟲株的出現(xiàn)。因此,篩選、鑒定新的抗血吸蟲病的候選疫苗分子和藥物靶標(biāo)顯得尤為重要。血吸蟲生活在宿主的血管中,需要氧化還原酶來抵抗宿主免疫系統(tǒng)或者血吸蟲自身代謝產(chǎn)生的活性氧自由基（ROS）,血吸蟲缺乏過氧化氫酶,也沒有TrxR和GR這兩種酶,取而代之的是一種多功能酶——硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶（TGR）,該酶具有TrxR. GR和Grx三種酶的功能。鑒于這種獨(dú)特性,對TGR的研究受到寄生蟲學(xué)者的重視。本文以rSjTGR作為研究對象,開展了動物免疫保護(hù)效果評估及機(jī)制分析,酶特性和基因功能分析,以及金諾芬對SjTGR抑制作用分析,為深入了解SjTGR在日本血吸蟲生長發(fā)育中的作用提供了基礎(chǔ)。1、重組日本血吸蟲硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶（SjTGR）免疫保護(hù)作用及機(jī)制分析應(yīng)... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１融合蛋白ＳｊＴＧＲ純化結(jié)果??Ｍ：蛋白分子量標(biāo)志；１：純化的蛋白ＳｊＴＧ民；??Ｆｉｇ丄民ｅｓｕｌｔ?ｏｆ?化ｅ?ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ＳｊＴＧ民??

別�。蕞枺保惫�、ＧＳＳＧ、冊０為底物。！＾＾１〇１１＇瓜為底物的活性為１．８７７±０．１的１１／１峭，Ｗ??ＧＳＳＧ為底物的活性為０．壯０．０１?Ｕ／ｍｇ，?Ｗ?ＨＥＤ為底物的活性為５１．２８６±４．６２?Ｕ／ｍｇ（表??１）。酶活性的測定是利用紫外分光光度計(jì)測定前２?ｍｉｎ吸光值的變化，圖１顯示了??ｉｒＳｊＴＧＲ測定時的吸光值的變化。??表１日本血吸蟲至組蛋白ＴＧＲ酪的活性??Ｔａｂｌｅ?１?Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ＴＧＲ?ｅｎｚｙｍｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?Ｓ．?ｊａｐｏｎｉｃｕｍ??巧?底物?日本血吸蟲ＴＧＲ??Ｅｎｚｙｍｅ?Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ?Ｓ．?Ｊａｐｏｎｉｃｕｍ?ＴＧＲ??ＴｒｘＲ?ＮＡＤＰＨ＋ＤＴＮＢ?１．８７７±０．化?９?Ｕ／ｍｇ??ＧＲ?ＮＡＤＰＨ＋ＧＳＳＧ?Ｏ．ＳｉＯ．Ｏｌ?Ｕ／ｍｇ??Ｇｒｘ?ＮＡＤＰＨ＋ＨＥＤ?５１．２８６±４．６２?Ｕ／ｍｇ??７８??

ｒＳｊＴＧＲ、溫度和ＰＨ值中，改變其中任何一項(xiàng)的溫度／ｐＨ值，而其他濃度／數(shù)值不變的??情況下，分析ｒＳｊＴＧ民的動力學(xué)。經(jīng)過分析，發(fā)現(xiàn)該酶活體系最適溫度為２５°Ｃ和最適??ｐＨ是７?（圖２）。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，在溫度過高或ｐＨ過堿的情況下，ＯＤ?４１２的數(shù)值開??始呈現(xiàn)無規(guī)律的變化：先上升，后又下降。我們推測：溫度過高或者ｐＨ過堿，可能??會使酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，致其最終失活。??７９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]金諾芬抗日本血吸蟲活性機(jī)制及其細(xì)胞毒性的探討[J]. 劉建,胡薇,徐斌,王吉鵬,王樹奇,王小寧.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2012(06)
[2]日本血吸蟲硫氧還蛋白-1的克隆、表達(dá)和功能分析[J]. 劉建,徐斌,張曉,劉璐,胡薇,王小寧.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2012(05)
[3]不同劑量順鉑腹腔灌注聯(lián)合全身化療治療無腹水期卵巢癌的臨床觀察[J]. 楊趙娟,王季堃,李巍,王莉.  中國藥房. 2010(44)
[4]寄生性吸蟲谷胱甘肽過氧化物酶生物信息學(xué)分析[J]. 章瑩,蔡國斌,何立,蔣明森.  中國人獸共患病學(xué)報(bào). 2010(04)
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[6]重組日本血吸蟲四跨膜蛋白第二親水基團(tuán)對小鼠免疫保護(hù)作用的研究[J]. 余傳信,殷旭仁,李健,吳宇迪,華萬全,梁幼生,高琪.  中國血吸蟲病防治雜志. 2009(01)
[7]重組日本血吸蟲超氧化物歧化酶融合蛋白對小鼠免疫保護(hù)作用的研究[J]. 余傳信,李健,殷旭仁,吳宇迪,華萬全,宋慧卓,梁幼生,高琪.  中國血吸蟲病防治雜志. 2008(01)
[8]日本血吸蟲超氧化物歧化酶的表達(dá)與免疫活性鑒定[J]. 余傳信,殷旭仁,李健,許永良,徐明,高琪,梁幼生.  中國血吸蟲病防治雜志. 2007(03)
[9]血吸蟲硫氧還蛋白免疫原性研究 Ⅰ日本血吸蟲硫氧還蛋白DNA疫苗的構(gòu)建和鑒定[J]. 曹建平,韓海勃,劉述先.  中國血吸蟲病防治雜志. 2005(04)
[10]血吸蟲硫氧還蛋白免疫原性研究 Ⅱ日本血吸蟲硫氧還蛋白DNA疫苗小鼠保護(hù)性免疫研究[J]. 曹建平,徐馀信,韓海勃,宋光承,李小紅,盧濰媛,沈玉娟,劉述先.  中國血吸蟲病防治雜志. 2005(04)

碩士論文
[1]日本血吸蟲體被蛋白SjTSP1LHD重組蛋白和SjGCP核酸疫苗免疫保護(hù)效果初評估[D]. 張娟.上海師范大學(xué) 2012
[2]日本血吸蟲重組抗原疫苗SjGCP-GST和Sj28 GST免疫保護(hù)力和免疫機(jī)制初步研究[D]. 李東.上海師范大學(xué) 2011



本文編號：3384177